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鸢尾黄素对MG63骨肉瘤细胞凋亡和自噬作用的研究 被引量：4
1
作者 王金莲 陈路 +1 位作者 余孟英 何江涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期3027-3031,共5页
目的:研究鸢尾黄素对MG63骨肉瘤细胞凋亡和自噬作用的影响。方法:采用不同剂量的鸢尾黄素处理MG63骨肉瘤细胞,选用MTT检测试剂盒检测MG63骨肉瘤细胞活力,Hoechst染色试剂盒检测细胞凋亡,免疫荧光检测自噬体LC3形成情况,蛋白免疫印迹试... 目的:研究鸢尾黄素对MG63骨肉瘤细胞凋亡和自噬作用的影响。方法:采用不同剂量的鸢尾黄素处理MG63骨肉瘤细胞,选用MTT检测试剂盒检测MG63骨肉瘤细胞活力,Hoechst染色试剂盒检测细胞凋亡,免疫荧光检测自噬体LC3形成情况,蛋白免疫印迹试剂盒检测凋亡和自噬相关蛋白的表达水平。结果:鸢尾黄素降低MG63骨肉瘤细胞活力,以剂量依赖的方式促进MG63骨肉瘤细胞的凋亡和自噬,并上调Bax/Bcl-2的比值,并上调cleaved caspase-3的表达,以剂量依赖的方式上调Beclin-1表达、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,下调P62水平,抑制PI3K/AKT/mTOR通路。结论:鸢尾黄素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路促进MG63骨肉瘤细胞的凋亡和自噬。 展开更多
关键词 鸢尾黄素 骨肉瘤 自噬 凋亡
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杨梅素通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路对骨性关节炎发展的影响 被引量：17
2
作者 杨鑫 李源力 +1 位作者 蒋萍 王冶 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期48-57,共10页
目的:探讨杨梅素通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路对骨性关节炎(OA)发展的缓解作用及其机制研究.方法:通过CCK-8法筛选出IL-1β诱导损伤的最适质量浓度;采用诱导损伤最适质量浓度的IL-1β构建体外骨性关节炎损伤模型,通过CCK-8测定不同浓度... 目的:探讨杨梅素通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路对骨性关节炎(OA)发展的缓解作用及其机制研究.方法:通过CCK-8法筛选出IL-1β诱导损伤的最适质量浓度;采用诱导损伤最适质量浓度的IL-1β构建体外骨性关节炎损伤模型,通过CCK-8测定不同浓度的杨梅素对损伤细胞存活率的影响,筛选杨梅素的最适作用浓度.细胞实验使用分离提取的软骨细胞,分为对照组、IL-1β模型组、杨梅素组;克隆形成实验检测各组细胞的增殖能力;流式细胞术检测各组细胞的凋亡能力;酶联免疫法检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的质量浓度;Western blot检测各种细胞中PI3K/AKT/NF-κB信号通路相关蛋白的表达情况.动物实验使用SD大鼠,分为假手术组、OA模型组、杨梅素组,并通过灌胃进行给药;Masson染色观察各组大鼠软骨组织的组织结构变化;ELISA检测各组大鼠关节液中TNF-α、IL-6和IL-10的质量浓度.结果:与质量浓度为0、1、5、50、100 ng/mL的IL-1β相比,当IL-1β的质量浓度为10 ng/mL时,细胞抑制率为48.36%(P<0.01),接近半数致死量,因此IL-1β诱导损伤的最适质量浓度确定为10 ng/mL.与浓度为5、20μmol/L的杨梅素相比,当杨梅素浓度为10μmol/L时,能明显提高损伤后的软骨细胞的活性(P<0.01),因此杨梅素的最适作用浓度选择为10μmol/L;杨梅素能提高软骨细胞的增殖能力(P<0.05),降低软骨细胞的凋亡能力;同时使TNF-α、IL-6的质量浓度均减少(P<0.05),IL-10的质量浓度增加(P<0.05);杨梅素也能使软骨细胞中PI3K、AKT、NF-κB P65、IKKαβ、IKBα蛋白的磷酸化程度均下调(P<0.05),IKBα蛋白表达上调;Masson结果显示:杨梅素使受损的软骨细胞形态变规则,软骨组织的胶原纤维排列变紧密,同时使大鼠关节液中TNF-α、IL-6的质量浓度均减少(P<0.05),IL-10质量浓度增加(P<0.05).结论:杨梅素可促进软骨细胞增殖,抑制软骨细胞的凋亡,抑制骨性关节炎炎症反应,抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路的激活,明显缓解关节软骨的退变,降低骨性关节炎的进展水平. 展开更多
关键词 杨梅素 PI3K/AKT/NF-κB信号通路 骨性关节炎
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和厚朴酚对D-半乳糖致腰椎间盘退变大鼠血清炎症因子及细胞线粒体凋亡通路的影响 被引量：4
3
作者 张超 吴俊学 +2 位作者 王冶 谢海洋 彭玲 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期62-68,75,共8页
目的探索和厚朴酚对D-半乳糖致腰间盘退变大鼠血清炎症因子含量变化,细胞外基质标记物表达水平及凋亡通路相关蛋白表达水平的影响。方法 45只SD大鼠随机分为对照组(Control)、D-半乳糖(D-galactose, D-gal)模型组(Model)、和厚朴酚低剂... 目的探索和厚朴酚对D-半乳糖致腰间盘退变大鼠血清炎症因子含量变化,细胞外基质标记物表达水平及凋亡通路相关蛋白表达水平的影响。方法 45只SD大鼠随机分为对照组(Control)、D-半乳糖(D-galactose, D-gal)模型组(Model)、和厚朴酚低剂量组(2 mg/kg)、和厚朴酚中剂量组(4 mg/kg)、和厚朴酚高剂量组(8 mg/kg),每组9只。模型组和和厚朴酚给药组采用皮下注射D-gal方法建立大鼠椎间盘退变模型,对照组皮下注射等体积生理盐水。造模成功后,给药组大鼠分别灌胃和厚朴酚2、4、8 mg/kg,其余各组大鼠灌胃生理盐水,连续给药4周后处死大鼠。HE和番红O染色观察比较各组腰椎间盘形态组织学;qRT-PCR检测大鼠椎间盘组织细胞外基质标记物的mRNA水平;ELISA检测大鼠血清中白细胞介素IL-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的变化;TUNEL染色观察大鼠椎间盘的组织凋亡情况;Western blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、Caspase-3、c-Myc的蛋白表达。结果模型组和和厚朴酚低、中剂量组椎间盘组织形态学评分较对照组显著升高(P<0.05)。和厚朴酚中、高剂量组椎间盘组织形态学评分较模型组显著降低(P<0.05)。模型组和和厚朴酚低剂量组软骨受损严重,和厚朴酚中、高剂量组软骨受损较轻。和厚朴酚能显著升高SRY相关HMG盒9(SOX-9)、II型胶原(Collagen II)和蛋白聚糖(Aggrecan)的表达水平(P<0.05)。模型组和和厚朴酚低、中、高剂量组IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的含量较对照组均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,和厚朴酚中、高剂量组IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著降低(P<0.05);IL-10的含量显著升高(P<0.05)。与对照组相比,模型组和和厚朴酚低、中剂量组凋亡细胞数显著升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.05),Caspase-9、Caspase-3、c-Myc的蛋白水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,和厚朴酚中、高剂量组凋亡细胞数显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.05),Caspase-9、Caspase-3、c-Myc的蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论和厚朴酚对D-半乳糖致腰椎间盘退变有明显疗效。 展开更多
关键词 和厚朴酚 腰椎间盘退变 炎症因子 凋亡
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