上调巨噬细胞内向整流钾通道Kir2.1对巨噬细胞活化和心肌细胞炎性损伤的作用

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作者 高石 乔碧瑶 +2 位作者 王嘉欣 刘福 刘清华 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第10期1882-1891,共10页

目的:观察上调内向整流钾通道Kir2.1在脂多糖(lipopolysacharide,LPS)诱导的巨噬细胞M1炎症型极化及心肌细胞炎性损伤中的作用,探讨调节Kir2.1在心肌梗死后炎性损伤和修复中的作用及机制。方法:LPS诱导RAW264.7巨噬细胞M1极化并同时使用... 目的:观察上调内向整流钾通道Kir2.1在脂多糖(lipopolysacharide,LPS)诱导的巨噬细胞M1炎症型极化及心肌细胞炎性损伤中的作用,探讨调节Kir2.1在心肌梗死后炎性损伤和修复中的作用及机制。方法:LPS诱导RAW264.7巨噬细胞M1极化并同时使用Kir2.1激动剂zacopride或过表达Kir2.1(Kir2.1 overexpression,Kir2.1-OE)慢病毒载体。巨噬细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+zacopride组(或LPS+Kir2.1-OE组)和LPS+za⁃copride+BaCl_(2)组。我们还观察了Kir2.1-OE和Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)抑制剂AG490对巨噬细胞JAK2/信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路的影响。应用RT-qPCR或免疫荧光染色法检测巨噬细胞中CD86、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-6、IL-1β及Kir2.1的表达;Western blot检测JAK2/STAT3通路相关蛋白表达。将RAW264.7巨噬细胞经LPS、LPS+zacopride或LPS+zacopride+BaCl_(2)孵育12 h后更换培养基分别与H9C2(2-1)心肌细胞共培养,48 h后收集心肌细胞,Western blot测定心肌细胞中B细胞淋巴瘤蛋白2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、caspase-3、cleaved cas⁃pase-3、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II,CaMKII)和p-CaMKII的蛋白水平;将RAW264.7巨噬细胞经LPS孵育12 h后更换培养基与加入KN-93预处理的H9C2(2-1)细胞共培养,分为control组、LPS组和LPS+KN-93组,48 h后收集心肌细胞,Western blot测定心肌细胞CaMKII和p-CaMKII的表达情况。结果:zacopride可以I_(K1)依赖性抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化,同时CD86和炎性介质IL-6 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。zacopride或Kir2.1-OE可抑制巨噬细胞中LPS诱导的炎症相关JAK2/STAT3信号通路活化,其效应与JAK2抑制剂AG490形似,且可以被I_(K1)阻断剂BaCl_(2)所逆转(P<0.05)。与M1极化后的巨噬细胞共培养的H9C2(2-1)心肌细胞出现炎性损伤并且凋亡率升高,zacopride可以抑制炎性巨噬细胞诱导的心肌细胞炎性损伤,表现为促炎介质IL-1β、IL-6产生减少,抗炎介质IL-4生成增多,细胞凋亡减少(P<0.05)。zacopride还I_(K1)依赖性抑制了与炎性巨噬细胞共培养的H9C2(2-1)心肌细胞CaMKII的磷酸化(P<0.05)。结论:上调Kir2.1可能通过抑制炎症相关JAK2/STAT3信号通路从而抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化;上调巨噬细胞Kir2.1可能通过调节心肌细胞CaMKII信号通路而发挥心肌保护作用。 展开更多

关键词 内向整流钾通道 心肌梗死 巨噬细胞 炎症 JAK2/STAT3信号通路

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精氨酸甲基转移酶在肝细胞癌中作用的研究进展 被引量：2

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作者 赵文慧 王德平 +2 位作者 郭跃虎 李建国 燕子 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第3期232-239,共8页

肝细胞癌是一种异质性疾病,其发生的复杂性与表观遗传修饰有关。哺乳动物蛋白质精氨酸甲基转移酶(protein arginine methyltransferases,PRMTs)可介导细胞的表观遗传修饰,并在肝细胞癌的发生、发展、治疗及预后中发挥重要作用。PRMTs催... 肝细胞癌是一种异质性疾病,其发生的复杂性与表观遗传修饰有关。哺乳动物蛋白质精氨酸甲基转移酶(protein arginine methyltransferases,PRMTs)可介导细胞的表观遗传修饰,并在肝细胞癌的发生、发展、治疗及预后中发挥重要作用。PRMTs催化组蛋白和非组蛋白靶蛋白的精氨酸残基发生单甲基化和(对称的及不对称的)二甲基化。PRMT1、2、3、4、5、6、7、9等家族成员在肝细胞癌中的作用不同,涉及癌细胞生长、转移、治疗和预后等。选择性和特异性PRMTs抑制剂的研究开发有望为临床肝细胞癌的治疗和预后提供新思路和新靶点。本文重点概述PRMTs在肝细胞癌中作用的机制研究进展。 展开更多

关键词 肝细胞癌 蛋白质精氨酸甲基转移酶 蛋白质精氨酸甲基转移酶抑制剂 表观遗传修饰

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非诺多泮抑制小鼠胸主动脉瘤的实验研究 被引量：1

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作者 周莹 武栗妃 +1 位作者 杜文静 曹济民 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期569-575,共7页

