利用5因素4水平的正交实验探讨了各因素的不同水平对峨眉金线莲ISSR-PCR反应结果的影响,建立了稳定且重复性好的峨眉金线莲ISSR-PCR反应体系,即在25μL体系中含:40 ng DNA模板、0.4μmol·L^(−1)引物、0.4 mmol·L^(−1)dNTPs、2...利用5因素4水平的正交实验探讨了各因素的不同水平对峨眉金线莲ISSR-PCR反应结果的影响,建立了稳定且重复性好的峨眉金线莲ISSR-PCR反应体系,即在25μL体系中含:40 ng DNA模板、0.4μmol·L^(−1)引物、0.4 mmol·L^(−1)dNTPs、2.0 mmol·L^(−1)Mg^(2+)、0.8 U Taq DNA聚合酶和2.0μL 10×Buffer。同时为了确定最适Tm(退火温度),进行了梯度PCR试验筛选,最终优化和确立了适合峨眉金线莲的ISSR-PCR实验反应体系。展开更多
文摘利用5因素4水平的正交实验探讨了各因素的不同水平对峨眉金线莲ISSR-PCR反应结果的影响,建立了稳定且重复性好的峨眉金线莲ISSR-PCR反应体系,即在25μL体系中含:40 ng DNA模板、0.4μmol·L^(−1)引物、0.4 mmol·L^(−1)dNTPs、2.0 mmol·L^(−1)Mg^(2+)、0.8 U Taq DNA聚合酶和2.0μL 10×Buffer。同时为了确定最适Tm(退火温度),进行了梯度PCR试验筛选,最终优化和确立了适合峨眉金线莲的ISSR-PCR实验反应体系。
