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抗VEGF单克隆抗体Fab片段在大肠杆菌的表达
被引量：
4
1
作者
霍世元
朱文华
+1 位作者
滕凌
叶亚东
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期1085-1088,1092,共5页
目的：构建、表达、纯化抗血管内皮生长因子（VEGF）的Fab片段（跟明，Vasculizumab），并检测其抗VEGF的活性。方法：首先对轻链（LC）及重链（HC）基因进行密码子优化并做了全基因合成，将补充了OmpA信号肽核苷酸序列的轻链及重链基...
目的：构建、表达、纯化抗血管内皮生长因子（VEGF）的Fab片段（跟明，Vasculizumab），并检测其抗VEGF的活性。方法：首先对轻链（LC）及重链（HC）基因进行密码子优化并做了全基因合成，将补充了OmpA信号肽核苷酸序列的轻链及重链基因分别克隆到表达质粒pET21a中，成功构建共表达质粒pET21a．LC—HC，目的基因测序正确。然后转入大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）中诱导表达，并进行了温度和IPTG诱导浓度的条件优化。结果：确定大肠杆菌周质分泌表达摇瓶发酵最佳条件为：0D。达到0．6～0．8时加人0．1mmol／LIPTG，18％诱导18小时。SDS—PAGE检测目的蛋白Fab有表达。结论：表达纯化后的Fab有抗VEGF活性，可为新药筛选提供材料。
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关键词
抗VEGF
FAB抗体
原核表达
共表达
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职称材料
题名
抗VEGF单克隆抗体Fab片段在大肠杆菌的表达
被引量：
4
1
作者
霍世元
朱文华
滕凌
叶亚东
机构
常州亚当生物技术有限公司
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第10期1085-1088,1092,共5页
基金
2011年江苏省科技支撑计划社发项目(No.BE2011666)
2012年江苏省自然科学基金项目(No.BK2012161)
文摘
目的：构建、表达、纯化抗血管内皮生长因子（VEGF）的Fab片段（跟明，Vasculizumab），并检测其抗VEGF的活性。方法：首先对轻链（LC）及重链（HC）基因进行密码子优化并做了全基因合成，将补充了OmpA信号肽核苷酸序列的轻链及重链基因分别克隆到表达质粒pET21a中，成功构建共表达质粒pET21a．LC—HC，目的基因测序正确。然后转入大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）中诱导表达，并进行了温度和IPTG诱导浓度的条件优化。结果：确定大肠杆菌周质分泌表达摇瓶发酵最佳条件为：0D。达到0．6～0．8时加人0．1mmol／LIPTG，18％诱导18小时。SDS—PAGE检测目的蛋白Fab有表达。结论：表达纯化后的Fab有抗VEGF活性，可为新药筛选提供材料。
关键词
抗VEGF
FAB抗体
原核表达
共表达
Keywords
Anti-VEGF
Fab fragment
Prokaryotic expression
Co-expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗VEGF单克隆抗体Fab片段在大肠杆菌的表达
霍世元
朱文华
滕凌
叶亚东
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
4
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