目的探讨多巴胺一型受体激动剂非诺多泮(FNDP)是否对小鼠胸主动脉瘤(TAA)具有保护作用。方法对3周龄的雄性C57BL/6J小鼠采用β-氨基丙腈(BAPN)复制TAA模型。25只小鼠分为三组:对照组、BAPN组、BAPN+FNDP组(腹腔注射FNDP)。统计TAA的发... 目的探讨多巴胺一型受体激动剂非诺多泮(FNDP)是否对小鼠胸主动脉瘤(TAA)具有保护作用。方法对3周龄的雄性C57BL/6J小鼠采用β-氨基丙腈(BAPN)复制TAA模型。25只小鼠分为三组:对照组、BAPN组、BAPN+FNDP组(腹腔注射FNDP)。统计TAA的发生率和生存率,观察胸主动脉的大体变化,弹力蛋白(Elastin)染色观察形态学改变。免疫组化法检测基质金属酶2(MMP2)、基质金属酶9(MMP9)和白细胞分化抗原68(CD68)的变化。明胶酶谱法检测MMP2和MMP9的活性。反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测多巴胺受体1(D1DR)、多巴胺受体2(D2DR)、多巴胺受体3(D3DR)、多巴胺受体5(D5DR)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌蛋白22α(SM22α)的mRNA表达情况。结果与对照组相比,BAPN组有明显的TAA形成,胸主动脉壁弹力纤维紊乱与断裂,且D1DR和D5DR的mRNA水平均显著下降。与BAPN组相比,BAPN+FNDP组小鼠TAA的形成率和动脉瘤破裂率明显降低;胸主动脉壁的弹力纤维紊乱与断裂明显改善;胸主动脉壁内MMP2和MMP9的表达水平均显著下降,血清中MMP2的酶活性显著降低;胸主动脉壁中巨噬细胞浸润显著降低,且IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1的mRNA水平均显著下降;α-SMA和SM22αmRNA表达水平无显著差异。结论FNDP可抑制小鼠TAA的进展,有可能成为治疗TAA的一个潜在药物。 展开更多

关键词 胸主动脉瘤 多巴胺受体 非诺多泮 巨噬细胞 炎症 基质降解

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CDP-二酰基甘油合酶1表达下调诱导自噬体与溶酶体融合障碍促进小鼠海马β-淀粉样蛋白沉积

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作者 张立飞 王宁 +6 位作者 田园 师姝 张稳稳 杜凯丽 刘婷 王丽 王晓晖 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第6期719-727,共9页

目的探究CDP-二酰基甘油合酶1(CDS1)对小鼠海马神经细胞自噬和淀粉样蛋白沉积的影响及机制。方法使用刚果红和免疫组织化学染色观察淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白1(PS1)双转基因小鼠海马组织淀粉样物质的沉积情况;慢病毒介导HT22细胞内... 目的探究CDP-二酰基甘油合酶1(CDS1)对小鼠海马神经细胞自噬和淀粉样蛋白沉积的影响及机制。方法使用刚果红和免疫组织化学染色观察淀粉样前体蛋白(APP)/早老蛋白1(PS1)双转基因小鼠海马组织淀粉样物质的沉积情况;慢病毒介导HT22细胞内APP过表达,刚果红染色观察细胞内淀粉样物质沉积情况;蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞的微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、P62蛋白表达情况;通过APP/PS1双转基因小鼠海马蛋白质组学结果,筛选出差异表达蛋白CDS1;蛋白质印迹法检测APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中的CDS1蛋白表达情况;慢病毒介导HT22细胞APP过表达后,再过表达CDS1,采用蛋白质印迹法检测LC3-Ⅱ、P62蛋白表达情况。结果APP/PS1双转基因小鼠海马组织及APP过表达HT22细胞中均有β-淀粉样蛋白的沉积。在APP/PS1双转基因小鼠海马组织和APP过表达HT22细胞中LC3-Ⅱ、P62蛋白均升高。从APP/PS1双转基因小鼠蛋白质组学结果中的京都基因与基因组百科全书通路分析筛选到其中一条差异代谢通路——甘油磷脂代谢通路,从该通路中获取到差异表达蛋白CDS1。与野生型C57BL/6小鼠相比,APP/PS1双转基因小鼠海马组织中CDS1蛋白表达量下降(0.46±0.07 vs 1.00±0.25,P<0.01);与感染空载病毒载体的HT22细胞相比,慢病毒过表达APP的HT22细胞中CDS1蛋白表达量下降(0.68±0.18 vs 1.00±0.13,P<0.01)。在APP过表达的HT22细胞过表达CDS1后,神经细胞的自噬流明显恢复(LC3-Ⅱ:1.00±0.15 vs 0.21±0.05,P<0.01;P62:1.00±0.16 vs 0.67±0.10,P<0.01),并且Aβ沉积明显减少。结论CDS1表达下调诱导自噬体与溶酶体融合障碍,促进阿尔茨海默病小鼠海马淀粉样物质沉积。 展开更多

关键词 CDP-二酰基甘油合酶1 自噬 溶酶体 海马 阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白

