鼠李糖乳杆菌菌株LR12和LR76的抗氧化性研究 被引量：14

1

作者 王玉华 王立梅 +2 位作者 冯印 高晶 胡耀辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第19期177-180,共4页

以耐受过氧化氢实验筛选抗氧化性强鼠李糖乳杆菌菌株,并对筛选菌株进行过氧化氢耐受能力、清除羟自由基能力和超氧阴离子自由基能力进行表征。结果获得两株抗过氧化氢能力强的鼠李糖乳杆菌菌株——LR12和LR76。两菌株在1.0mmol/L的过氧... 以耐受过氧化氢实验筛选抗氧化性强鼠李糖乳杆菌菌株,并对筛选菌株进行过氧化氢耐受能力、清除羟自由基能力和超氧阴离子自由基能力进行表征。结果获得两株抗过氧化氢能力强的鼠李糖乳杆菌菌株——LR12和LR76。两菌株在1.0mmol/L的过氧化氢溶液中2h内具有良好的耐受性;LR12和LR76培养物的羟自由基清除率分别为48%和55%,超氧化阴离子自由基清除率分别为57%和68%,LR76菌株清除羟自由基和超氧化阴离子自由基的能力强于阳性对照鼠李糖乳杆菌LGG,LR76菌株略低于LGG。说明两菌株具有高效清除羟自由基和超氧化阴离子自由基能力。表明两菌株起抗氧化作用的活性成分可能与活细胞和细胞内活性成分有密切关系。 展开更多

关键词 鼠李糖乳杆菌 抗氧化 H2O2耐受能力 羟自由基 超氧阴离子自由基

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L-Cys与葡萄糖对酵母发酵合成谷胱甘肽的影响 被引量：6

2

作者 郑丽雪 齐斌 +1 位作者 梅艳珍 王立梅 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2011年第4期157-160,共4页

通过在7.5 L发酵罐中,分别以流加葡萄糖和L-半胱氨酸与流加葡萄糖协同作用2种方式研究了酵母对分批发酵生产谷胱甘肽的影响。结果表明,从第7 h开始恒速[1.5 g/(L.h])流加葡萄糖直至发酵结束,发酵24 h后GSH产量达最大,为151.6 mg/L,比流... 通过在7.5 L发酵罐中,分别以流加葡萄糖和L-半胱氨酸与流加葡萄糖协同作用2种方式研究了酵母对分批发酵生产谷胱甘肽的影响。结果表明,从第7 h开始恒速[1.5 g/(L.h])流加葡萄糖直至发酵结束,发酵24 h后GSH产量达最大,为151.6 mg/L,比流加前提高37%。在恒速流加葡萄糖基础上,当发酵至12 h,向发酵罐中一次性添加3 mmol半胱氨酸,最终GSH产量达最大,为213.3 mg/L,比分批发酵提高了93%。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 分批发酵 流加葡萄糖 半胱氨酸

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加压柱层析法纯化苦瓜总皂甙的工艺研究 被引量：3

3

作者 朱益波 金烨琛 +1 位作者 林霄 齐斌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第8期359-362,共4页

采用乙醇提取苦瓜总皂甙,并利用加压柱层析法对其进行纯化,以提取温度、浸提时间、乙醇浓度、固液比为考察因素,通过单因素试验及正交试验确定了最佳提取条件:乙醇浓度80%(V/V)、温度80℃、浸提时间2h、固液比1:20;影响提取因素的主次... 采用乙醇提取苦瓜总皂甙,并利用加压柱层析法对其进行纯化,以提取温度、浸提时间、乙醇浓度、固液比为考察因素,通过单因素试验及正交试验确定了最佳提取条件:乙醇浓度80%(V/V)、温度80℃、浸提时间2h、固液比1:20;影响提取因素的主次顺序为:乙醇浓度>固液比>提取时间>温度;利用AB-8大孔吸附树脂加压层析柱法吸附纯化苦瓜总皂甙,吸附工艺条件为:吸附时间20h、流速2ml/min;洗脱条件为:洗脱时间60min、洗脱液乙醇浓度80%、洗脱液流速2ml/min。所得苦瓜总皂甙纯度为48%。 展开更多

关键词 苦瓜总皂甙 提取 纯化 AB-8大孔树脂 加压柱层析

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微生物法制备L-半胱氨酸及其代谢调节研究进展 被引量：3

