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重组人血清白蛋白-干扰素α-2b 融合蛋白体外抗乙型肝炎病毒活性评价 被引量：9
1
作者 张伟 代晓朋 +5 位作者 王鲁燕 武福军 祁碧玉 刘志敏 李军锋 周育森 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期550-555,共6页
目的检测重组人血清白蛋白-干扰素α-2b融合蛋白(HSA-IFNα-2b)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的活性。方法构建含1.6倍HBV基因组及绿色荧光蛋白的重组腺病毒(AdGFP-HBV),感染人肝细胞系HepG2细胞,构建HBV复制细胞模型;ELISA法检测HBV乙肝病... 目的检测重组人血清白蛋白-干扰素α-2b融合蛋白(HSA-IFNα-2b)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的活性。方法构建含1.6倍HBV基因组及绿色荧光蛋白的重组腺病毒(AdGFP-HBV),感染人肝细胞系HepG2细胞,构建HBV复制细胞模型;ELISA法检测HBV乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和乙肝病毒e抗原(HBeAg)表达;MTT法检测HSA-IFNα-2b对HepG2细胞的毒性作用;定量PCR法检测细胞内HBV RNA的相对表达以及细胞上清中HBV DNA绝对表达水平;双报告基因法检测HSA-IFNα-2b对HBV增强子Ⅰ活性的影响。结果 AdGFP-HBV感染HepG2细胞后可以复制表达HBV。HSA-IFNα-2b 500 kU·L-1加入AdGFP-HBV感染的HepG2细胞,使HBsAg表达降低51.32%(P<0.01),HBeAg降低50.26%(P<0.01),而相同浓度的HSA-IFNα-2b并不抑制细胞的增殖。随HSA-IFNα-2b浓度增加,其对HBsAg表达的抑制作用逐渐升高,HSA-IFNα-2b对HBsAg表达的抑制率(Y)与其浓度(X)的回归方程是Y=21.11 lgX+11.91(r2=0.954),IC50为63.76 kU·L-1。HSA-IFNα-2b 500 kU·L-1使细胞中HBV RNA下降52.83%(P<0.01),培养上清中HBV DNA降低53.07%(P<0.01)。HSA-IFNα-2b 500 kU·L-1使HBV增强子Ⅰ活性下降40.04%(P<0.01)。结论构建了可用于药物评价的HBV复制细胞模型,HSA-IFNα-2b体外具有抗HBV活性。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 血清白蛋白 干扰素Α-2B 融合蛋白 乙型肝炎病毒增强子Ⅰ
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BMSCs诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1表达对Stmn1和Sept9基因的影响 被引量：1
2
作者 李鹏飞 王春芳 +4 位作者 柳勇 崔素梅 邓春圣 龙志晶 刘彩玉 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期45-50,共6页
目的:通过检测体外培养的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)定向诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1基因对Stmn1和Sept9基因的表达变化情况,探讨骨髓基质细胞定向分化为胆碱能神经元的机制。方法:采用全骨髓培养法体外... 目的:通过检测体外培养的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)定向诱导分化为胆碱能神经元过程中干扰Hes1基因对Stmn1和Sept9基因的表达变化情况,探讨骨髓基质细胞定向分化为胆碱能神经元的机制。方法:采用全骨髓培养法体外分离培养获得BMSCs,将第三代培养的BMSCs进行诱导分化,实时定量PCR技术分析干扰Hes1基因后,在骨髓基质细胞诱导分化为胆碱能神经元过程中Stmn1和Sept9基因的表达变化情况。结果:BMSCs诱导分化为胆碱能神经元后,经免疫荧光检测有乙酰胆碱转移酶阳性细胞表达;Hes1基因表达在诱导组和干扰后诱导组中均较对照组高(P<0.05);Stmn1基因表达水平在干扰后诱导组、干扰组、诱导组均较对照组高(P<0.05);Sept9基因在干扰后诱导组和干扰组中表达水平均较对照组高(P<0.05),诱导组和对照组间无统计学意义。结论:在BMSCs向胆碱能神经元分化过程中,干扰Hes1基因可调控Sept9,Stmn1的表达,Hes1基因的表达变化导致与分化和增殖相关基因的表达改变。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 胆碱能神经元 RNA干扰 Hes1基因 Stmn1基因 Sept9基因
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毛细管气相色谱法测定米氮平原料药中的有机溶剂残留量 被引量：1
3