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银杏叶提取物通过proBDNF/mBDNF平衡改善慢性铜暴露小鼠抑郁样行为

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作者 姜志华 代彩兴 +2 位作者 张欣悦 张文平 李建国 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第3期289-297,共9页

目的:研究银杏叶提取物(EGb)改善铜暴露小鼠抑郁样行为的机制。方法:慢性口服硫酸铜溶液(200 mg/L)诱导抑郁小鼠模型,口服给予EGb溶液(120 mg/L)1月。采用高架十字迷宫、强迫游泳实验和糖水偏好实验检测小鼠的抑郁样行为,TUNEL染色检测... 目的:研究银杏叶提取物(EGb)改善铜暴露小鼠抑郁样行为的机制。方法:慢性口服硫酸铜溶液(200 mg/L)诱导抑郁小鼠模型,口服给予EGb溶液(120 mg/L)1月。采用高架十字迷宫、强迫游泳实验和糖水偏好实验检测小鼠的抑郁样行为,TUNEL染色检测小鼠海马脑区细胞凋亡,免疫组化检测海马脑区前脑源性神经营养因子(proBDNF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的原位表达,RT-qPCR检测BDNF mRNA的表达,Western blot检测proBDNF、成熟BDNF(mBDNF)、cAMP应答元件结合蛋白(CREB)、CREB磷酸化(p-CREB)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)、p75神经生长因子受体(p75NTR)、弗林蛋白酶(furin)、前蛋白转化酶枯草杆菌素/Kexin 1型(PCSK1)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达。结果:慢性铜暴露可导致小鼠出现抑郁样行为,增加海马脑区神经细胞凋亡,增加proBDNF表达并且降低mBDNF表达(P<0.05),降低受体TrkB表达并增加p75NTR表达(P<0.05),降低CREB和p-CREB表达水平(P<0.05)。同时,抑郁样行为小鼠海马脑区胞内剪切酶furin和PCSK1表达降低(P<0.05),胞外剪切酶MMP9表达提高(P<0.05)。EGb能够减轻小鼠的抑郁样行为和神经元凋亡,并可部分逆转铜暴露导致的BDNF、proBDNF、TrkB、p75NTR、CREB、p-CREB、furin和PCSK1蛋白的表达异常。结论:慢性铜暴露可导致小鼠抑郁样行为和细胞凋亡,EGb能够逆转这些表现,并与proBDNF/BDNF在海马脑区的平衡相关,这可为抗抑郁治疗提供新的思路。 展开更多

关键词 铜暴露 抑郁症 银杏叶提取物 脑源性神经营养因子 海马 小鼠

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内质网应激在创伤致大鼠心肌细胞凋亡中的作用 被引量：5

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作者 于雪娇 何金玲 +4 位作者 杨博文 焦向英 曹济民 贺忠梅 燕子 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1237-1242,共6页

目的:探讨内质网应激(ERS)在创伤致大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:应用Noble-Collip创伤仪构建机械创伤SD大鼠模型,并将大鼠随机分为伪创伤组(n=6),创伤组(创伤后0 h、3 h、6 h、12 h和24 h各时点n=6)和创伤+ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-P... 目的:探讨内质网应激(ERS)在创伤致大鼠心肌细胞凋亡中的作用。方法:应用Noble-Collip创伤仪构建机械创伤SD大鼠模型,并将大鼠随机分为伪创伤组(n=6),创伤组(创伤后0 h、3 h、6 h、12 h和24 h各时点n=6)和创伤+ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)组(n=6)。用试剂盒检测大鼠心肌组织凋亡蛋白caspase-3活性;用Western blot检测大鼠心肌组织caspase-3的活化水平,ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、转录激活因子6(ATF6)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和需肌醇酶1α(IRE1α)的表达或磷酸化水平,以及ERS相关凋亡分子C/EBP同源蛋白(CHOP)和caspase-12的表达或活化水平。结果:与伪创伤组相比,创伤组大鼠心肌组织caspase-3活性增强,cleaved caspase-3、GRP78、ATF6、磷酸化PERK、磷酸化IRE1α、CHOP和cleaved caspase-12蛋白水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);而给予创伤大鼠4-PBA处理后,caspase-3活性及CHOP、cleaved caspase-12和cleaved caspase-3蛋白水平均显著降低(P<0.05)。结论:创伤所致大鼠心肌细胞凋亡可能是由于激活ERS凋亡途径引起的。 展开更多

关键词 创伤 心脏 细胞凋亡 内质网应激 大鼠

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DNA损伤诱导转录因子4过表达可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制HT-22细胞增殖并促进其凋亡 被引量：5

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作者 王宇飞 孙雨晴 +7 位作者 张凯丽 宋美燕 李佳琪 张娟 王磊 吴雪梅 赵虹 刘志贞 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期927-936,共10页

