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《临床免疫学检验》实验课教学改革尝试 被引量:15
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作者 徐军发 吕世静 +2 位作者 杨维青 陈章权 何德 《西北医学教育》 2008年第5期913-915,共3页
《临床免疫学检验》是医学检验专业重要的专业课程,实验教学改革是本课程教学改革的重要内容。近年来,由于医学检验专业的招生人数不断增加,给医学检验的教学工作带来了较大的压力,《临床免疫学检验》实验课的教学也面临了较大的困... 《临床免疫学检验》是医学检验专业重要的专业课程,实验教学改革是本课程教学改革的重要内容。近年来,由于医学检验专业的招生人数不断增加,给医学检验的教学工作带来了较大的压力,《临床免疫学检验》实验课的教学也面临了较大的困难。我们在教学中通过整合实验教学内容、采用灵活多样的实验教学方法、加大实验室开放力度、尝试实验设计竞赛和吸引学生参与教师科研课题的研究等途径加强对实验课教学改革,对培养学生的动手能力、科学素质、创造性思维和分析问题的能力起到了重要的促进作用。 展开更多
关键词 临床免疫学检验 实验教学 教学内容 教学方法 实验设计竞赛
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上腹部手术患者外周血中性粒细胞凋亡及TNF-α、IL-6和IL-8水平变化的临床意义 被引量:7
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作者 廖文焱 张美兰 +1 位作者 张良清 徐军发 《山东医药》 CAS 北大核心 2004年第35期1-3,共3页
目的 观察上腹部手术患者围手术期外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡及 TNF-α、IL - 6和 IL - 8水平的变化 ,为控制术后炎症提供依据。方法 选择 35例择期行上腹部手术患者 ,采用流式细胞术检测其术前和术后不同时点外周血 PMN凋亡及 TNF-... 目的 观察上腹部手术患者围手术期外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡及 TNF-α、IL - 6和 IL - 8水平的变化 ,为控制术后炎症提供依据。方法 选择 35例择期行上腹部手术患者 ,采用流式细胞术检测其术前和术后不同时点外周血 PMN凋亡及 TNF-α、IL - 6和 IL - 8水平。结果 手术患者术前 PMN凋亡率明显低于健康人 (对照组 ) ,P<0 .0 1,TNF- α和 IL- 8水平高于对照组 ,但 IL- 6水平与对照组差异无显著性 (P>0 .0 5 )。术后 3、12、2 4、36小时 PMN凋亡呈进行性下降 ,72小时时有所升高 ;TNF- α水平术后 3、12、2 4小时呈进行性升高 ,36小时开始下降、IL- 6和 IL- 8水平术后 3、12、2 4、36小时呈进行性升高 ,72小时开始下降。结论 手术应激可致上腹部手术患者外周血 PMN凋亡延迟 ,炎性细胞因子水平升高 ;手术创伤可能是术后炎症反应的原因之一。 展开更多
关键词 IL-6 TNF-Α 上腹部手术 IL-8 术后 患者 升高 水平 结论 显著性
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急性颅脑损伤患者外周血TNF-α、IL-6、IL-8和NO水平的变化及临床意义 被引量:9
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作者 廖文焱 张美兰 +1 位作者 张良清 徐军发 《河南医学研究》 CAS 2005年第1期55-57,共3页
目的 :探讨急性颅脑损伤患者外周血TNF -α、IL -6、IL- 8和NO水平的变化及其临床意义。方法 :采用ELISA法检测TNF- α、IL- 6和IL -8,化学比色法检测NO。结果 :中、重型颅脑损伤患者外周血中TNF- α、IL- 6、IL -8和NO浓度明显高于对... 目的 :探讨急性颅脑损伤患者外周血TNF -α、IL -6、IL- 8和NO水平的变化及其临床意义。方法 :采用ELISA法检测TNF- α、IL- 6和IL -8,化学比色法检测NO。结果 :中、重型颅脑损伤患者外周血中TNF- α、IL- 6、IL -8和NO浓度明显高于对照组和轻型颅脑损伤患者 (P <0 . 0 1) ;轻型组颅脑损伤患者TNF- α高于对照组 ,但IL -6、IL- 8和NO浓度与对照组比较无显著意义。不同病情颅脑损伤患者外周血TNF α、IL- 6、IL -8和NO浓度与病情呈正相关。结论 :TNF- α、IL -6、IL- 8和NO参与了急性颅脑损伤的病理生理过程 ,其测定对于早期评估脑损伤的严重程度和预后有重要的临床意义。 展开更多
关键词 IL-8 IL-6 TNF-Α 患者 外周血 急性颅脑损伤 临床意义 结论 变化 参与
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橡胶延长因子基因的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量:2
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作者 陈章权 吴坤鑫 +2 位作者 梁晓东 黄震 陆田田 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第29期12619-12621,共3页
[目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达,并采用亲和层析... [目的]制备橡胶延长因子重组蛋白及其多克隆抗体。[方法]用RT-PCR法扩增橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)编码区基因,将其克隆到原核表达载体pDEST17中,转化大肠杆菌BL21-AI,用L-阿拉伯糖诱导重组蛋白的表达,并采用亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫小鼠制备多克隆抗体,并用ELISA和W estern blot对抗体效价和特异性进行鉴定。[结果]高效表达和纯化了橡胶延长因子重组蛋白,用其免疫家小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗体,W estern blot检测显示该抗体可识别胶乳中的天然橡胶延长因子。[结论]成功获得橡胶延长因子重组蛋白,制备了效价高、特异性好的鼠抗橡胶延长因子抗体,为进一步橡胶延长因子及其他橡胶粒子膜蛋白的生物学功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 橡胶延长因子 基因 表达 抗体 制备
