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法舒地尔通过促进线粒体自噬抑制NLRP3炎性小体激活改善APP/PS1转基因小鼠认知功能
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作者 刘怀绢 章培军 +3 位作者 于婧文 王记委 尉杰忠 郭敏芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期696-703,共8页
目的基于线粒体自噬和含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性小体(inflammasome)途径探究法舒地尔改善淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)转基因小鼠认知功能障碍的机制。方法APP/PS1小鼠分为模型组以及治疗组,C57... 目的基于线粒体自噬和含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)炎性小体(inflammasome)途径探究法舒地尔改善淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)转基因小鼠认知功能障碍的机制。方法APP/PS1小鼠分为模型组以及治疗组,C57BL/6小鼠为对照组。治疗组每日腹腔注射25 mg/kg的法舒地尔,连续2个月,对照组和模型组注射同等体积的生理盐水。水迷宫和Y迷宫实验检测小鼠行为学;尼氏染色法和神经元特异性核抗原(NeuN)免疫荧光组织化学染色评估神经元的数量和形态,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测神经元凋亡;免疫荧光组织化学染色检测P62和NLRP3的表达;实时荧光定量PCR检测第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)诱导的推定激酶1(PINK1)、帕金森病蛋白(Parkin)和NLRP3 mRNA的表达水平;Western blot法检测PINK1、Parkin、P62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、NLRP3、含C末端胱天蛋白酶活化和募集结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和白细胞介素18(IL-18)的表达。结果水迷宫和Y迷宫结果显示,治疗组小鼠认知行为明显改善,其空间记忆和探索能力显著提高;尼氏染色结果和NeuN免疫荧光组织化学染色结果显示,与对照组相比,模型组小鼠神经元数量减少,尼氏小体减少,法舒地尔治疗后神经元的形态和数量均有所改善,TUNEL染色结果还表明,法舒地尔治疗后APP/PS1小鼠脑组织中凋亡细胞数减少;与对照组相比,模型组PINK1、Parkin表达减少,P62、LC3、NLRP3、ASC和IL-18表达增加,法舒地尔治疗后PINK1、Parkin和LC3表达增加,P62、NLRP3、ASC和IL-18表达减少。结论法舒地尔可以改善APP/PS1小鼠的认知功能,并改善其神经元损伤,其机制可能与促进线粒体自噬进而抑制NLRP3炎性小体的激活有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)小鼠 法舒地尔 线粒体自噬 炎性小体(inflammasome)
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吸入炭黑气溶胶对小鼠肺组织氧化和抗氧化系统的影响
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作者 孟涛 宋佳阳 +2 位作者 杨墨 尉杰忠 段化伟 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期368-375,共8页
目的探讨反复吸入炭黑气溶胶对小鼠肺组织氧化应激水平和抗氧化因子核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)及其调控的抗氧化酶水平的影响,分析持续暴露后肺组织氧化应激和氧化防御的关系。方法C57BL/6小鼠置于动式全身吸入柜中,每天6 h吸入炭... 目的探讨反复吸入炭黑气溶胶对小鼠肺组织氧化应激水平和抗氧化因子核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)及其调控的抗氧化酶水平的影响,分析持续暴露后肺组织氧化应激和氧化防御的关系。方法C57BL/6小鼠置于动式全身吸入柜中,每天6 h吸入炭黑气溶胶15.06和29.61 mg·m^-3连续14 d。末次染毒后,光镜和电镜下观察肺组织病理结构的变化;ELISA法测定肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)水平;化学荧光法检测肺组织单细胞内活性氧(ROS)水平;荧光定量PCR和Western印迹法检测肺组织Nrf2及抗氧化酶亚铁血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO-1)和谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)mRNA和蛋白表达水平。结果炭黑气溶胶15.06和29.61 mg·m^-3组小鼠肺组织细胞出现炭黑颗粒沉积、毛细血管充血、炎细胞浸润、肺泡和支气管上皮损伤及肺间隔增宽等改变,且肺损伤评分分别为正常对照组的2.96和4.02倍(P<0.01)。与正常对照组相比,炭黑气溶胶15.06和29.61 mg·m^-3组肺组织SOD,GSH-Px和CAT活性明显下降,细胞内ROS和肺组织MDA水平明显升高(P<0.05);肺组织抗氧化酶HO-1,NQO-1和GCLC mRNA表达显著上调(P<0.05),Nrf2 mRNA表达无显著差异;Nrf2蛋白总体水平未见显著变化,但胞质Nrf2蛋白水平显著下调而胞核Nrf2蛋白水平显著上调(P<0.05);HO-1,NQO-1和GCLC蛋白水平均显著上调(P<0.05)。相关分析显示,HO-1,NQO-1和GCLC mRNA水平与细胞内ROS水平呈正相关,相关系数分别为0.785,0.699和0.720(P<0.01)。结论持续吸入炭黑气溶胶可造成小鼠肺组织细胞内炭黑颗粒的沉积,诱导肺组织的氧化应激,并促使Nrf2从胞质转位到胞核,上调抗氧化酶HO-1,NQO-1和GCLC的表达。 展开更多
关键词 炭黑 气溶胶 吸入染毒 NF-E2相关因子 抗氧化通路 氧化应激 呼吸系统
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