丹参注射液诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞NF-κB表达研究 被引量：7

1

作者 刘青松 朱兴春 +6 位作者 蒋红 蔡燕 袁国华 杨明辉 张均 李君安 唐中 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第8期846-850,共5页

目的:探讨丹参注射液对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLSs)P65和P50表达及其在细胞内定位的影响。方法:RA患者关节液原代培养获取FLSs,终浓度为0、0.2和0.4mg/mL的丹参注射液作用24h后,采用细胞免疫化学方法对P65和P50表达定... 目的:探讨丹参注射液对类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLSs)P65和P50表达及其在细胞内定位的影响。方法:RA患者关节液原代培养获取FLSs,终浓度为0、0.2和0.4mg/mL的丹参注射液作用24h后,采用细胞免疫化学方法对P65和P50表达定位进行分析;提取核蛋白,采用免疫印迹方法检测P65和P50表达。结果:细胞免疫化学结果显示,在无药物刺激的条件下,P65和P50均主要集中在细胞质中;当经0.2mg/mL丹参注射液作用24h,P65和P50均有向细胞核转移趋势;当丹参注射液浓度为0.4mg/mL时,P65和P50在细胞核中有明显聚集。免疫印迹结果表明,P65和P50在细胞核中表达量随丹参注射液浓度升高而增加,并当丹参注射液浓度为0.4mg/mL时,二者的表达相比药物作用前显著增加,具有统计学意义(P<0.05)。结论:丹参注射液可调节RAFLSs P65和P50从细胞质向细胞核转移。 展开更多

关键词 丹参 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细 胞 NF—κB

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PPAR信号通路相关基因在急性痛风性关节炎中的作用探讨 被引量：2

2

作者 李宇琴 张惠 +3 位作者 王丹 刘静 余成秀 袁国华 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期163-168,共6页

目的:通过分析急性痛风(AG)患者、间歇期痛风(IG)患者、健康人群(HC)外周血单个核细胞(PBMCs)中mRNA的表达差异,探讨差异表达的mRNA在痛风发病中的作用及其机制。方法:选取10例AG患者、10例IG患者、10例健康体检者,采用RNA-seq及生物信... 目的:通过分析急性痛风(AG)患者、间歇期痛风(IG)患者、健康人群(HC)外周血单个核细胞(PBMCs)中mRNA的表达差异,探讨差异表达的mRNA在痛风发病中的作用及其机制。方法:选取10例AG患者、10例IG患者、10例健康体检者,采用RNA-seq及生物信息学技术分析不同组别PBMCs中mRNA的表达差异,探讨与痛风发作相关的基因及其信号通路。利用GO和KEGG数据库研究差异表达基因的生物学功能以及基因与信号通路的关系。采用实时荧光定量PCR对KEGG富集的PPAR信号通路中的相关基因(CYP27A1、ACSL1、CD36、PPARG、ANGPTL4、PLIN2)在70例痛风患者(其中AG组35例,IG组35例)、35例健康体检者的PBMCs中进行验证。结果:与HC组相比,AG组有222个显著差异基因,其中193个基因上调,29个基因下调。GO分析得出:与HC组相比,AG组差异表达的基因主要富集在对炎症、创伤、应激反应等多细胞生物过程的调节和免疫反应调节过程中。而KEGG分析显示:与HC组相比,AG组上调的基因富集在“Toll样受体信号通路”“补体和凝血级联反应”“PPAR信号通路”“脂质和动脉粥样硬化”“破骨细胞分化”“细胞因子-细胞因子受体相互作用”“趋化因子信号通路”“IL-17信号通路”“胆固醇代谢”。PPAR信号通路中相关基因的PCR验证结果显示:AG组ACSL1、CD36、PPARG、PLIN2的表达水平高于对照组(P<0.05),AG组CYP27A1、ANGPTL4的表达水平与HC组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PPAR信号通路可能参与AG的发病过程,其中ACSL1、CD36、PPARG、PLIN2可能作为急性痛风性关节炎潜在的治疗靶点;CYP27A1、ANGPTL4可能与AG的发病过程无关。 展开更多

关键词 痛风 基因 信使RNA PPAR信号通路

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NLRP3炎性体在痛风性关节炎患者炎症反应中的机制研究 被引量：49

3

作者 党万太 周京国 +4 位作者 谢文光 蔡燕 郭晓兰 赵明才 邱亚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期373-377,382,共6页