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IL-37b基因克隆及其真核的表达载体构建 被引量:2
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作者 何玲鸽 赵付前 +3 位作者 林妙芬 祝惠钦 王森 陈章权 《山东医药》 CAS 2013年第39期1-3,共3页
目的克隆IL-37b编码区基因,并构建其真核表达载体。方法通过RT-PCR扩增IL-37b编码区基因,DNA测序鉴定后,将阳性克隆提取质粒,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过菌落PCR和DNA测序等进行鉴定。结果凝胶电泳显示... 目的克隆IL-37b编码区基因,并构建其真核表达载体。方法通过RT-PCR扩增IL-37b编码区基因,DNA测序鉴定后,将阳性克隆提取质粒,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过菌落PCR和DNA测序等进行鉴定。结果凝胶电泳显示RT-PCR扩增出1条大小约650 bp特异条带,DNA测序结果显示获取了大小为654 bp的IL-37b编码区基因。PCR和DNA测序对所构建的真核表达载体鉴定结果表明IL-37b编码区基因正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功克隆了IL-37b编码区基因,并成功构建其真核表达载体,为下一步IL-37b生物学作用的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 白细胞介素-37 基因克隆 真核表达载体
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重组人psoriasin蛋白的制备与鉴定
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作者 陈章权 梁晓东 +1 位作者 陆田田 黄震 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第48期21-23,共3页
目的制备鉴定人psoriasin重组蛋白,为其作用机制的深入研究奠定基础。方法PCR法扩增人psoriasin基因,克隆至pET28原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化... 目的制备鉴定人psoriasin重组蛋白,为其作用机制的深入研究奠定基础。方法PCR法扩增人psoriasin基因,克隆至pET28原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)。用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化目的蛋白,用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot法对重组蛋白的相对分子质量、纯度和免疫原性进行分析。结果psoriasin编码区基因扩增得到一306 bp特异条带,BLAST分析显示碱基无突变,阅读框架正确;SDS-PAGE显示纯化出相对分子质量为14 kD的重组psoriasin,纯度>95%;Western blot显示该重组蛋白能与抗人psoriasin单克隆抗体发生特异性反应。结论psor-iasin重组蛋白成功制备,该蛋白具有较好的免疫活性,可用于进一步的研究。 展开更多
关键词 PSORIASIN 表达 纯化 鉴定
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卡介苗体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞ICAM-1表达
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作者 曾今诚 鲍晶晶 +4 位作者 王红梅 张慧 梁艳芳 张俊爱 徐军发 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期278-280,共3页
目的探讨卡介苗(bacillus Calmette-Guerin,BCG)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-2Z细胞及细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响及可能的调控机制。方法显微镜观察细胞形态学变化和记录细... 目的探讨卡介苗(bacillus Calmette-Guerin,BCG)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)CNE-2Z细胞及细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响及可能的调控机制。方法显微镜观察细胞形态学变化和记录细胞被胰蛋白酶完全消化所用时间;流式细胞术检测细胞表面ICAM-1表达;免疫细胞化学检测细胞NF-κB表达,western blot检测ICAM-1、NF-κB表达。结果 BCG作用24、48和72 h细胞对培养介质的粘附力增加,且被胰蛋白酶完全消化所用的时间明显长于对照组[(5.8±0.4)、(7.8±0.4)、(8.8±0.4)min vs(5.0±0.5)min,F=22.01,P<0.01];流式细胞术检测24、48和72 h组ICAM-1表达的平均荧光强度(MnX)明显高于对照组[(25.2±0.4)、(28.7±1.1)、(37.2±1.6)vs(23.4±0.9),F=112.34,P<0.01];免疫细胞化学结果表明,BCG作用72 h组NF-κB表达水平高于对照组。western blot结果表明,各组NF-κB和ICAM-1表达均明显高于对照组。结论 BCG体外诱导鼻咽癌CNE-2Z细胞ICAM-1表达,且该过程可能与NF-κB信号途径有关。 展开更多
关键词 卡介苗 鼻咽癌 细胞间黏附分子1
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