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题名蓖麻和线虫的两种不同结构脂肪酸去饱和酶的原核表达
被引量：1
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作者
元冬娟
吴湃
熊继红
周克元
江黎明
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机构
广东医学院基因营养健康研究中心
广东医学院生物化学与分子生物学教研室
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008年第S1期393-396,共4页
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基金
广东省科技计划项目(2005B10401011)
广东省自然科学基金(5011595)
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文摘
目的:通过在原核表达系统中表达蓖麻的可溶性脂肪酸去饱和酶基因和线虫的fat-1脂肪酸去饱和酶基因,为脂肪酸去饱和酶序列结构与功能的研究奠定基础。方法:将蓖麻RCD△9脂肪酸去饱和酶和线虫fat-1脂肪酸去饱和酶基因亚克隆到大肠杆菌BL21表达载体pET32a+中,获得重组表达载体pET32a+-R9,pET32a+- F1,并通过SDS-PAGE和Western Blotting鉴定蛋白的表达情况。结果:经PCR和测序鉴定,证实两个重组质粒含有目的基因片段;SDS-PAGE和Western Blotting证实两种蛋白在大肠杆菌中获得表达,但表达量具有明显的不同;Anthepro软件对蛋白跨膜结构的分析,验证蓖麻△9脂肪酸去饱和酶和线虫fat-1脂肪酸去饱和酶在结构上的不同。结论:蓖麻的RCD脂肪酸去饱和酶和线虫的fat-1脂肪酸去饱和酶都得到了表达,但线虫fat-1脂肪酸去饱和酶表达量偏低;这可能与fat-1脂肪酸去饱和酶是一类跨膜蛋白的性质直接相关。因此,对于线虫fat-1脂肪酸去饱和酶的基于蛋白纯化的结构分析有待进一步的研究。
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关键词
蓖麻△9脂肪酸去饱和酶
线虫fat-1脂肪酸去饱和酶
原核表达
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Keywords
Ricinus communis(Castor)△9 acyl-ACP desaturase
C.elegan fat-1 desaturase
Prokaryotic expression
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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