目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体在痛风性关节炎(GA)患者发病机制中的作用。方法:用RT-PCR法检测44例急性痛风性关节炎(AGA)患者、52例非急性痛风性关节炎(NAGA)患者和50名健康体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中NL... 目的:探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)炎性体在痛风性关节炎(GA)患者发病机制中的作用。方法:用RT-PCR法检测44例急性痛风性关节炎(AGA)患者、52例非急性痛风性关节炎(NAGA)患者和50名健康体检者外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(PYCARD)、半胱天冬酶-1(CASP1)的mRNA表达水平,用Western blot法检测AGA、NAGA患者和健康体检者PBMCs中NLRP3、PYCARD、CASP1、NF-κB(p105/p50)蛋白表达水平,用ELISA法检测AGA、NAGA患者和健康体检者血清IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β1表达水平。结果:NAGA组患者NLRP3的mRNA表达显著低于健康对照组与AGA组(P<0.01),AGA、NAGA组患者PYCARD的mRNA表达均显著高于健康对照组(P<0.01),AGA组患者CASP1的mRNA表达显著高于健康对照组与NAGA组(P<0.01);AGA、NAGA组患者NLRP3、CASP1蛋白表达均显著低于健康对照组(P<0.05),AGA、NAGA组患者PYCARD、NF-κB(p105/p50)蛋白表达均显著高于健康对照组(P<0.05);AGA、NAGA组患者血清IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β1表达均显著高于健康对照组(P<0.01),NAGA组患者IL-1β、IL-6表达均显著高于AGA组(P<0.01)。结论:NLRP3炎性体各基因mRNA、蛋白表达及与其相关联的致炎与抗炎性因子在GA患者中表达异常,提示NLRP3炎性体在GA患者的炎症反应中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 痛风性关节炎 NLRP3 炎性体 凋亡相关斑点样蛋白 半胱天冬酶-1

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丹参诱导类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞中Fas/FasL的表达 被引量：7

4

作者 刘青松 朱兴春 +7 位作者 邢艳 蒋红 蔡燕 雷佳红 赵明才 杨明辉 唐中 袁国华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期2452-2454,共3页

目的观察丹参对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者成纤维样滑膜细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响。方法 RA患者关节滑液经原代培养,获取成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs),分别用终浓度为0、0.2mg/ml和0.4m... 目的观察丹参对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者成纤维样滑膜细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响。方法 RA患者关节滑液经原代培养,获取成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs),分别用终浓度为0、0.2mg/ml和0.4mg/ml的丹参作用24h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存。随机选取正常人外周血,通过分离单个核细胞提取总RNA并逆转录成cDNA保存作为阳性对照。分别采用RT-PCR和SYBR Green适时荧光定量PCR方法检测Fas/FasL mRNA的表达。结果 RT-PCR结果显示,FasL只在外周血标本上有表达,而在各浓度处理的RA FLSs没有检测到;Fas无论在外周血还是不同浓度处理的RA FLSs上均有表达。定量PCR结果显示,Fas的表达量随丹参浓度增加而增加,并且在丹参浓度为0.4mg/ml时具有统计学差异(P<0.05)。Fas mRNA的表达与相应浓度下RA FLSs的凋亡率存在相关性(r=0.998,P<0.05)。结论丹参可体外诱导RA患者成纤维样滑膜细胞Fas mRNA表达上调;未检测到FasL mRNA在RA患者FLSs中的表达。Fas mRNA的上调可能与丹参诱导RA FLSs凋亡有关。 展开更多

关键词 丹参 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 凋亡 FAS FASL

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丹参诱导类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞凋亡 被引量：6

5

作者 刘青松 凡瞿明 +3 位作者 蒋红 朱兴春 邢艳 唐中 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期763-765,共3页

目的探讨丹参对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞凋亡的影响。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养,应用3～5代传代的成纤维样滑膜细胞,分为3组,分别为高剂量丹参组(丹参终浓度为50 mg/mL)、低剂量丹参组(丹参终浓度为0.39 mg/mL)... 目的探讨丹参对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞凋亡的影响。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养,应用3～5代传代的成纤维样滑膜细胞,分为3组,分别为高剂量丹参组(丹参终浓度为50 mg/mL)、低剂量丹参组(丹参终浓度为0.39 mg/mL)和溶剂对照组,采用流式细胞术结合Annexin V/FITC和PI双标记染色检测细胞凋亡率。结果与对照组比较,高剂量丹参组和低剂量丹参组细胞凋亡率均较对照组明显增加(P<0.05),并且高剂量丹参组细胞凋亡率明显大于低剂量丹参组(P<0.05)。结论丹参能有效诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡。 展开更多

关键词 丹参 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 凋亡

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基于共价有机骨架的在线微固相萃取/高效液相色谱联用检测酚类化合物

