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NKD1促进结肠癌细胞迁移的机制研究及临床意义
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作者 陆玥瑶 邓建忠 +1 位作者 刘迁 陆文斌 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第19期1468-1477,共10页
目的:探讨NKD1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理特征因素间的相关性,以及研究其在结肠癌细胞迁移中的作用,并明确其调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白ZEB1的具体机制,为转移性结肠癌提供... 目的:探讨NKD1在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理特征因素间的相关性,以及研究其在结肠癌细胞迁移中的作用,并明确其调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白ZEB1的具体机制,为转移性结肠癌提供新的治疗靶点。方法:使用生物信息学初步分析NKD1在结肠癌细胞中的表达情况及其与临床病理特征因素间的相关性。通过收集98对来自常州市武进人民医院的结肠癌患者组织样本及相关临床信息验证生物信息学结果,绘制生存曲线。划痕实验、Transwell实验证明NKD1促进结肠癌细胞迁移。qPCR、western blot实验验证NKD1在蛋白水平调控ZEB1。Western blot、免疫沉淀等实验深入研究NKD1调控ZEB1的具体机制。结果:NKD1在结肠癌组织中高表达,其表达水平与分化程度、肿瘤T分期及是否远处转移等临床病理特征因素具有相关性;NKD1高表达与结肠癌患者的不良预后相关;过表达NKD1后促进结肠癌细胞的迁移,敲除NKD1后则结果相反;NKD1在蛋白水平调控ZEB1,并能够维持ZEB1的蛋白稳定性;高表达NKD1通过调控ZEB1与自噬相关蛋白LC3的结合抑制ZEB1的自噬降解。结论:NKD1与结肠癌患者的不良预后相关,并且可以通过调控ZEB1与自噬相关蛋白LC3的结合抑制ZEB1的自噬降解,从而促进结肠癌细胞的迁移。 展开更多
关键词 结肠癌 NKD1 迁移 自噬
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基于术前Fbg、PAR与CA199构建结直肠癌患者预后预测的列线图模型 被引量:5
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作者 刘秀玲 于华裔 +4 位作者 祁国萍 陆文斌 刘迁 杨玉薇 邓建忠 《海南医学院学报》 CAS 2022年第24期1874-1880,共7页
目的:基于术前纤维蛋白原(fibrinogen,Fbg)、血小板/白蛋白(platelet to albumin ratio,PAR)及糖类抗原199(carbohydrate antigen 19-9,CA199)构建结直肠癌患者预后的列线图预测模型。方法:回顾性纳入我院行结直肠癌(colorectal cancer,... 目的:基于术前纤维蛋白原(fibrinogen,Fbg)、血小板/白蛋白(platelet to albumin ratio,PAR)及糖类抗原199(carbohydrate antigen 19-9,CA199)构建结直肠癌患者预后的列线图预测模型。方法:回顾性纳入我院行结直肠癌(colorectal cancer,CRC)手术的323例患者,收集患者的术前检验指标及相关临床病理资料,并根据受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)计算出的cut-off值,分为Fbg、PAR高低表达组,单因素及多因素COX比例风险模型筛选独立预后因素,构建列线图预测模型,评价预测价值。结果:通过ROC曲线得出Fbg、PAR的cut-off值分别为2.80、6.05。多因素COX回归分析结果示:Fbg、PAR、CA199、TNM分期、分化程度为影响CRC患者预后的独立危险因素(P<0.05),将Fbg、PAR、CA199联合构建出风险评分并纳入列线图中,训练集及验证集ROC中曲线下面积(area under the curve, AUC)均大于0.6,校准曲线与理想曲线拟合良好。结论:基于Fbg、PAR、CA199构建的列线图准确性良好,可为CRC患者总生存期提供个体化预测。 展开更多
关键词 结直肠癌 纤维蛋白原 血小板/白蛋白 糖类抗原19-9 列线图 预后
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NKD1可促进结肠癌细胞的葡萄糖吸收:基于激活YWHAE基因的转录活性
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作者 刘迁 戴宇阳 +4 位作者 于华裔 沈颖 邓建忠 陆文斌 金建华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期585-589,共5页
目的通过研究NKD1与YWHAE调控关系,分析NKD1促进肿瘤细胞增殖的新作用机制。方法实验分组:(1)对照组:转染pcDNA3.0质粒的HCT116细胞、转染NC-siRNA的SW620细胞、正常HCT116细胞、正常SW620细胞;(2)实验组:转染pcDNA3.0-NKD1质粒的HCT11... 目的通过研究NKD1与YWHAE调控关系,分析NKD1促进肿瘤细胞增殖的新作用机制。方法实验分组:(1)对照组:转染pcDNA3.0质粒的HCT116细胞、转染NC-siRNA的SW620细胞、正常HCT116细胞、正常SW620细胞;(2)实验组:转染pcDNA3.0-NKD1质粒的HCT116细胞、转染NKD1 siRNA的SW620细胞、HCT116-NKD1细胞、SW620-nkd1-/-细胞、转染pcDNA3.0-YWHAE质粒的SW620-nkd1-/-细胞。采用Western blot及qRT-PCR实验检测结肠癌细胞中过表达或敲除NKD1对YWHAE的蛋白及mRNA水平变化的影响。采用染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测NKD1是否结合YWHAE基因启动子区域。通过双荧光素酶报告基因实验分析NKD1对YWHAE基因启动子活性的调控作用。此外,采用免疫荧光实验分析NKD1与YWHAE相互作用情况。葡萄糖检测实验分析NKD1对肿瘤细胞吸收葡萄糖的调控作用。结果与对照组相比,过表达(或敲除)NKD1不仅在蛋白水平增强(或降低)YWHAE的表达,还在mRNA水平增加(或降低)其表达(P<0.001)。ChIP实验显示NKD1蛋白能够结合YWHAE启动子序列,双荧光素酶报告基因实验表明在结肠癌细胞中过表达(或敲降)NKD1能显著增强(或降低)YWHAE启动子的转录活性(P<0.05)。此外,免疫荧光结果显示NKD1蛋白与YWHAE蛋白在结肠癌细胞内相互结合。葡萄糖水平分析实验表明,敲除NKD1明显降低结肠癌细胞对葡萄糖的吸收水平(P<0.01),而在敲除NKD1的细胞中过表达YWHAE,则细胞对葡萄糖吸收能力得到恢复(P<0.05)。结论结肠癌细胞中NKD1蛋白通过激活YWHAE基因的转录活性,促进其表达,从而促进肿瘤细胞对葡萄糖的吸收。 展开更多
关键词 NKD1 YWHAE 葡萄糖吸收 结肠癌
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