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等轴牵张应变对骨间充质干细胞成软骨分化早期的影响 被引量:8
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作者 杨自权 门亚勋 《中国骨伤》 CAS 2018年第9期846-852,共7页
目的 :观察平面诱导培养条件下,等轴周期性牵张应变刺激对小鼠BMSCs成软骨分化早期的影响,探讨等轴周期性牵张应变刺激在软骨分化过程中早期的作用机制。方法:选取4周龄KM小鼠16只,雌雄不限,平均体重19.5 g(17~21 g),提取骨髓间充质干细... 目的 :观察平面诱导培养条件下,等轴周期性牵张应变刺激对小鼠BMSCs成软骨分化早期的影响,探讨等轴周期性牵张应变刺激在软骨分化过程中早期的作用机制。方法:选取4周龄KM小鼠16只,雌雄不限,平均体重19.5 g(17~21 g),提取骨髓间充质干细胞,体外培养至第3代,种植于Bio Flex细胞培养板,根据实验设计分6组:空白组,普通培养液培养8 d,不给予等轴周期性牵张应变刺激;对照组,成软骨诱导分化培养液培养8 d,不给予等轴周期性牵张应变刺激;实验组,实验组又分4组,均使用成软骨诱导分化培养液培养8 d,期间分别给与1、3、5、7 d等轴周期性牵张应变刺激。于培养第8天收集各组细胞,采用RT-PCR分析SOX9、Col-Ⅱ及ROCK1 m RNA的相对表达量,采用CCK-8法对各组细胞行增殖率检测,使用糖胺聚糖Elisa试剂盒检测上清液糖胺聚糖含量,行番红O及阿利新蓝染色观察细胞外基质(ECM)变化,正态计量资料采用均数±标准偏差表示,对照组与空白组比较采用配对样本t检验,实验组与对照组比较采用单因素方差分析。结果:(1)培养8 d后,对比对照组,实验组中随加载时间延长,SOX9、Col-Ⅱm RNA相对表达量呈逐渐增高趋势(P<0.05),而ROCK1 m RNA相对表达量呈下降趋势(P<0.05);对比空白组,实验组及对照组的ROCK1 m RNA相对表达量均增加(P<0.05)。(2)随加载时间延长,实验组出现先降后升趋势,但是对比空白组及对照组均增高,对照组较空白组明显下降。(3)通过对最后1次换掉的培养基做糖胺聚糖浓度的Elisa检测,实验组内糖胺多糖的分泌量逐渐增加,加载7 d组含量变化较其他组差异有统计学意义(P<0.05);与空白组比较,实验组及对照组糖胺多糖的分泌量明显增加(P<0.05)。(4)番红O及阿尔新兰染色显示,实验组有成软骨分化趋势,形状随时间加载均逐渐变长,均较对照组明显;实验组内PCM、Col-Ⅱ、GAG含量随力学刺激天数增加逐渐增多均较对照组明显。结论:平面诱导培养条件下,在BMSCs成软骨分化早期,等轴周期性牵张应变刺激可以促进骨髓间充质干细胞增殖以及向软骨细胞分化,等轴周期性牵张应变刺激可能是通过抑制Rho/ROCK1信号通路来促进成软骨分化。 展开更多
关键词 生物力学 细胞增殖 成软骨分化
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牵张应变刺激对软骨增殖及分化和细胞基质影响的研究进展 被引量:1
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作者 门亚勋 赵永亮 +3 位作者 程相允 曹万全 王刚 杨自权 《中国骨伤》 CAS 2017年第7期675-679,共5页
力学刺激广泛存在并参与调节机体内多种细胞的生物行为。其中牵张应变作为机体内细胞常见的一种受力模式,广泛存在于如骨与软骨、肌腱、心肺血管等多种器官。近年来随着生物力学研究的发展,多种力学加载装置应运而生,用于模拟体内复杂... 力学刺激广泛存在并参与调节机体内多种细胞的生物行为。其中牵张应变作为机体内细胞常见的一种受力模式,广泛存在于如骨与软骨、肌腱、心肺血管等多种器官。近年来随着生物力学研究的发展,多种力学加载装置应运而生,用于模拟体内复杂的力学刺激来提供包括等轴、单轴以及多种类型的力学波形的牵张应变刺激,这对生物力学的研究是一个巨大的促进。多项研究已发现牵张应变刺激可引起受力细胞的增殖、凋亡、分化和基质等的改变,但是对于同种细胞不同类型牵张应变刺激可以出现多种甚至是相反的实验结果,该文就针对牵张应变对成软骨的增殖、分化和基质的影响略做综述。了解这些特性,将对生物力学刺激下细胞增殖与分化的机制及疾病的预防和治疗有着重要的意义。 展开更多
关键词 牵张应变 软骨 分化 增殖 细胞周基质 综述文献
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