6

作者 张成江 秦悦 +6 位作者 李玉凰 谭梦 雷佳红 蒋红 蒋欣庆 张艳飞 张浪 《分析测试学报》 北大核心 2025年第8期1683-1690,共8页

该文建立了一种共价有机骨架(COF)在线微固相萃取(μ-SPE)/高效液相色谱(HPLC)联用检测酚类化合物的方法。以1,3,5-苯三甲酰肼(Bth)和1,3,5-三甲酰基间苯三酚(Tp)为有机单体,采用溶剂热法合成Bth-Tp COF材料,其结构和形貌表征表明材料... 该文建立了一种共价有机骨架(COF)在线微固相萃取(μ-SPE)/高效液相色谱(HPLC)联用检测酚类化合物的方法。以1,3,5-苯三甲酰肼(Bth)和1,3,5-三甲酰基间苯三酚(Tp)为有机单体,采用溶剂热法合成Bth-Tp COF材料,其结构和形貌表征表明材料具有良好的物化性能。将Bth-Tp作为微固相萃取吸附剂用于5种酚类的分离富集,通过单因素实验,系统考察了影响萃取性能的主要因素;与4种商业化材料相比,其萃取效果显著优于商用材料。在最优实验条件下,结合高效液相色谱-二极管阵列检测器,对环境水样中5种酚类化合物进行检测。方法在0.50~200.00μg/L范围内线性关系良好(r≥0.9990),检出限(S/N≥3)为0.10~2.00μg/L,饱和萃取容量为2.65~7.84μg。在3个浓度水平下的加标回收率为82.5%~120%,相对标准偏差(RSD)为0.80%~7.0%。与传统的酚类化合物富集检测方法相比,该方法具有简单、快速、灵敏、准确的显著优势。 展开更多

关键词 共价有机骨架 在线微固相萃取 高效液相色谱 酚类化合物 水样

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从《金匮要略》探讨痛风“代谢-炎症-免疫”发病机制 被引量：11

7

作者 党万太 周京国 谢文光 《辽宁中医杂志》 CAS 2014年第10期2090-2093,共4页

痛风是一种单钠尿酸盐沉积所致的晶体相关性关节病,与嘌呤代谢紊乱及(或)尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关,属于代谢性风湿病范畴。然近几年研究显示痛风的发病同时与炎症和免疫相关。笔者主要从中医经典——《金匮要略》对痛风的... 痛风是一种单钠尿酸盐沉积所致的晶体相关性关节病,与嘌呤代谢紊乱及(或)尿酸排泄减少所致的高尿酸血症直接相关,属于代谢性风湿病范畴。然近几年研究显示痛风的发病同时与炎症和免疫相关。笔者主要从中医经典——《金匮要略》对痛风的辨证治疗来探讨其对痛风"代谢-炎症-免疫"发病机制的指导作用,以此发挥中西交融的优势,最终为痛风的治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 痛风 金匮要略 代谢-炎症-免疫 发病机制

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乙酰唑胺对类风湿关节炎滑膜细胞水通道蛋白1,3表达的影响 被引量：3

8

作者 岳燕林 刘剑平 +2 位作者 刘青松 蒋红 谢传美 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1177-1180,共4页

目的观察乙酰唑胺(AZ)对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)的水通道蛋白1(AQP1)和AQP3表达的影响,与骨关节炎(OA)对比,初步探讨AQP1、AQP3在RA发病中的作用。方法收集12例RA患者和10例OA患者膝关节积液,从关节液中分离RAFLS及OA... 目的观察乙酰唑胺(AZ)对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RAFLS)的水通道蛋白1(AQP1)和AQP3表达的影响,与骨关节炎(OA)对比,初步探讨AQP1、AQP3在RA发病中的作用。方法收集12例RA患者和10例OA患者膝关节积液,从关节液中分离RAFLS及OAFLS并行体外培养,(10-4、10-6、10-8)mol/L AZ分别处理RAFLS 24、48、72 h,应用半定量反转录-聚合酶连反应(RT-PCR)方法检测RAFLS和OAFLS中AQP1和AQP3 mRNA的表达;免疫荧光细胞化学染色检测10-4mol/L AZ处理OAFLS和RAFLS 24、48、72 h,AQP1蛋白的表达。结果 RAFLS AQP1 mRNA和RAFLS AQP3 mRNA均有表达。RAFLS AQP1 mRNA表达水平较OAFLS AQP1 mRNA明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。不同浓度AZ处理后RAFLS AQP1 mRNA表达水平较对照组明显减低(P<0.05),呈时间、剂量依赖性。不同浓度AZ处理后,RAFLS AQP3 mRNA表达水平各组间以及与对照组相比差异无统计学意义,与OAFLS AQP3 mRNA表达水平差异也无统计学意义(P>0.05);AQP1蛋白主要分布于RAFLS细胞膜,未经AZ处理的滑膜细胞AQP1蛋白表达阳性明显,AZ处理后的AQP1蛋白表达减弱,且成时间依赖性。结论 AQP1可能与RA关节腔积液形成有一定关系,AZ选择性下调RAFLS中AQP1的表达,对AQP3的表达无明显影响。 展开更多