4

作者 梅艳珍 王立梅 齐斌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第17期345-348,共4页

L-半胱氨酸在食品、医药和化妆品等行业中得到广泛应用。本文综述了微生物法制备L-半胱氨酸的研究进展,分析了L-半胱氨酸的代谢调节策略,对微生物法生产L-半胱氨酸具有很大的参考价值。

关键词 L-半胱氨酸:生物合成 丝氨酸乙酰转移酶 反馈抑制

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固定化蛋白酶水解核桃蛋白及产物特性研究 被引量：3

5

作者 薛洋 黄鹂 +1 位作者 齐斌 王立梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第19期203-206,共4页

初步研究固定化蛋白酶对核桃蛋白的酶解条件及产物在亚油酸体系中的抗氧化性。用海藻酸钙包埋中性蛋白酶Neutrase0.8L,固定化酶酶活保留率为57.41%;固定化酶最适pH6.0,最适温度50℃;在底物浓度为70g/L核桃蛋白溶液中加入3.5g/L固定化酶... 初步研究固定化蛋白酶对核桃蛋白的酶解条件及产物在亚油酸体系中的抗氧化性。用海藻酸钙包埋中性蛋白酶Neutrase0.8L,固定化酶酶活保留率为57.41%;固定化酶最适pH6.0,最适温度50℃;在底物浓度为70g/L核桃蛋白溶液中加入3.5g/L固定化酶,保温5h,核桃蛋白水解度达18.37%;酶解产物具有明显的还原能力,并能有效地防止亚油酸的氧化。 展开更多

关键词 固定化 核桃 水解度 抗氧化性 中性蛋白酶

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利用低pH处理促进酿酒酵母2-10515生产谷胱甘肽 被引量：6

6

作者 郑丽雪 王斌 +1 位作者 朱娉 齐斌 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2014年第21期116-118,共3页

根据酿酒酵母2-10515摇瓶发酵生产谷胱甘肽发酵曲线特点,设计了一种低p H环境,即将种子液先在p H3.5条件下培养6 h,经接种后以适应发酵过程中长时间的低p H环境从而促进其合成谷胱甘肽的能力。低p H环境中的种子液接种发酵过程中,发酵... 根据酿酒酵母2-10515摇瓶发酵生产谷胱甘肽发酵曲线特点,设计了一种低p H环境,即将种子液先在p H3.5条件下培养6 h,经接种后以适应发酵过程中长时间的低p H环境从而促进其合成谷胱甘肽的能力。低p H环境中的种子液接种发酵过程中,发酵液生物量、胞内谷胱甘肽总产量及胞内谷胱甘肽含量最大值分别为9.7 g/L、25.6 mg/L、4.1 mg/g,比未经处理条件下最大值分别提高了38.3%、39.5%、5.8%。此结果表明,利用低p H处理能够提高酿酒酵母2-10515生产谷胱甘肽能力。 展开更多

关键词 低pH处理 酿酒酵母 发酵 谷胱甘肽

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原生质体诱变选育高产谷胱甘肽菌株及基因表达分析 被引量：3

7

作者 孙姜 朱益波 +2 位作者 王立梅 邓大庆 齐斌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第23期176-179,共4页

以Saccharomyces cerevisiaeY518为出发菌株,通过原生质体诱变提高产谷胱甘肽的能力。结果表明:用0.03mol/L HNO2处理原生质体3min,致死率为85.96%,突变率为6.85%;经过4轮连续的HNO2诱变,筛选得到一株胞内谷胱甘肽产量(14.85mg/g干质量... 以Saccharomyces cerevisiaeY518为出发菌株,通过原生质体诱变提高产谷胱甘肽的能力。结果表明:用0.03mol/L HNO2处理原生质体3min,致死率为85.96%,突变率为6.85%;经过4轮连续的HNO2诱变,筛选得到一株胞内谷胱甘肽产量(14.85mg/g干质量)约比出发菌株高24%的突变株。进一步研究谷胱甘肽合成相关的基因表达量,发现其合成途径编码限速酶的基因GSH1的表达量上调了2.26倍。因此,突变株胞内谷胱甘肽水平的提高可能是由上调的GSH1的表达量导致的。 展开更多

关键词 SACCHAROMYCES CEREVISIAE 原生质体诱变 谷胱甘肽 基因GSH1

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高产GSH酵母突变株Y518谷胱甘肽合成酶结构分析 被引量：5