作者 霍建富 申云飞 +1 位作者 连建科 张慧兰 《化学与生物工程》 CAS 2014年第10期74-77,共4页
建立了米氮平原料药中乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等有机溶剂残留量毛细管气相色谱测定法。采用 HP-1毛细管柱（30 m×0.53 mm，3μm），以二甲基亚砜为溶剂，氮气为载气，FID检测器进行检测。结果表明... 建立了米氮平原料药中乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺等有机溶剂残留量毛细管气相色谱测定法。采用 HP-1毛细管柱（30 m×0.53 mm，3μm），以二甲基亚砜为溶剂，氮气为载气，FID检测器进行检测。结果表明：以上5种有机溶剂的浓度（μg·mL-1）分别在100.008-1000.080、12.124-121.244、1.202-12.016、14.433-144.328、17.659-176.592的范围内与峰面积的线性关系良好，检出限（μg·mL-1）分别为1.03、0.83、0.47、0.32、1.04；平均回收率分别为99.21％、98.72％、99.38％、99.03％、99.29％；精密度实验相对标准偏差（RSD）均小于1％。该方法灵敏、准确，可用于米氮平原料药中有机溶剂残留量的测定。 展开更多
关键词 米氮平 有机溶剂残留量 毛细管气相色谱法
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Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法验证 被引量：2
4
作者 黎勇 尹海燕 《农产品加工》 2016年第10期42-44,47,共4页
试验验证了Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法,为后续试验提供重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的检测方法。以蛋白含量测定国家标准品为标准品,在100~0μg/m L浓度范围内建立标准曲线,线性关系良好... 试验验证了Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法,为后续试验提供重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的检测方法。以蛋白含量测定国家标准品为标准品,在100~0μg/m L浓度范围内建立标准曲线,线性关系良好,相关系数(R^2)大于0.99。标准曲线上至少6点(包含两端)满足准确度介于95.2%~111.67%,标准曲线下限准确度介于95.98%~103.6%。高、中、低质量浓度(80,40,20μg/m L)质控样本批内精密度均介于1.51%~4.41%,批间精密度均介于3.83%~6.36%。综合上述信息,Lowry法测定重组人血清白蛋白-白细胞介素2融合蛋白含量的方法稳定,可重现。重组人血清白蛋白-白细胞介素2在200~10μg/m L质量浓度范围内均一。 展开更多
关键词 lowry法 蛋白浓度 方法学验证
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雪莲培养物微波真空干燥工艺研究 被引量：1
5
作者 韩赵军 赵鹏 +2 位作者 贾康杰 张帅 徐文华 《农产品加工》 2015年第5期36-37,共2页
研究雪莲培养物微波真空干燥的工艺条件。以总黄酮含量为评价指标,选择微波功率、干燥温度和干燥时间为影响因素,进行L9(34)正交试验,优选最佳的干燥工艺。结果表明,最佳干燥工艺条件为微波功率12 k W,干燥温度40℃,干燥时间4 h。
关键词 雪莲培养物 微波真空干燥 总黄酮含量
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洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度检测研究
6
作者 蒋艳霞 吕治红 秦晶晶 《化学与生物工程》 CAS 2012年第12期92-94,共3页
建立了洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度检测方法。取洛伐他汀烟酸缓释片按照《中国药典》洛伐他汀溶出度测定法进行溶出,以0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液为溶剂,转速为100r·min-1,于45min取样,采用高效液相色谱法测定释放... 建立了洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度检测方法。取洛伐他汀烟酸缓释片按照《中国药典》洛伐他汀溶出度测定法进行溶出,以0.5%十二烷基硫酸钠磷酸盐缓冲溶液为溶剂,转速为100r·min-1,于45min取样,采用高效液相色谱法测定释放度。色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈-0.5%磷酸溶液(4∶1)为流动相,检测波长238nm,进样量20μL。洛伐他汀浓度在0.59～40.18μg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好;回收率在99.0%～101.0%之间,相对标准偏差(RSD)为0.71%。该方法重复性好、稳定性高,适合洛伐他汀烟酸缓释片中洛伐他汀释放度的测定。 展开更多