关键词 乙酰唑胺 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 水通道蛋白

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原发性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2变化情况及其意义研究 被引量：5

9

作者 文钟 青玉凤 +6 位作者 周京国 谢文光 易婷 朱丹 陈刚 李梦兰 童晓霞 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第15期1789-1793,1806,共6页

背景痛风不断攀升的高发病率已经成为重大的公共健康问题。三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)在尿酸代谢中的重要作用已经得到广泛关注,成为近年来研究的热点。因此,针对ABCG2的研究有利于发现痛风发病的分子生物学机制,为痛风的诊断... 背景痛风不断攀升的高发病率已经成为重大的公共健康问题。三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)在尿酸代谢中的重要作用已经得到广泛关注,成为近年来研究的热点。因此,针对ABCG2的研究有利于发现痛风发病的分子生物学机制,为痛风的诊断、治疗提供新的思路。目的观察原发性痛风性关节炎患者外周血单个核细胞(PBMCs) ABCG2表达水平的变化情况,探究ABCG2在原发性痛风性关节炎中可能的作用。方法选取2016年6月—2017年2月于川北医学院附属医院风湿免疫科门诊就诊及住院的男性原发性痛风性关节炎患者(GA组)82例,其中急性期痛风(AGA亚组)和间歇期痛风(IGA亚组)患者各41例。依据患者血尿酸水平进一步分为血尿酸<420μmol/L痛风亚组(NUA亚组)31例、血尿酸≥420μmol/L痛风亚组(HUA亚组)51例。另选取同期川北医学院附属医院体检中心的男性健康体检者(HC组)46例。检测患者血尿酸水平、肌酐水平、胱抑素C(Cys-C)水平、红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;采用RT-qPCR、Western blotting法分别检测受试者PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平。结果 GA组PBMCs ABCG2 mRNA表达水平高于HC组(P<0.05)。IGA亚组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平高于AGA亚组(P<0.05);HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平低于IGA亚组(P<0.05);AGA亚组与HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HUA亚组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平高于NUA亚组(P<0.05);HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平低于HUA亚组(P<0.05);NUA亚组与HC组PBMCs ABCG2 mRNA及蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。男性原发性痛风性关节炎患者ABCG2 mRNA表达水平与血尿酸水平呈正相关(r=0.235,P=0.033),与肌酐水平、Cys-C水平呈负相关(r值分别为-0.227、-0.229,P值分别为0.044和0.043),与ESR、hs-CRP水平无直线相关关系(r值分别为-0.181、0.027,P值分别为0.112、0.824)。结论 ABCG2在原发性痛风性关节炎患者PBMCs中高表达,并参与尿酸的转运,但未发现其与原发性痛风性关节炎的炎症过程相关;且肾功能异常的原发性痛风性关节炎患者的PBMCs ABCG2表达下调。 展开更多

关键词 关节炎 痛风性 尿酸 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2

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SPIO标记大鼠骨髓基质干细胞及体外磁共振成像研究 被引量：3

10

作者 杨华 张小明 +2 位作者 邵阳 蒋红 翟昭华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第17期1626-1629,共4页

目的探讨以多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)为转染介质介导超顺磁性氧化铁微粒(superparamgnetic iron oxides,SPIO)标记大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的合适条件,通过标记细胞的体外磁共振成像(magnetic reson... 目的探讨以多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)为转染介质介导超顺磁性氧化铁微粒(superparamgnetic iron oxides,SPIO)标记大鼠骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的合适条件,通过标记细胞的体外磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)获取最佳的磁共振扫描序列。方法分离、纯化、培养大鼠BMSCs,SPIO和PLL以1∶0.0012混合配制氧化铁-多聚赖氨酸(F-PLL)混合液,用铁浓度分别为0、4.2、8.4、21、42、84μg/ml的FE-PLL复合物标记BMSCs。计算细胞标记阳性率,测量并绘制未标记细胞和不同浓度铁标记细胞的MTT生长曲线;对不同浓度铁标记的细胞进行磁共振成像。分别用浓度为0、0.05、0.25、0.5、1.0、5.0μg/ml的PLL同BMSCs共同培养,了解各种浓度PLL对细胞的生存是否有影响。结果细胞的标记率分别为0%、(44.40±11.33)%、(71.97±8.01)%、(88.86±9.10)%、(98.24±2.94)%、100%,随着SPIO浓度的增加而增加。MTT显示在铁浓度<42μg/ml时FE-PLL复合物对细胞的生长活性无明显影响,而铁浓度为84μg/ml时,细胞的生长活性受到抑制。PLL在浓度≤1.0μg/ml时对细胞的活力无明显影响;当PLL浓度为5.0μg/ml时,细胞生长明显受抑。MRI信号随FE-PLL复合物浓度的增加而增加(P<0.05),标记细胞的信号在T1WI的改变不及在T2WI及T2*WI明显,而以T2*WI信号改变最明显(P<0.05)。结论以PLL为转染介质,SPIO能够高效的标记BMSCs,并且在合适的浓度范围内不会影响干细胞的生长活性。 展开更多

