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重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究
被引量：
5
1
作者
杜冰
朱道银
唐恩洁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003年第3期270-272,共3页
目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA...
目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA表达水平的改变。结果 :rh -LIF可诱导HL - 6 0细胞向单核 /巨噬细胞分化 ,抑制HL - 6 0细胞的增殖 ,使细胞停滞于G1期 :P5 3,P2 1蛋白和P5 3mRNA表达明显增强。结论 :rh -LIF对HL - 6 0细胞具增殖抑制和诱导分化作用 ,其作用机制可能与G1期阻滞及P5 3,P2 1表达增高有关。
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关键词
重组人白血病抑制因子
诱导分化
生长抑制
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职称材料
杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达
被引量：
1
2
作者
卜玲毅
胡孝素
+2 位作者
敬保迁
王雅静
马莹
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期42-44,共3页
目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进...
目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进行鉴定。结果 1 SDS -PAGE电泳检测 ,重组质粒 pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带 ,而纯化蛋白和包涵体溶解物在 36kDa处均出现了特异的表达带。 2 36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别。结论 得到了高效表达的LACK纯化蛋白 。
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关键词
利什曼原虫
LACK
聚合酶链反应
克隆
表达
免疫印迹
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职称材料
抗单链DNA单克隆抗体的制备及应用
被引量：
1
3
作者
赵明才
朱道银
唐恩洁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2002年第2期145-147,共3页
目的:制备特异性的抗单链单克隆抗体,为建立一种特异、敏感、简便的细胞凋亡检测方法奠定基础。DNA方法:根据烷化剂盐酸氮芥能特异性地修饰小牛胸腺链上的鸟嘌呤而暴露互补链上的胞嘧啶这一特性,将修饰后的DNA(G)(C)小牛胸腺连于甲基化...
目的:制备特异性的抗单链单克隆抗体,为建立一种特异、敏感、简便的细胞凋亡检测方法奠定基础。DNA方法:根据烷化剂盐酸氮芥能特异性地修饰小牛胸腺链上的鸟嘌呤而暴露互补链上的胞嘧啶这一特性,将修饰后的DNA(G)(C)小牛胸腺连于甲基化的牛血清白蛋白上制备成完全抗原,免疫小鼠获得特异性的抗单链单克隆抗体,并对DNABALB/cDNA单抗的类别和特异性进行鉴定;用叠氮钠和抗肿瘤药物诱导了细胞的坏死和凋亡,利用所制备的抗单链单克VP-16HL60DNA隆抗体对其进行检测,并与形态学方法、凝胶电泳法和法进行了比较。TUNEL结果:所制备的抗单链单克隆抗体能与羊DNA抗小鼠发生特异性反应,且能与凋亡细胞特异性结合,而不结合坏死细胞。IgM结论:所制备的单抗为型,利用其能特异IgM地结合单链的特性,可用于检测细胞凋亡,简便、有效地区别细胞凋亡和坏死。
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关键词
单克隆抗体
凋亡
单链DNA
氮芥
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职称材料
题名
重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究
被引量：
5
1
作者
杜冰
朱道银
唐恩洁
机构
重庆医科大学基础
医学院
微生物学
教研室
川北医学院微生物学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003年第3期270-272,共3页
文摘
目的 :观察rh -LIF对HL - 6 0细胞生长与分化的影响及其可能的作用机制。方法 :不同剂量的rh -LIF作用HL -6 0细胞 3- 6天 ,观察细胞生长 ,流式细胞术分析细胞周期 ,用免疫组化法检测P5 3,P2 1蛋白表达的变化 ,原位杂交法检测P5 3mRNA表达水平的改变。结果 :rh -LIF可诱导HL - 6 0细胞向单核 /巨噬细胞分化 ,抑制HL - 6 0细胞的增殖 ,使细胞停滞于G1期 :P5 3,P2 1蛋白和P5 3mRNA表达明显增强。结论 :rh -LIF对HL - 6 0细胞具增殖抑制和诱导分化作用 ,其作用机制可能与G1期阻滞及P5 3,P2 1表达增高有关。
关键词
重组人白血病抑制因子
诱导分化
生长抑制
Keywords
rh-LIF
Differentiation
Growth inhibition
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达
被引量：
1
2
作者
卜玲毅
胡孝素
敬保迁
王雅静
马莹
机构
四川大学华西
医学
中心寄生虫学研究室
川北医学院微生物学教研室
出处
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期42-44,共3页
基金
国家自然科学基金资助 (No 3 9970 667)
文摘
目的 在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原。方法 以本实验室的重组质粒T -LACK为模板 ,PCR扩增得到LACK抗原基因 ,与表达载体pQE31定向重组 ,转化到宿主菌M 15中进行表达和纯化 ,并以SDS -PAGE和Western -blotting进行鉴定。结果 1 SDS -PAGE电泳检测 ,重组质粒 pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带 ,而纯化蛋白和包涵体溶解物在 36kDa处均出现了特异的表达带。 2 36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别。结论 得到了高效表达的LACK纯化蛋白 。
关键词
利什曼原虫
LACK
聚合酶链反应
克隆
表达
免疫印迹
Keywords
Leishmania
LACK
Cloning
Polymerase chain reaction
Expression
Western blot
分类号
R382.22 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
抗单链DNA单克隆抗体的制备及应用
被引量：
1
3
作者
赵明才
朱道银
唐恩洁
机构
重庆医科大学基础
医学院
微生物学
教研室
川北医学院微生物学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2002年第2期145-147,共3页
文摘
目的:制备特异性的抗单链单克隆抗体,为建立一种特异、敏感、简便的细胞凋亡检测方法奠定基础。DNA方法:根据烷化剂盐酸氮芥能特异性地修饰小牛胸腺链上的鸟嘌呤而暴露互补链上的胞嘧啶这一特性,将修饰后的DNA(G)(C)小牛胸腺连于甲基化的牛血清白蛋白上制备成完全抗原,免疫小鼠获得特异性的抗单链单克隆抗体,并对DNABALB/cDNA单抗的类别和特异性进行鉴定;用叠氮钠和抗肿瘤药物诱导了细胞的坏死和凋亡,利用所制备的抗单链单克VP-16HL60DNA隆抗体对其进行检测,并与形态学方法、凝胶电泳法和法进行了比较。TUNEL结果:所制备的抗单链单克隆抗体能与羊DNA抗小鼠发生特异性反应,且能与凋亡细胞特异性结合,而不结合坏死细胞。IgM结论:所制备的单抗为型,利用其能特异IgM地结合单链的特性,可用于检测细胞凋亡,简便、有效地区别细胞凋亡和坏死。
关键词
单克隆抗体
凋亡
单链DNA
氮芥
Keywords
McAb
Apoptosis
ssDNA
HN 2
分类号
R392－33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究
杜冰
朱道银
唐恩洁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2003
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达
卜玲毅
胡孝素
敬保迁
王雅静
马莹
《中国人兽共患病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
抗单链DNA单克隆抗体的制备及应用
赵明才
朱道银
唐恩洁
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
2002
1
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