8

作者 王雅楠 梅艳珍 +2 位作者 郑丽雪 齐斌 王立梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第17期258-261,共4页

酿酒酵母突变株Saccharomyces cerevisiaeY518比原始菌株谷胱甘肽产量有明显提高,有较好的耐酸性,本研究通过克隆突变前后谷胱甘肽合成酶基因并进行结构比较,分析其突变后耐酸性提高的原因。结果表明:Pro54Leu使突变残基扭转角度由-40.2... 酿酒酵母突变株Saccharomyces cerevisiaeY518比原始菌株谷胱甘肽产量有明显提高,有较好的耐酸性,本研究通过克隆突变前后谷胱甘肽合成酶基因并进行结构比较,分析其突变后耐酸性提高的原因。结果表明:Pro54Leu使突变残基扭转角度由-40.2°变为-50.4°,柔性增强,可能有利于酶催化过程中"帽子"结构域的位移形成闭合构象而提高了与底物结合的稳定性;Leu54侧链基团向外伸展,包裹暴露表面的—SH,避免因氧化而影响酶分子活性;同时疏水性的增强可能使C端羧基pKa值下降从而使活性位点pKa值降低,导致最适pH值的改变。 展开更多

关键词 谷胱甘肽合成酶 酿酒酵母突变株Y518 亚硝基胍 耐酸性

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响应面法优化产丙酸杆菌素菌株的培养条件 被引量：8

9

作者 王海晶 王玉华 齐斌 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第2期13-16,共4页

响应面法已成功运用于发酵过程的优化,可以对发酵培养基及培养条件等诸多因素进行考察和评价,从而有效地确定重要因子的最优水平,取得更好的发酵效果,因此本文主要采用响应面法对丙酸杆菌素产生菌株的发酵培养基进行优化,以提高丙酸杆... 响应面法已成功运用于发酵过程的优化,可以对发酵培养基及培养条件等诸多因素进行考察和评价,从而有效地确定重要因子的最优水平,取得更好的发酵效果,因此本文主要采用响应面法对丙酸杆菌素产生菌株的发酵培养基进行优化,以提高丙酸杆菌素抑菌能力。首先采用Plackett-Burman(PB)试验设计法筛选出3个主要因素为葡萄糖、Tween80和pH值,然后通过最陡爬坡法和响应面分析方法确定主要因素的最佳质量浓度分别为:葡萄糖2.32 g/L,Tween80 0.1 g/L,pH值为7.0。在优化条件下丙酸杆菌素抑菌能力增强,形成的抑菌圈直径是24.76 mm,是优化前的1.25倍。 展开更多

关键词 丙酸杆菌素 Plackett-Burman试验 最陡爬坡法 响应面分析方法

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产甲壳素酶菌株的筛选、鉴定及其酶解产物分析 被引量：3

10

作者 徐田甜 陈彬 +5 位作者 侯是媛 曹丹 许晨磊 齐斌 郑丽雪 王立梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第22期207-212,共6页

以甲壳素为唯一碳源,从自然发酵的麻虾酱中筛选到1株产甲壳素酶的放线菌X1。通过形态学、分子生物学以及生理生化实验鉴定为淀粉酶链霉菌(Streptomyces diastaticus),命名为S.diastaticus strain CS 1801。在30℃条件下培养7 d,该菌株... 以甲壳素为唯一碳源,从自然发酵的麻虾酱中筛选到1株产甲壳素酶的放线菌X1。通过形态学、分子生物学以及生理生化实验鉴定为淀粉酶链霉菌(Streptomyces diastaticus),命名为S.diastaticus strain CS 1801。在30℃条件下培养7 d,该菌株所产甲壳素酶活力为117.4 U/L。利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱仪对发酵液中成分进行分析,确定甲壳素在淀粉酶链霉菌CS1801作用下分解成壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖和壳六糖。 展开更多

关键词 甲壳素酶 链霉菌 酶联免疫吸附实验 超高效液相色谱-串联质谱

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L.paracasei W2芳香族氨基酸转氨酶基因克隆与序列分析 被引量：2

11

作者 唐红梅 周丽丽 +2 位作者 张奇 邵丽丽 王立梅 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2013年第8期86-90,共5页