关键词 超顺磁性氧化铁 多聚赖氨酸 骨髓基质干细胞 磁共振成像

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硬皮病动物模型及其应用研究进展 被引量：2

11

作者 巫婷婷 周京国 《动物医学进展》 CSCD 2008年第2期102-105,共4页

硬皮病是一种以组织纤维化、闭塞性血管炎和产生大量自身抗体为特征的结缔组织病,病因及发病机制至今尚未完全明了,尚无理想的治疗药物和方法。该文对建立硬皮病模型动物的选择进行了比较,介绍了应用博来霉素诱导Balb/c小鼠产生硬皮病... 硬皮病是一种以组织纤维化、闭塞性血管炎和产生大量自身抗体为特征的结缔组织病,病因及发病机制至今尚未完全明了,尚无理想的治疗药物和方法。该文对建立硬皮病模型动物的选择进行了比较,介绍了应用博来霉素诱导Balb/c小鼠产生硬皮病样病变以及应用V型胶原重塑新西兰兔硬皮病样改变等建立硬皮病模型的方法,对应用这两种动物模型研究硬皮病发病机制和中药临床治疗研究概况进行了综述。 展开更多

关键词 硬皮病 动物模型 应用

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乌头碱对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖、凋亡及自噬的影响 被引量：18

12

作者 邵鑫 袁叶双 +4 位作者 蒋先虹 贾艾敏 刘静 陈勇 刘福 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期3066-3070,F0004,共6页

目的:观察乌头碱对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡及自噬的影响,探讨其在抗类风湿关节炎疾病中的作用机制。方法:对类风湿关节炎(RA)患者的膝关节滑膜组织进行原代细胞培养RA-FLS,采用不同浓度的乌头碱对RA-FLS... 目的:观察乌头碱对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡及自噬的影响,探讨其在抗类风湿关节炎疾病中的作用机制。方法:对类风湿关节炎(RA)患者的膝关节滑膜组织进行原代细胞培养RA-FLS,采用不同浓度的乌头碱对RA-FLS进行处理,运用相差显微镜观察RA-FLS的形态结构,运用MTT法测定RA-FLS的增殖活性,流式细胞仪测定RA-FLS的细胞凋亡率,采用定量RT-qPCR、Western blot、免疫荧光法测定LC3基因和蛋白的表达。结果:乌头碱能有效抑制RA-FLS细胞增殖,倒置显微镜下发现经乌头碱处理后RA-FLS细胞逐渐变圆、间隙增加;流式检测乌头碱能促进RA-FLS凋亡;定量RT-qPCR、Western blot及免疫荧光检测LC3基因及蛋白的水平均随乌头碱浓度的增加而增加,LC3表达水平明显增强。结论:乌头碱可抑制RA-FLS增殖并诱导凋亡,且具有浓度依赖性,这可能与其过度激活RA-FLS中的自噬水平有关。 展开更多

关键词 RA-FLS 乌头碱 增殖 凋亡 自噬

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类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达增强且与病情相关 被引量：2

13

作者 邵鑫 袁叶双 +3 位作者 蒋先虹 贾艾敏 刘静 刘福 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1030-1034,共5页

目的检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中自噬标志性分子微管相关蛋白1轻链3(LC3)的mRNA及蛋白表达,探讨其与RA发病的关系。方法募集22例RA患者,同期纳入性别、年龄匹配的16例健康体检者为正常对照组。采用密度梯度离... 目的检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中自噬标志性分子微管相关蛋白1轻链3(LC3)的mRNA及蛋白表达,探讨其与RA发病的关系。方法募集22例RA患者,同期纳入性别、年龄匹配的16例健康体检者为正常对照组。采用密度梯度离心法分离PBMC;采用实时荧光定量PCR检测PBMC中LC3在mRNA水平,Western blot法检测PBMC中LC3蛋白水平,采用免疫荧光细胞化学染色检测PBMC中LC3蛋白表达;采用Pearson方法分析LC3表达与RA患者临床指标的相关性。结果与正常对照组相比,RA患者组PBMC中LC3 mRNA和蛋白水平明显增加,PBMC中LC3表达明显增强,RA患者PBMC中LC3 mRNA水平与血沉(ESR)、28关节疾病活动度评分(DAS28)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)均呈明显正相关(r依次为0.7480、0.5016、0.6518、0.7232)。结论RA患者LC3表达上调,且与ESR、DAS28、CRP、RF相关。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎(RA) 自噬 微管相关蛋白1轻链3(LC3)