关键词 洛伐他汀烟酸缓释片 释放度 高效液相色谱法
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高效液相色谱法检测非洛地平缓释片中的氧化产物
7
作者 吕治红 贺丽娟 霍建富 《化学与生物工程》 CAS 2012年第2期92-94,共3页
建立了非洛地平缓释片中氧化产物的高效液相色谱检测法。色谱条件:C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为pH值3.0的乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲溶液(2∶1∶2),检测波长254 nm,流速1.5 mL.min-1,检测浓度3μg.mL-1,进样量20μL。氧化产... 建立了非洛地平缓释片中氧化产物的高效液相色谱检测法。色谱条件:C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为pH值3.0的乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲溶液(2∶1∶2),检测波长254 nm,流速1.5 mL.min-1,检测浓度3μg.mL-1,进样量20μL。氧化产物浓度在0.1525～6.100μg.mL-1的范围内与峰面积线性关系良好,检测限为0.61 ng,定量限为1.83 ng;重复性实验相对标准偏差(RSD)均小于1%;平均回收率为98.43%。该方法重复性好、稳定性高,适合非洛地平缓释片中氧化产物的测定。 展开更多
关键词 非洛地平缓释片 氧化产物 高效液相色谱法
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高效液相色谱法测定帕米膦酸二钠含量
8
作者 吕治红 霍建富 《化学与生物工程》 CAS 2013年第5期87-90,共4页
采用高效液相色谱法测定帕米膦酸二钠的含量,色谱条件:流动相为乙腈-0.4%乙二胺四乙酸二钠的氢氧化钠溶液(15∶85),荧光检测器,激发波长为395nm,发射波长为480nm,流速为1.0mL.min-1,进样量为10μL。结果表明,帕米膦酸二钠定量限及检测... 采用高效液相色谱法测定帕米膦酸二钠的含量,色谱条件:流动相为乙腈-0.4%乙二胺四乙酸二钠的氢氧化钠溶液(15∶85),荧光检测器,激发波长为395nm,发射波长为480nm,流速为1.0mL.min-1,进样量为10μL。结果表明,帕米膦酸二钠定量限及检测限分别为5ng、2.5ng;精密度实验相对标准偏差(RSD)小于1.0%;在2.03～20.3μg.mL-1范围内帕米膦酸二钠浓度与峰面积线性关系良好。此方法重复性高、稳定性好,可准确、快捷地测定帕米膦酸二钠的含量。 展开更多
关键词 帕米膦酸二钠 含量 高效液相色谱法
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高效液相色谱法测定阿魏酸钠氯化钠注射液中阿魏酸钠的含量
9
作者 蒋艳霞 焦志斌 +1 位作者 崔素梅 张慧兰 《化学与生物工程》 CAS 2014年第4期74-76,共3页
采用高效液相色谱法测定阿魏酸钠氯化钠注射液中阿魏酸钠的含量.以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以水-甲醇-冰醋酸（69∶30∶1.5,体积比）为流动相,检测波长为310 nm,进样量为20μL,理论塔板数按阿魏酸钠峰计算应不低于2 000,按外标法... 采用高效液相色谱法测定阿魏酸钠氯化钠注射液中阿魏酸钠的含量.以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以水-甲醇-冰醋酸（69∶30∶1.5,体积比）为流动相,检测波长为310 nm,进样量为20μL,理论塔板数按阿魏酸钠峰计算应不低于2 000,按外标法以峰面积计算.结果表明：氯化钠和辅料对阿魏酸钠的含量测定没有影响,回收率在99.9％～100.8％之间,阿魏酸钠的重复性和稳定性良好,浓度在7.944～39.72 μg·mL-1的范围内与峰面积线性关系良好,该法适于阿魏酸钠氯化钠注射液中阿魏酸钠含量的测定. 展开更多
关键词 阿魏酸钠氯化钠注射液 含量 高效液相色谱法
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雪莲培养物热风干燥工艺优化研究
10
作者 赵鹏 韩赵军 +2 位作者 贾康杰 张帅 徐文华 《农产品加工》 2016年第8期31-32,36,共3页
以雪莲培养物总黄酮含量为指标,采用L_9（3~4）正交试验法对雪莲培养物热风干燥工艺进行优化。结果表明,干燥温度对雪莲培养物总黄酮含量的影响显著,对干燥时间、干燥质量的影响不明显,最佳干燥条件为干燥温度55℃,干燥时间10 h,干燥质... 以雪莲培养物总黄酮含量为指标,采用L_9（3~4）正交试验法对雪莲培养物热风干燥工艺进行优化。结果表明,干燥温度对雪莲培养物总黄酮含量的影响显著,对干燥时间、干燥质量的影响不明显,最佳干燥条件为干燥温度55℃,干燥时间10 h,干燥质量4.5 kg。该优选得到的工艺参数具有实际应用意义。 展开更多
关键词 雪莲培养物 热风干燥 总黄酮含量
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