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多重实时荧光定量PCR鉴别欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV检测方法的建立 被引量:6
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作者 温青娜 周玲玲 +2 位作者 申红 杨菊凤 林祥群 《动物医学进展》 北大核心 2015年第6期1-8,共8页
根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,... 根据欧洲型N基因、美洲型M基因和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)nsp2基因的各自保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够检测欧洲型、美洲型和高致病性PRRSV的多重实时荧光定量PCR方法。该方法的重复试验表明其批内和批间的变异系数最高值分别为1.84%和1.76%;灵敏性试验表明其检测下限为10copies/μL;特异性试验表明与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性;临床试验表明,该方法能够快速准确地检测出临床组织样本中美洲型及高致病性PRRSV的核酸;此外,本研究用欧洲型PRRSV质粒进一步验证了该方法可以检测出欧洲型PRRSV的目的基因。该方法的建立为不同类型的PRRSV快速检测提供了有效手段,可用于猪繁殖与呼吸综合征疫情的监测及防控。 展开更多
关键词 欧洲型 美洲型 高致病性 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重实时荧光定量PCR
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鉴别欧洲型和美洲型PRRSV荧光定量RT-PCR方法的建立 被引量:2
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作者 温青娜 周其伟 周玲玲 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第3期51-57,共7页
为了建立鉴别欧洲型和美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量RT-PCR方法,根据欧洲型和美洲型PRRSV的M基因保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够鉴别欧洲型和美洲型P... 为了建立鉴别欧洲型和美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的荧光定量RT-PCR方法,根据欧洲型和美洲型PRRSV的M基因保守序列设计特异性的引物和不同荧光标记的TaqMan荧光探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立了能够鉴别欧洲型和美洲型PRRSV的双重双色荧光定量RT-PCR方法。该方法的重复试验表明其组内和组间的变异系数最高分别为1.30%和1.96%;灵敏性及特异性试验表明其检测下限为1×101copies/μL,而且与其他一些猪源病毒无交叉反应,具有良好的特异性。该检测方法的建立为不同型别的PRRSV快速诊断提供了有效手段,能够应用于临床样品检测。 展开更多
关键词 欧洲型 美洲型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 TAQMAN探针 荧光定量RT-PCR
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同时检测CSFV、PRRSV、PRV及PCV2多重荧光定量PCR方法的建立 被引量:7
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作者 何世成 周其伟 +4 位作者 张浩旭 王卫国 鲁信花 唐小明 周玲玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期850-855,共6页
为建立可以同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的快速、敏感的检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的CSFV、PRRSV、PRV和PCV2 4种病毒的基因序列设计引物和探针,建立了... 为建立可以同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的快速、敏感的检测方法,本研究根据Gen Bank中登录的CSFV、PRRSV、PRV和PCV2 4种病毒的基因序列设计引物和探针,建立了一种能够用于同时检测这4种病毒的多重荧光定量PCR方法,并对其反应条件进行优化。结果显示,4种病毒的标准曲线相关系数均达到0.98以上,具有良好的线性关系。对CSFV、PRRSV、PRV和PCV2以外的其他病毒株核酸扩增均呈阴性,具有较强的特异性。灵敏度试验结果显示,该方法对这4种病毒的最低检测量均能达到10拷贝/μL。此外,该检测方法的批内和批间重复性试验变异系数均小于5%,表明所建立的方法具有很好的重复性。利用建立的方法对59例疑似猪繁殖障碍疾病样本进行检测,结果显示,单一病毒感染样本7例,阳性率为11.86%;2种或3种病毒混合感染阳性率为44.07%(26/59);无4种病毒同时感染的样本。以上结果表明所建立的检测方法具有快速、准确、特异性好、灵敏度高等特点,能够对CSFV、PRRSV、PRV和PCV2病毒同时进行检测,可以用于相关疫情的监测及防控。 展开更多
关键词 CSFV PRRSV PRV PCV2 荧光定量PCR
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参香养胃胶囊治疗十二指肠溃疡脾虚气滞证Ⅱ期临床试验 被引量:4
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作者 卢炼钢 黄晓芬 +2 位作者 吴松青 周靖宇 梁东 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期280-284,共5页
目的初步评价参香养胃胶囊(党参、丁香、两面针、黄芪、甘草、厚朴、陈皮、苍术)治疗十二指肠溃疡脾虚气滞证候的疗效及临床应用的安全性。方法采用分层区组随机、双盲、阳性药物平行对照、多中心临床研究的方法,240位受试者随机进入试... 目的初步评价参香养胃胶囊(党参、丁香、两面针、黄芪、甘草、厚朴、陈皮、苍术)治疗十二指肠溃疡脾虚气滞证候的疗效及临床应用的安全性。方法采用分层区组随机、双盲、阳性药物平行对照、多中心临床研究的方法,240位受试者随机进入试验组(参香养胃胶囊和模拟法莫替丁胶囊)和对照组(法莫替丁胶囊和模拟参香养胃胶囊)。疗程28 d。结果临床试验结果表明,参香养胃胶囊用于治疗活动期十二指肠溃疡(脾虚气滞证)患者,对中医症状疗效与法莫替丁胶囊相当;参香养胃胶囊连续服用4周后,溃疡胃镜疗效的痊愈率和显效率分别达到18.75%、56.25%,与法莫替丁胶囊的痊愈率和显效率接近(分别为20.18%、62.28%)。试验组与对照组依从性、用药持续时间、用药量的组间差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组和对照组的不良事件和不良反应发生率,经Fisher检验,组间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论Ⅱ期临床试验表明参香养胃胶囊治疗十二指肠溃疡活动期(脾虚气滞证)安全、有效。 展开更多
关键词 参香养胃胶囊 法莫替丁 十二指肠溃疡 脾虚气滞证
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2种中草药组方减肥功能的动物试验研究
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作者 陶倩 金鑫 +3 位作者 刘硕 马思遥 吴松青 吴赟 《安徽农业科学》 CAS 2019年第17期169-173,共5页
[目的]为探讨2种中草药组方的潜在减肥效果,成功构建肥胖大鼠试验模型。[方法]在连续饲养8周后,取肥胖大鼠的肝脏和脂肪组织称重,检测3项血清生化指标和大鼠体内14项肥胖相关因子水平,并将相关结果进行统计学分析。[结果]2种受试样品都... [目的]为探讨2种中草药组方的潜在减肥效果,成功构建肥胖大鼠试验模型。[方法]在连续饲养8周后,取肥胖大鼠的肝脏和脂肪组织称重,检测3项血清生化指标和大鼠体内14项肥胖相关因子水平,并将相关结果进行统计学分析。[结果]2种受试样品都能够降低肥胖大鼠的体重和脂肪重量,改善血清中血糖、甘油三酯和胆固醇的水平;降低下丘脑中神经肽Y的水平、肝脏中脂肪酸合成酶的活性、血清中生长激素释放肽、生长激素和胰岛素的浓度;升高下丘脑中瘦素和血清中胰高血糖素样肽-1的浓度。[结论]2种受试样品对肥胖模型大鼠都有一定的减肥作用,有进一步开发成减肥类产品的潜力。 展开更多
关键词 中草药组方 肥胖模型大鼠 肥胖相关因子 减肥 功能
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