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中国汉族人群SOX2基因与高度近视的关联研究 被引量：1

14

作者 严丽英 王星 +2 位作者 邹云春 雷佳红 曾官鹏 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第9期851-855,共5页

目的研究SOX2是否可作为中国汉族人群高度近视的候选基因,寻找与高度近视关联的致病基因位点。方法采用病例-对照关联分析法。将同意参加本研究的83例(160眼)正视者作为对照组,117例(211眼)高度近视患者作为病例组,所有患者均进行详细... 目的研究SOX2是否可作为中国汉族人群高度近视的候选基因,寻找与高度近视关联的致病基因位点。方法采用病例-对照关联分析法。将同意参加本研究的83例(160眼)正视者作为对照组,117例(211眼)高度近视患者作为病例组,所有患者均进行详细的眼部检查,并提取外周血白细胞基因组DNA。在中国汉族北京居民的基因型数据库中选取3个标签单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,采用SNP直接测序法进行基因分型检测。根据所有样本所得各标签SNP的基因型,计算其基因型和等位基因频率,并使用Bonferroni法进行多重检验矫正;采用χ2检验比较病例组和对照组之间等位基因频率及基因型频率分布是否有差异。结果3个标签SNP位点(rs11915160、rs4575941、rs4459940)的基因型结果在病例组和对照组中都符合Hardy-Weinberg平衡,本研究人群具有一定的代表性。rs4575941位点的基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组间的差异均具有统计学意义(P=0.04、0.03),但经Bonferroni法矫正后,两组等位基因频率差异无统计学意义(Pc=0.09);病例组rs4575941位点的等位基因G的频率明显高于对照组,OR值为1.58,等位基因G可能是高度近视的一个危险基因。结论中国汉族人群SOX2基因SNP位点rs4575941与高度近视之间的关联存在可疑性,为了明确相关性,需要进一步扩大样本量,选择合适的多重检验方法,并结合其他手段进行大数据分析。 展开更多

关键词 高度近视 SOX2基因 单核苷酸多态性

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miR17-92簇在痛风中的表达及临床意义

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作者 冯丹 姜蓉琼 +5 位作者 杨桂钊 张惠 王丹 刘静 余成秀 袁国华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期156-162,I0016,I0017,共9页

目的:探讨miR17-92簇各成员在痛风患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达,预测其可能靶点及作用通路,评估其在痛风中可能的作用机制及临床意义。方法:选取川北医学院附属医院67例痛风性关节炎(GA)患者,其中急性痛风性关节炎(AG)患者22例... 目的:探讨miR17-92簇各成员在痛风患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达,预测其可能靶点及作用通路,评估其在痛风中可能的作用机制及临床意义。方法:选取川北医学院附属医院67例痛风性关节炎(GA)患者,其中急性痛风性关节炎(AG)患者22例,间歇期痛风(IG)患者45例,对照组选取35例正常健康体检者(HC)。RT-qPCR检测miR17-92簇、IFN-γ、IL-10及JAK-STAT通路部分成员表达,收集相关实验室指标分析其相关性。结果:miR17、miR18a、miR19a、miR20a、miR19b在AG、IG、HC中表达差异均有统计学意义(H=8.753,P<0.05;H=6.338,P<0.05;H=6.523,P<0.05;H=9.061,P<0.05;H=9.729,P<0.01)。JAK3、STAT2在AG、IG、HC三组中表达差异有统计学意义(H=10.349,P<0.01;H=14.801,P<0.01)。IFN-γ在三组间表达差异有统计学意义(H=8.734,P<0.05)。AG患者miR18a表达与IBIL、Crea、MO、HGB呈负相关,miR19a表达与TC、UA、HGB呈负相关,miR20a表达与Crea呈负相关,miR19b表达与UA、HGB呈负相关。IG患者miR17表达与IBIL、WBC、LY、MO均呈负相关,miR18a表达与ALP呈正相关,miR19a表达与TC、UA呈负相关,miR20a表达与ADA、UA呈负相关。结论:miR17-92簇可能通过靶向JAK-STAT通路调控痛风发生发展、参与痛风临床生理病理过程。 展开更多

关键词 痛风 miR17-92簇 JAK-STAT通路 JAK3 STAT2 IFN-Γ

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转录因子HNF1α基因c.493T>C位点突变对其蛋白质水平的影响 被引量：1

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作者 梁淑杰 彭乙华 +3 位作者 雷佳红 贾艾敏 蒋红 蔡燕 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期256-262,共7页