神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是一种由细胞增殖凋亡紊乱引起的先天缺陷性疾病。本室前期利用RNA-Seq技术,发现小鼠神经管畸形胚胎脑组织中DNA损伤诱导转录因子-4(DNA damage-inducible transcript 4,Ddit4)表达水平增加,但其... 神经管畸形(neural tube defects,NTDs)是一种由细胞增殖凋亡紊乱引起的先天缺陷性疾病。本室前期利用RNA-Seq技术,发现小鼠神经管畸形胚胎脑组织中DNA损伤诱导转录因子-4(DNA damage-inducible transcript 4,Ddit4)表达水平增加,但其在神经管畸形中的作用尚不清楚。本文拟探索Ddit4过表达对海马神经元HT-22细胞增殖和凋亡的影响及相关机制,从而为后续研究Ddit4在小鼠神经管畸形中的作用奠定基础。本研究首先根据小鼠Ddit4序列构建真核表达载体pEX-3-Ddit4,限制性酶切分析和测序结果表明pEX-3-Ddit4构建成功。qRT-PCR和Western印迹检测显示转染pEX-3-Ddit4后,HT-22细胞中DDIT4的表达水平明显增加(P<0.01)。CCK-8和Western印迹结果显示,Ddit4过表达导致HT-22细胞增殖下降(P<0.01)。流式细胞仪结果显示,转染pEX-3-Ddit4后,G0/G1期细胞比例增加、S期比例下降(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.05)。Western印迹检测发现,转染pEX-3-Ddit4能够显著上调切割胱天蛋白酶3(cleaved caspase3)水平(P<0.05),表明Ddit4过表达促进HT-22细胞凋亡。细胞免疫荧光及Western印迹结果显示,过表达Ddit4显著降低细胞β-联蛋白(β-catenin)、T细胞因子4、细胞周期蛋白D1和C-myc的表达水平(P<0.05),核内β-联蛋白减少,提示Ddit4过表达抑制了Wnt/β-catenin信号通路。过表达Ddit4的同时加入Wnt/β-catenin信号通路激动剂LiCl处理细胞可逆转上述现象,表明Ddit4过表达可能通过Wnt/β-catenin信号通路对HT-22细胞发挥抗增殖和促凋亡作用。 展开更多

关键词 DNA损伤诱导转录因子-4 真核表达载体 HT-22细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路

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TRIM21通过泛素化稳定细胞骨架蛋白质促进下咽癌分化 被引量：2

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作者 牛艳芳 柴芳玉 +2 位作者 庞文会 张继生 杨涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期790-797,共8页

E3泛素化连接酶TRIM21(tripartite motif containing 21)在不同类型肿瘤中扮演癌基因或抑癌基因的角色,从而影响细胞功能及临床预后。然而,TRIM21在下咽癌中的生物学功能和分子机制尚不清楚。本文采用RT-PCR和Western印迹技术检测了TRI... E3泛素化连接酶TRIM21(tripartite motif containing 21)在不同类型肿瘤中扮演癌基因或抑癌基因的角色,从而影响细胞功能及临床预后。然而,TRIM21在下咽癌中的生物学功能和分子机制尚不清楚。本文采用RT-PCR和Western印迹技术检测了TRIM21在下咽癌组织中的表达水平,采用基因过表达和RNA干扰技术分析了TRIM21过表达和基因沉默对细胞增殖、迁移和分化的影响,利用蛋白质免疫共沉淀联合质谱鉴定TRIM21互作蛋白质,并进一步研究TRIM21影响下咽癌分化的分子机制。结果表明,TRIM21在中高分化下咽癌中高表达,提示TRIM21可能调控肿瘤细胞分化。在FaDu细胞中,过表达或shRNA干扰TRIM21可分别抑制和促进细胞增殖和迁移。此外,过表达TRIM21后,分化标志分子角蛋白10(keratin 10,KRT10)、内披蛋白(involucrin,IVL)和谷氨酰胺转氨酶1(transglutaminase 1,TGM1)蛋白质表达水平增高,而shRNA干扰TRIM21后,上述蛋白质表达下降。质谱鉴定及蛋白质生物信息分析提示,TRIM21可能与细胞骨架蛋白质调控密切相关。进一步验证表明,TRIM21与角蛋白10相互作用。蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺处理细胞后,与对照相比,TRIM21过表达细胞中角蛋白10表达增高,且过表达TRIM21可升高角蛋白10的泛素化水平。综上所述,我们的研究表明,TRIM21可能通过介导细胞骨架蛋白质泛素化修饰,提高蛋白质稳定性促进下咽癌分化。 展开更多

关键词 下咽癌 TRIM21 泛素化 分化

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唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15促进结直肠癌细胞增殖和迁移并抑制肿瘤组织中CD4+与CD8+T细胞浸润 被引量：7

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作者 成敏蓉 刘杭丰 +2 位作者 高书华 郑锦秀 杨涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期621-629,共9页

唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15(sialic acid-binding immunoglobulin-type lectin-15,Siglec-15)属于Siglecs家族的一员,是一种新型免疫抑制分子。Siglec-15在多种人类肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞中高表达,但Siglec-15在结直肠癌(colorec... 唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15(sialic acid-binding immunoglobulin-type lectin-15,Siglec-15)属于Siglecs家族的一员,是一种新型免疫抑制分子。Siglec-15在多种人类肿瘤细胞和肿瘤相关巨噬细胞中高表达,但Siglec-15在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的生物学功能及其对免疫微环境的影响尚不明确。本文旨在分析Siglec-15异常表达对CRC细胞功能及CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润的影响。首先,分析TCGA数据库中结直肠癌与正常组织中Siglec-15 mRNA表达水平,并对52例人CRC与配对癌旁组织进行免疫组织化学染色(IHC),发现Siglec-15在CRC中的表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。CCK8和划痕愈合结果显示,敲低Siglec-15能抑制人CRC细胞SW480增殖(P<0.01)和迁移(P<0.05)。磁珠分选小鼠脾的CD8^(+)T细胞并与小鼠CRC细胞MC38共培养,发现MC38细胞过表达Siglec-15能抑制CD8^(+)T细胞对其的杀伤以及IFN-γ和TNF-α的分泌(P<0.01)。小鼠荷瘤结果表明,过表达Siglec-15可以促进小鼠肿瘤生长(P<0.05)。单样本基因集富集分析、荷瘤小鼠肿瘤组织及人结直肠癌组织IHC分析均表明,Siglec-15高表达时,肿瘤微环境中CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润减少(P<0.05)。综上所述,Siglec-15可能通过促进CRC细胞增殖迁移以及抑制CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞浸润促进结直肠癌进展。本文为探究Siglec-15在CRC中的免疫抑制作用提供了一些新的实验依据。 展开更多

关键词 结直肠癌 唾液酸免疫球蛋白型凝集素-15 CD4^(+) T细胞 CD8^(+) T细胞

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CXC趋化因子配体8促进结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞趋化及浸润 被引量：6

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作者 高书华 柴欣悦 +4 位作者 刘杭丰 成敏蓉 郑锦秀 邵莹 杨涛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期495-504,共10页

CXC趋化因子配体8(CXC chemokine ligand 8,CXCL8)在结直肠癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤恶性进展。研究发现,结直肠癌微环境中有大量M2型巨噬细胞浸润,但CXCL8是否影响M2型巨噬细胞的浸润及其潜在机制尚未可知。本文旨在探讨CXCL8... CXC趋化因子配体8(CXC chemokine ligand 8,CXCL8)在结直肠癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤恶性进展。研究发现,结直肠癌微环境中有大量M2型巨噬细胞浸润,但CXCL8是否影响M2型巨噬细胞的浸润及其潜在机制尚未可知。本文旨在探讨CXCL8对结直肠癌中M2型巨噬细胞浸润及趋化作用的影响。本研究首先分析了TCGA数据库结直肠癌样本中CXCL8表达水平及免疫细胞浸润情况,并在临床组织中进行验证。随后Western印迹及qRT-PCR检测5种结直肠癌细胞株CXCL8的表达情况。佛波酯(PMA)及IL-4诱导THP-1至M2型巨噬细胞后,与HCT116、SW480细胞及过表达CXCL8的HCT116(CXCL8/HCT116)、SW480(CXCL8/SW480)共培养,检测M2型巨噬细胞趋化情况。白细胞介素1β(IL-1β)处理HCT116、SW480细胞,检测CXCL8表达情况,与M2型巨噬细胞共培养,分析趋化结果。结果显示,患者癌组织CXCL8表达高于癌旁组织,CXCL8高表达癌组织中存在更多M2型巨噬细胞浸润;IL-1β作用于HCT116或SW480后,CXCL8的mRNA及蛋白质表达水平升高(P<0.05)。Transwell实验证实,CXCL8趋化M2型巨噬细胞(P<0.05)。综上所述,结直肠癌细胞中CXCL8可由IL-1β诱导产生,CXCL8表达增加能够促进M2型巨噬细胞的趋化,结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞大量浸润可能与CXCL8表达升高有关。 展开更多

关键词 CXC趋化因子配体8(CXCL8) 巨噬细胞 趋化 结直肠癌 白细胞介素1

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钙连蛋白(CNX)通过促进MHC Ⅰ表达增强CD8^(+)T细胞对结直肠癌细胞的杀伤作用 被引量：3

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作者 杨婷 郑锦秀 +5 位作者 高书华 成敏蓉 薛宇彤 邵莹 李逸涵 杨涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期97-102,共6页

目的分析钙连蛋白(CNX)在结直肠癌(CRC)的异常表达对免疫细胞杀伤作用的影响及分子机制。方法免疫组织化学染色检测组织芯片102对CRC及癌旁组织的CNX的表达;在人HCT-15细胞过表达CNX,在人SW480细胞采用小干扰RNA敲低CNX表达,Western blo... 目的分析钙连蛋白(CNX)在结直肠癌(CRC)的异常表达对免疫细胞杀伤作用的影响及分子机制。方法免疫组织化学染色检测组织芯片102对CRC及癌旁组织的CNX的表达;在人HCT-15细胞过表达CNX,在人SW480细胞采用小干扰RNA敲低CNX表达,Western blot法检测主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)蛋白表达;将过表达CNX的慢病毒感染CT-26小鼠结肠癌细胞,并与脾脏分离的CD8^(+)T细胞共培养,利用细胞毒性试剂盒检测CD8^(+)T细胞对CT-26细胞的杀伤作用,ELISA检测γ干扰素(IFN-γ)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌的变化。结果CNX在结直肠癌组织的表达低于癌旁组织;HCT-15细胞过表达CNX后,MHCⅠ的蛋白水平升高:敲低SW480细胞CNX,MHCⅠ表达水平下降。过表达CNX可增强CD8T细胞对CT-26细胞的杀伤能力,且培养液上清中IFN-γ与TNF-α的含量增加。结论CNX可通过促进结直肠癌细胞MHCⅠ表达,增强CD8^(+)T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。 展开更多

