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题名人卵巢颗粒细胞分离培养的优化及生物学特性
被引量：2
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作者
许素铭
王耀琴
朱鹏飞
李宵
王春芳
武学清
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机构
山西省儿童医院山西省妇幼保健院生殖医学中心
山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室
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出处
《解剖学杂志》
CAS
2019年第2期116-120,共5页
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基金
国家重点研发计划(2018YFC1002103)
山西省回国留学人员科研资助项目(2012-100)
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文摘
目的:建立原代人卵巢颗粒细胞(hGCs)的分离培养方法,观察其生物学特性。方法:取卵日,收集hGCs,分为对照组(DMEM培养基)和实验组(DMEM培养基∶卵泡液=1∶1)进行培养。比较2组hGCs的生长状态和雌激素分泌情况。利用RT-qPCR检测Nanog、Oct4、Sox2的表达,应用流式细胞术检测CD44、CD73、CD45的表达。结果:hGCs培养24 h贴壁良好,细胞间伸出伪足。对照组和实验组分别在培养14 d和21 d后出现凋亡。实验组雌激素的分泌显著增加,第9天出现高峰,第21天显著下降。培养第7天实验组Oct4和Nanog mRNA表达显著增加。培养7 d后,CD44、CD73表达阳性, CD45表达阴性。结论:该方法简单、有效,可获得大量hGCs。培养基中添加卵泡液有益于hGCs的生长,增加培养天数。同时hGCs可分泌雌激素并具有一定的干细胞特性。
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关键词
人卵巢颗粒细胞
细胞培养
细胞沉淀法
生物学特性
干细胞
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Keywords
human granulosa cell
cell culture
cell precipitation
biological characteristic
stem cell
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分类号
R321
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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