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)... 肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)作为一种转录因子在维持胰腺β细胞功能、肝脏脂质代谢等过程中发挥着重要的调控作用。该基因突变是导致青少年起病的成人型糖尿病(maturity onset diabetes of the young,MODY)3型的致病原因,目前已报道的该基因的突变位点众多,如P291fsinsC、P112L等常见的突变位点,但其具体的分子机制尚不清楚。本研究对前期工作中发现的1例携带有HNF1α基因c.493T>C位点突变的MODY3患者,通过应用Mutation Surveyor软件分析突变位点的致病性,构建HNF1α野生型和突变型真核表达质粒,采用Western blot检测两种质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性变化,结果发现Mutation Surveyor软件分析提示c.493T>C位点突变可能为致病性变异基因,Western blot显示突变型真核质粒表达的HNF1α蛋白质的量和稳定性均明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。上述结果表明c.493T>C(p.Trp165Arg)变异显著影响HNF1α的表达量及稳定性,可能为其导致疾病发生的原因,为后续深入探究MODY3的分子致病机制提供了新的方向。 展开更多

关键词 MODY HNF1α 基因突变

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sCD14在痛风性关节炎患者炎症反应中的变化及其意义 被引量：14

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作者 党万太 王婧 +1 位作者 谢文光 周京国 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期514-518,共5页

目的探讨可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)在痛风性关节炎(GA)患者炎症反应中的变化及其意义。方法选取31例急性GA(AGA)患者、23例非AGA(NAGA)患者和20名健康对照者(HC),用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其外周血单个核细胞(PBMCs... 目的探讨可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)在痛风性关节炎(GA)患者炎症反应中的变化及其意义。方法选取31例急性GA(AGA)患者、23例非AGA(NAGA)患者和20名健康对照者(HC),用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测其外周血单个核细胞(PBMCs)中CD14的mRNA表达水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血浆sCD14、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达水平,用免疫比浊法测定各组血浆C反应蛋白(CRP)含量;检测各组白细胞计数(WBC)、嗜中性粒细胞绝对值(GR)、淋巴细胞绝对值(LY)、单核细胞绝对值(MO)等血常规及血尿酸(UA)等指标变化,比较3组指标的差异并分析其与PBMCs的CD14mRNA表达及血浆sCD14表达的相关性。结果 AGA组PBMCs中CD14mRNA表达量高于HC组(P<0.05);HC与NAGA组血浆sCD14蛋白表达低于AGA组(P<0.01),且NAGA组表达低于HC组(P<0.05);AGA组CRP蛋白水平高于HC与NAGA组(P<0.01);AGA、NAGA组血浆IL-1β、TNF-α蛋白水平均显著高于HC组(P<0.01),且AGA组IL-1β蛋白水平高于NAGA组(P<0.01);AGA组和NAGA组WBC高于HC组(分别P<0.01,P<0.05);AGA组GR、MO均高于HC组(P<0.05),AGA组MO高于NAGA组(P<0.05);AGA与NAGA组UA均显著高于HC组(P<0.01)。AGA组PBMCs的CD14mRNA表达与IL-1!呈正相关(rs=0.362,P=0.045);NAGA组血浆sCD14蛋白表达与GR呈正相关(rs=0.397,P=0.030)。结论 sCD14在GA患者的炎症反应中表达异常,提示sCD14在GA患者的炎症反应中可能发挥重要的调控作用。 展开更多

关键词 痛风性关节炎 SCD14 炎症 白介素 1β(IL-1β) 肿瘤坏死因子α(TNF-α) C 反应蛋白(CRP)

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青藤碱对狼疮鼠外周血IL-10、TNF-α、抗dsDNA抗体表达的影响 被引量：11

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作者 刘剑平 卢来春 +2 位作者 张国元 刘增荣 杨婧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期856-858,共3页

目的观察青藤碱对NZB/W F1代狼疮鼠外周血中IL-10、TNF-α、抗dsDNA抗体表达的影响。方法32只NZB/W F1代狼疮鼠分为4组:对照组、青藤碱40、120、360 mg/(kg.d)剂量组。分别采用ELISA法和Real-Time RT-PCR法检测NZB/W F1代狼疮鼠外周血中... 目的观察青藤碱对NZB/W F1代狼疮鼠外周血中IL-10、TNF-α、抗dsDNA抗体表达的影响。方法32只NZB/W F1代狼疮鼠分为4组:对照组、青藤碱40、120、360 mg/(kg.d)剂量组。分别采用ELISA法和Real-Time RT-PCR法检测NZB/W F1代狼疮鼠外周血中IL-10、TNF-α、抗dsDNA抗体蛋白含量和IL-10、TNF-αmRNA表达。结果3种剂量青藤碱干预3周后,NZB/W F1代狼疮鼠外周血血清中IL-10、TNF-α、抗dsDNA抗体蛋白含量和IL-10、TNF-αmRNA表达均较对照组明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论青藤碱在一定程度上能减轻NZB/W F1代狼疮鼠的免疫学异常及炎症反应。 展开更多