关键词 钙连蛋白(CNX) MHCⅠ CD8^(+)T细胞 结直肠癌 免疫逃逸

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SARS-CoV-2侵袭宿主细胞的关键蛋白酶TMPRSS2的生物信息学分析

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作者 张利娜 文朝朝 +4 位作者 杜相欣 张雨彤 赵欣 张策 张宇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期688-697,721,共11页

目的通过生物信息学分析手段,对SARS-CoV-2侵袭宿主细胞的关键蛋白酶TMPRSS2进行预测和分析,对其结构与功能进行系统性的整理,为该蛋白的研究及其抑制剂的研发提供可靠的参考。方法通过ProtParam、Protscale、SignalP 4.0 Server、Secre... 目的通过生物信息学分析手段,对SARS-CoV-2侵袭宿主细胞的关键蛋白酶TMPRSS2进行预测和分析,对其结构与功能进行系统性的整理,为该蛋白的研究及其抑制剂的研发提供可靠的参考。方法通过ProtParam、Protscale、SignalP 4.0 Server、SecretomeP 2.0 server、TMHMM Server v.2.0、SOPMA、SWISS-MODEL、MEGA-X等软件对TMPRSS2基因及蛋白进行结构、功能、进化、生物过程等方面的预测,综合各软件得出的结果做出分析及论证。结果TMPRSS2蛋白是一种由492个氨基酸组成的亲水性蛋白,它具有一个跨膜螺旋结构,是一种非经典分泌蛋白。TMPRSS2蛋白在前列腺中的表达尤为丰富,其共有3个可能的N-糖基化位点,3个可能的O-糖基化位点以及8个可能的蛋白磷酸化位点。TMPRSS2蛋白共拥有3个超家族保守结构域,其100位以后的氨基酸序列相对保守。结论本文借助生物信息学相关软件和数据库,对TMPRSS2蛋白的结构和功能展开了较为全面的预测和分析。进一步验证了其作为丝氨酸蛋白酶的特质,同时也为其参与SARS-CoV-2侵袭宿主提供可能的机制解释。有助于进一步开展TMPRSS2相关的实验及研究。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2 TMPRSS2 COVID-19 生物信息学 结构与功能

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炎症反应在重性抑郁障碍发生发展中的作用和机制 被引量：6

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作者 昝翔(综述) 刘璐(综述) +3 位作者 刘志芬(综述) 张策(审校) 马久红(审校) 杨小荣(审校) 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期554-558,共5页

重性抑郁障碍(MDD)是一种常见的严重的神经精神障碍。越来越多的数据表明,炎症在精神疾病发生发展过程中发挥重要作用,且炎症过程与MDD的病理生理密切相关。现有研究证明,MDD患者存在先天性和后天性免疫失调,对患者健康产生不良影响。... 重性抑郁障碍(MDD)是一种常见的严重的神经精神障碍。越来越多的数据表明,炎症在精神疾病发生发展过程中发挥重要作用,且炎症过程与MDD的病理生理密切相关。现有研究证明,MDD患者存在先天性和后天性免疫失调,对患者健康产生不良影响。本篇综述旨在总结近期文献中有关炎症反应在MDD发生发展中的作用及相关机制,为MDD的治疗提供基础与临床研究的新思路。 展开更多

关键词 重性抑郁障碍 免疫系统 炎症反应 炎症因子 小胶质细胞 下丘脑-垂体-肾上腺轴 肠道微生物

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结合SMOTE技术与优化算法的支持向量机在慢性心衰不良结局预测中的应用 被引量：1

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作者 李晓桐 程璠 +3 位作者 田晶 闫晶晶 张岩波 韩清华 《中国卫生统计》 CSCD 北大核心 2024年第6期802-806,共5页

目的应用优化算法的支持向量机(support vector machine,SVM)结合合成少数类过采样技术(synthetic minority over-sampling technique,SMOTE)预测慢性心衰患者不良结局,提高分类模型预测性能。方法顺序入选2014年1月至2017年12月,山西... 目的应用优化算法的支持向量机(support vector machine,SVM)结合合成少数类过采样技术(synthetic minority over-sampling technique,SMOTE)预测慢性心衰患者不良结局,提高分类模型预测性能。方法顺序入选2014年1月至2017年12月,山西省两所三级甲等医院心内科确诊为慢性心力衰竭的1183例住院患者,收集患者的病历资料。基于原始训练集构建logistic回归(logistic regression,LR)与支持向量机模型,同时结合SMOTE算法构建LR、SVM、遗传算法支持向量机(genetic algorithm support vector machine,GA-SVM)和粒子群支持向量机模型(particle swarm support vector machine,PSO-SVM),通过灵敏度(sensitivity,SEN)、准确度(accuracy,ACC)、特异度(specificity,SPE)、G-means、F-measure、ROC曲线下面积(area under receiver operating characteristic curve,AUC)等指标综合评价各模型的分类性能。结果相较于对原始数据进行直接分类,应用SMOTE技术均衡化数据集后,模型性能明显提高。均衡化训练集构建LR、SVM、GA-SVM和PSO-SVM模型结果表明,GA-SVM和PSO-SVM在SPE、ACC指标低于LR;SEN、G-means、F-measure和AUC均优于LR。GA-SVM和PSO-SVM的综合效果显著高于SVM(SEN、G-means、F-measure指标表现均优于SVM)。结论基于均衡化数据集构建GA-SVM或PSO-SVM模型可提高SVM对于心衰预后的预测性能。 展开更多