分析和预测副干酪乳杆菌(L.paracasei W2)芳香族氨基酸转氨酶基因及其编码蛋白的结构和特性,以指导其生物学功能的试验研究。以L.paracasei W2基因组为模板扩增1 164 bp的转氨酶基因序列,对其编码的蛋白进行疏水性分析、磷酸化位点预测... 分析和预测副干酪乳杆菌(L.paracasei W2)芳香族氨基酸转氨酶基因及其编码蛋白的结构和特性,以指导其生物学功能的试验研究。以L.paracasei W2基因组为模板扩增1 164 bp的转氨酶基因序列,对其编码的蛋白进行疏水性分析、磷酸化位点预测、二级、三级结构预测并构建分子进化树。结果表明该基因编码387个氨基酸,理论相对分子质量是41961.2 Da,等电点为6.03,具有完整的保守结构域和保守功能位点,该蛋白有两个跨膜螺旋区,与干酪乳杆菌的转氨酶进化关系最近。 展开更多

关键词 副干酪乳杆菌 芳香族氨基酸转氨酶 生物信息学 序列分析

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酿酒酵母GSH Ⅰ基因的克隆、表达与结构分析 被引量：1

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作者 宋冬梅 朱益波 +2 位作者 周丽丽 郑丽雪 齐斌 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期157-160,共4页

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escheri... γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(GSHI)是合成谷胱甘肽的关键酶。通过构建GSHI活性较高的重组菌来提高合成GSH的能力。利用PCR技术扩增获得了酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)2-10515的gshI基因,构建原核表达载体pET-28a-gshI,转化到Escherichia coli BL21(DE3)中,重组菌经诱导表达后,测得GSHI的酶活力为46.09U/mg湿菌,活性较高。进一步利用生物信息学方法分析和预测GSHI基因的序列和蛋白结构,为在基因水平上提高该酶的表达量和活性提供了理论依据。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 序列分析 表达

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副干酪乳杆菌乳酸脱氢酶的生物信息学分析 被引量：1

13

作者 赵婷 姚雯轶 王立梅 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第17期250-253,共4页

目的:分析和预测副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)基因及其编码蛋白的结构和特性,以指导其生物学功能的实验研究。方法:利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白... 目的:分析和预测副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)基因及其编码蛋白的结构和特性,以指导其生物学功能的实验研究。方法:利用美国国家生物技术信息中心(NCBI)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY)中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其他生物信息学分析软件,如ClustalX、VMD,从数据库中得到乳酸脱氢酶基因,分析、预测该基因编码的蛋白理化性质、翻译后的修饰位点、拓扑结构、二级结构、三级结构和功能域。并与其他微生物的乳酸脱氢酶蛋白序列进行比对,得出它们的保守序列。结果:该基因编码335个氨基酸,其蛋白理论分子质量为36608.8u,预测该蛋白有3个跨膜区。与干酪乳杆菌的乳酸脱氢酶进化关系最近。结论:应用生物信息方法可预测得到副干酪乳杆菌的乳酸脱氢酶的结构与功能方面的信息。 展开更多

关键词 副干酪乳杆菌 乳酸脱氢酶 生物信息学

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酵母突变株Y518的生理特性分析

14

作者 刘莉娟 朱益波 +1 位作者 齐斌 王立梅 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期152-154,159,共4页

以酿酒酵母突变株Y518为研究对象,研究其生理特性。本文比较了突变株Y518与原始菌株2-10515的平板菌落形态、在培养过程中生长量、耗糖速率、发酵液pH、酒精产量及菌体蛋白表达量等生理方面的变化规律。结果表明,与2-10515相比,Y518生... 以酿酒酵母突变株Y518为研究对象,研究其生理特性。本文比较了突变株Y518与原始菌株2-10515的平板菌落形态、在培养过程中生长量、耗糖速率、发酵液pH、酒精产量及菌体蛋白表达量等生理方面的变化规律。结果表明,与2-10515相比,Y518生长缓慢,葡萄糖消耗速率低,发酵过程中发酵液pH低,且菌体蛋白表达量高。Y518在YEPD培养基上的菌落形态与2-10515相似,菌落较小,TTC染色为白色,在非发酵型碳源培养基上几乎不生长。说明Y518生理发生改变,而且存在呼吸缺陷。 展开更多

关键词 酿酒酵母 小菌落 呼吸缺陷 生理改变

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