关键词 青藤碱 白细胞介素-10 肿瘤坏死因子-α DSDNA

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痛风性关节炎患者NLRP3炎性体基因转录剪接体mRNA表达与临床检测指标的相关分析 被引量：8

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作者 党万太 谢文光 +4 位作者 赵明才 蔡燕 李玲琴 周畅 周京国 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第16期1713-1719,共7页

目的探讨痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain,leucine rich repeat and pyrin domain cont... 目的探讨痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(nucleotide-binding oligomerization domain,leucine rich repeat and pyrin domain containing,NLRP3)炎性体基因及其转录剪接体的改变与GA患者临床实验指标的关系。方法用半定量聚合酶链反应RT-PCR检测44例急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)患者、52例非急性痛风性关节炎(non-acute gouty arthritis,NAGA)患者和50名健康体检(healthy control,HC)者PBMCs中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白[PYRIN-PAAD-DAPIN domain(PYD)and a C-terminal caspase recruitment domain(CARD),PYCARD]、半胱天冬酶1(caspase 1,CASP1)基因及其转录剪接体mRNA表达水平;检测AGA、NAGA患者与HC血常规、肝肾功能、血脂指标,比较上述3组指标的差异并分析NLRP3炎性体各基因及其转录剪接体mRNA表达与各指标的相关性。结果 NAGA组NLRP3 mRNA表达量显著低于HC组与AGA组(P<0.05),AGA组、NAGA组NLRP3-2、3、4 mRNA表达量均显著高于HC组(P<0.05);AGA组、NAGA组PYCARD、PYCARD-1、PYCARD-2 mRNA表达量均显著高于HC组(P<0.05);AGA组CASP1 mRNA表达量显著高于HC组与NAGA组(P<0.05),AGA组CASP1-6 mRNA表达量显著低于HC组(P<0.05),NAGA组CASP1-7 mRNA表达量显著低于HC组(P<0.05),AGA组CASP1-gamma mRNA表达量显著高于HC组与NAGA组(P<0.05)。AGA组、NAGA组血常规、肝肾功能、血脂指标与HC组比较差异均有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示NLRP3炎性体部分基因及其转录剪接体mRNA表达与AGA组、NAGA组部分临床实验指标具有相关性(P<0.05),与HC组临床实验指标均未见相关性(P>0.05)。结论 NLRP3炎性体基因转录剪接体mRNA在GA患者中表达异常,提示在GA患者的炎症反应中NLRP3炎性体基因转录剪接体可能发挥重要的调控作用;GA患者临床实验指标与HC组比较存在差异,且NLRP3炎性体部分基因及其转录剪接体与GA患者部分临床实验指标具有相关性。 展开更多

关键词 痛风性关节炎 NLRP3 炎性体 基因 转录剪接体

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维生素D受体Fok Ⅰ基因多态性对SLE患者维生素D受体表达的影响 被引量：6

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作者 罗雄燕 武丽君 +5 位作者 杨明辉 刘宁涛 廖涛 唐中 曾小峰 袁国华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期901-905,共5页

目的:检测维生素D受体(VDR)FokⅠ基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性,以及对SLE患者VDR mRNA表达的影响。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测VDRFokI基因位点及基因型在271例SLE患者和130例健康... 目的:检测维生素D受体(VDR)FokⅠ基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性,以及对SLE患者VDR mRNA表达的影响。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术检测VDRFokI基因位点及基因型在271例SLE患者和130例健康人中的分布情况;并应用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测VDR mRNA在48例SLE患者和38例健康对照组的表达。结果:VDRFokⅠ多态性等位基因F和f频率在SLE组和健康对照组有统计学差异(P=0.001),携带F等位基因个体发生SLE的相对危险度(OR)为1.630(95%CI=1.210-2.196,P=0.001);FF纯合子基因型频率在SLE组也明显高于健康对照组(42.8%vs25.4%,χ2=11.417,P=0.001)。同时,携带F等位基因的SLE患者(FF基因型和Ff基因型患者),浆膜炎发生率(P=0.001)及抗ds-DNA抗体(P=0.001)、抗Sm抗体(P=0.047)和抗组蛋白抗体(P=0.001)阳性率较F等位基因阴性SLE患者(ff基因型患者)明显升高。VDR mRNA在48例SLE患者表达下调,其?Ct值(?Ct值越大,表达量越小)为9.26±2.37,高于健康对照组的7.82±3.05(P=0.026)。而在SLE患者,携带F等位基因患者的VDR mRNA的?Ct值明显高于F等位基因阴性患者(10.54±1.88vs7.15±3.78,P=0.019)。结论:VDRFokⅠ多态性与SLE发病易感性有关,而且携带F等位基因的患者更容易发生浆膜炎和产生抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体等自身抗体,此可能与F等位基因下调SLE患者的VDR mRNA表达有关。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 维生素D受体 FokⅠ 基因多态性

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