关键词 SMOTE 支持向量机 遗传算法优化 粒子群算法优化 慢性心力衰竭

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MUC15和PI3K/Akt表达与胃癌临床病理特征及预后的相关性研究 被引量：7

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作者 韩志伟 戎瑞洲 +5 位作者 孔鹏洲 程彩霞 张燕燕 董金垚 李曙晶 郭建昇 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期56-61,共6页

目的:探讨MUC15和PI3K/Akt的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组织化学法检测144例胃癌组织及对应癌旁组织中MUC15、Akt的表达。结果:MUC15在胃癌中阳性表达率为79.8%,高于癌旁组织中的阳性表达率22.2%(P&l... 目的:探讨MUC15和PI3K/Akt的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法:采用组织芯片和免疫组织化学法检测144例胃癌组织及对应癌旁组织中MUC15、Akt的表达。结果:MUC15在胃癌中阳性表达率为79.8%,高于癌旁组织中的阳性表达率22.2%(P<0.01);Akt在胃癌中阳性表达率为80.6%,高于癌旁组织的阳性表达率16.7%(P<0.01)。MUC15和Akt表达均与胃癌分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05);且胃癌组织中MUC15表达和Akt表达呈正相关(P=0.001)。单因素生存分析显示,MUC15和Akt高表达均与生存时间呈负相关(P<0.05)。Cox多元回归分析提示,MUC15和Akt同时阳性的胃癌患者预后更差(HR=3.115,P<0.05)。结论:MUC15可能通过PI3K/Akt细胞信号转导通路参与胃癌的发生、发展、浸润转移,MUC15结合Akt是胃癌预后强有力的预测因子。 展开更多

关键词 胃癌 免疫组织化学 MUC15 PI3K/AKT 预后

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木犀草素与人免疫球蛋白G的作用机制研究 被引量：3

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作者 李波 秦小茹 +3 位作者 AJABKhan 苗兰兰 孙体健 乔华 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2195-2202,共8页

采用紫外光谱、荧光光谱和圆二色谱以及分子对接技术,研究木犀草素(LUTE)与人免疫球蛋白G(hIgG)之间的相互作用。结果表明:LUTE对hIgG有较强的荧光猝灭作用,猝灭机理是形成复合物的静态猝灭,在形成LUTE/hIgG复合物时LUTE更靠近hIgG分子... 采用紫外光谱、荧光光谱和圆二色谱以及分子对接技术,研究木犀草素(LUTE)与人免疫球蛋白G(hIgG)之间的相互作用。结果表明:LUTE对hIgG有较强的荧光猝灭作用,猝灭机理是形成复合物的静态猝灭,在形成LUTE/hIgG复合物时LUTE更靠近hIgG分子中的色氨酸残基。紫外光谱、三维荧光光谱及圆二色光谱实验结果发现,LUTE与hIgG结合时对蛋白分子中氨基酸残基的微环境影响较大,而对hIgG分子的骨架影响较小。分子模拟与荧光猝灭实验结果说明,二者结合是多种作用力综合作用的结果。 展开更多

关键词 木犀草素 免疫球蛋白 光谱法 分子对接

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缺血再灌注对大鼠海马组蛋白脱乙酰酶磷酸化水平的影响 被引量：1

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作者 李建国 陈静 +4 位作者 孟金凤 张倩倩 燕子 赵欣 张宇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2022年第2期135-141,共7页

目的:研究缺血再灌注(I/R)后海马不同区域I类和II类组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的表达和功能,以阐明HDAC在I/R性神经元损伤中的作用机制。方法:制备脑I/R模型,采用Western Blot分析HDAC和磷酸化HDAC(p-HDAC)在海马CA1、CA3和DG区的表达,在体... 目的:研究缺血再灌注(I/R)后海马不同区域I类和II类组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的表达和功能,以阐明HDAC在I/R性神经元损伤中的作用机制。方法:制备脑I/R模型,采用Western Blot分析HDAC和磷酸化HDAC(p-HDAC)在海马CA1、CA3和DG区的表达,在体分别给予HDAC(1、2、3、4、7)特异性抑制剂(Parthenolide、CAY10683、RGFP966、Tasquinimod、MS-275)后,采用尼氏染色检测其对海马神经元存活的影响。结果:在CA1区和CA3区,I/R组p-HDAC1、p-HDAC2、p-HDAC3、HDAC4、p-HDAC4和p-HDAC7的表达比假手术(sham)组显著增高(P<0.01)。在DG区,sham组HDAC1、p-HDAC1、p-HDAC2、p-HDAC3、HDAC4、p-HDAC4、HDAC7和p-HDAC7的表达显著高于sham组CA1区和CA3区的表达(P<0.05)。I/R组CA1区存活神经元数目比sham组低(P<0.01),HDAC抑制剂可显著减弱CA1区神经元死亡(P<0.01),而对CA3和DG区存活神经元数目无显著影响(P>0.05)。结论:I/R可通过p-HDAC(1、2、3、4、7)影响大鼠海马CA1区神经元存活,抑制其功能能够减弱神经元死亡。 展开更多

关键词 缺血再灌注 海马 组蛋白脱乙酰酶 组蛋白脱乙酰酶抑制剂 神经元死亡 大鼠

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Cuprizone诱导的多发性硬化疾病动物模型的特点及应用 被引量：2

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作者 李琳 王异民 +5 位作者 王伟 王珊 盘美良 孙伟强 樊卫平 石建云 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期132-137,共6页

多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征。双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ可诱导... 多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是以人类中枢神经系统炎性脱髓鞘为主要特点的神经退行性疾病,并伴随着轴突损伤、胶质细胞增生、炎性细胞浸润等病理特征。双环己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)是一种铜离子螯合剂,给小鼠饲喂CPZ可诱导小鼠中枢神经系统产生脱髓鞘病变,引起少突胶质细胞凋亡、少突胶质细胞祖细胞增殖、星形胶质细胞和小胶质细胞激活等病理变化,停止饲喂CPZ后,小鼠的中枢神经系统会逐步发生髓鞘再生现象,因此是研究MS脱髓鞘和髓鞘再生的常用模型。本文从CPZ小鼠模型构建、少突胶质细胞、星形胶质细胞、小胶质细胞以及髓鞘再生等不同方面进行了总结,并对采用CPZ模型的特色疗法进行了概括,从而为CPZ模型在科研与医学实践中的广泛应用提供了详细的理论依据。 展开更多

关键词 多发性硬化 CUPRIZONE 神经胶质细胞 脱髓鞘 髓鞘再生 特色疗法

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DDAB/Tween 80阳离子脂质体的构建与评价

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作者 乔华 Ajab Khan 张慧超 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1918-1925,共8页

阳离子脂质体是基因转染中最受关注的一种非病毒类载体。本文以双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)与聚山梨酯-80(Tween 80)复配构建阳离子脂质体,并评价其使用安全性和DNA压缩性能。结果显示,DDAB与Tween 805∶5复配形成的脂质体,粒径和Zet... 阳离子脂质体是基因转染中最受关注的一种非病毒类载体。本文以双十二烷基二甲基溴化铵(DDAB)与聚山梨酯-80(Tween 80)复配构建阳离子脂质体,并评价其使用安全性和DNA压缩性能。结果显示,DDAB与Tween 805∶5复配形成的脂质体,粒径和Zeta电位适中,对溴酚蓝产生较强的包封作用;同时,可以有效地抑制DDAB的细胞毒性,在≤800μM时,红细胞溶血率<5%,表现出优良的使用安全性;当该脂质体与DNA质量比为4时,对DNA显示出较强地结合压缩作用,且形成的复合物带有较高的正电荷(约+40 mV),这为基因转染提供了良好的理论基础。 展开更多

关键词 阳离子脂质体 DDAB/Tween 80复配体系 细胞毒性 红细胞溶血 DNA压缩性能

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山楂叶总黄酮中医食疗制剂制备工艺研究 被引量：2

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作者 薛宇彤 郑锦秀 +2 位作者 邵莹 梁泰刚 杨利军 《护理研究》 北大核心 2022年第20期3689-3694,共6页

目的:优选山楂叶总黄酮脂质体制备工艺,为山楂叶中医食疗产品开发提供制剂基础。方法:以山楂叶总黄酮为原料,采用薄膜分散⁃超声法,以包封率为评价指标,在单因素试验基础上,选取影响较大的因素做4因素3水平正交试验设计,优化制备工艺。结... 目的:优选山楂叶总黄酮脂质体制备工艺,为山楂叶中医食疗产品开发提供制剂基础。方法:以山楂叶总黄酮为原料,采用薄膜分散⁃超声法,以包封率为评价指标,在单因素试验基础上,选取影响较大的因素做4因素3水平正交试验设计,优化制备工艺。结果:脂质体最佳制备工艺为卵磷脂与胆固醇质量比5∶1、卵磷脂浓度30 mg/mL、卵磷脂与山楂叶总黄酮质量为10∶1、吐温80添加量占卵磷脂质量比为10%,在该条件下制备的脂质体呈淡黄色,包封率、粒径及Zeta电位分别为(73.25±2.13)%、(132.2±2.85)nm、(-9.29±0.34)mV。贮藏稳定性结果显示在4℃条件下稳定性较好。结论:山楂叶总黄酮脂质体有良好的理化性质,在4℃条件下贮藏稳定性较好,可为产品开发提供依据。 展开更多

关键词 山楂 黄酮 中医食疗 脂质体 包封率 稳定性 实验研究

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