目的研究新型胰高血糖素样肽1(GLP-1)/葡萄糖依赖性促胰岛素样肽双受体激动剂DA-CH5对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致亚急性帕金森病(PD)小鼠步态运动行为的影响,并对比分析其与GLP-1受体激动剂NLY01的效果。方法将48只雄性C...目的研究新型胰高血糖素样肽1(GLP-1)/葡萄糖依赖性促胰岛素样肽双受体激动剂DA-CH5对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致亚急性帕金森病(PD)小鼠步态运动行为的影响,并对比分析其与GLP-1受体激动剂NLY01的效果。方法将48只雄性C57BL小鼠随机分为对照组、MPTP组、MPTP+DA-CH5组(联合1组)、MPTP+NLY01组(联合2组),每组12只。在PD建模第7天进行行为学测试,采用免疫组织化学染色观察小鼠脑组织黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数。结果与对照组比较,MPTP组步态实验步幅、前爪摇摆时间百分比、后爪摇摆时间百分比、转棒实验掉落潜伏期、旷场实验总移动距离、中脑黑质区TH阳性细胞数、TH和Bcl-2表达明显降低,后爪步幅宽度、α突触核蛋白、Bax、Bax/Bcl-2比值明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与MPTP组比较,联合1组和联合2组步态实验步幅、前爪摇摆时间百分比、后爪摇摆时间百分比、转棒实验掉落潜伏期、旷场实验总移动距离、TH阳性细胞数、TH及Bcl-2表达明显升高,联合1组后爪步幅宽度、α突触核蛋白、Bax、Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.01)。联合1组步态实验步幅、前爪摇摆时间百分比、后爪摇摆时间百分比、转棒实验掉落潜伏期、旷场实验总移动距离、TH阳性细胞数、TH、Bcl-2表达明显高于联合2组(P<0.05,P<0.01),后爪步幅宽度、α突触核蛋白、Bax、Bax/Bcl-2比值明显低于联合2组[(37.50±2.20)mm vs(44.99±1.58)mm,0.45±0.03 vs 0.97±0.02,0.70±0.03 vs 0.88±0.05,0.89±0.08 vs 1.36±0.11;P<0.05,P<0.01]。结论DA-CH5可抑制小鼠PD导致的步态行为学障碍,减少酪氨酸神经元丢失,具有神经保护作用,且效果优于NLY01。展开更多
目的观察犬尿氨酸3单加氧酶(KMO)抑制剂对慢性脑低灌注大鼠模型认知功能的影响及其相关代谢产物变化情况。方法选取成年健康雄性SD大鼠45只,随机分成假手术组、手术组、抑制剂组,每组15只。手术组和抑制剂组行血管性认知障碍模型制备。...目的观察犬尿氨酸3单加氧酶(KMO)抑制剂对慢性脑低灌注大鼠模型认知功能的影响及其相关代谢产物变化情况。方法选取成年健康雄性SD大鼠45只,随机分成假手术组、手术组、抑制剂组,每组15只。手术组和抑制剂组行血管性认知障碍模型制备。假手术组和手术组生理盐水灌胃,抑制剂组KMO抑制剂灌胃。Western Blot检测血细胞及海马区脑组织KMO活性。结果与手术组比较,抑制剂组第1、2、4、5天逃避潜伏期时间明显缩短,平台象限游泳距离百分比明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,手术组大鼠血细胞和海马区KMO活性明显升高(0.297±0.012 vs 0.147±0.017,0.880±0.029 vs 0.690±0.035,P<0.05);抑制剂组大鼠血细胞KMO活性明显低于手术组(0.177±0.023 vs 0.297±0.012,P<0.05)。与手术组比较,抑制剂组大鼠血清和海马区犬尿喹啉酸水平明显升高,大鼠血清KMO、3-羟基犬尿氨酸及血清和海马区喹啉酸水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论KMO抑制剂可改善血管性认知障碍大鼠的认知功能,机制可能是升高犬尿喹啉酸,降低喹啉酸实现的。展开更多
目的探讨新型胰高血糖素样肽1和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽双受体激动剂(DA3-CH)对糖尿病大鼠脑缺血再灌注模型炎性反应的影响。方法将54只SD大鼠随机分为5组:对照组6只、模型组12只、单模组12只、实验组12只、药物组12只。后4组用...目的探讨新型胰高血糖素样肽1和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽双受体激动剂(DA3-CH)对糖尿病大鼠脑缺血再灌注模型炎性反应的影响。方法将54只SD大鼠随机分为5组:对照组6只、模型组12只、单模组12只、实验组12只、药物组12只。后4组用改良线栓法造脑缺血再灌注模型,其中模型组和药物组于脑缺血再灌注模型前先用链脲佐菌素造糖尿病模型,实验组和药物组造模前给腹腔注射DA3-CH 10nmol/(kg·d),连续14d。测定各组血糖、体质量及Longa评分,氯化-2,3,5-三苯基四氮唑染色法测定脑梗死体积比,采用Western blot测定TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、NF-κB蛋白表达。结果与对照组和单模组比较,模型组血糖明显升高[(22.82±7.04)mmol/L vs(5.58±1.09)mmol/L和(5.29±0.78)mmol/L,P<0.01];体质量明显下降[(292.6±10.1)g vs(303.6±10.7)g和(301.2±12.8)g,P<0.05]。模型组较单模组和药物组Longa评分明显升高(P<0.05,P<0.01)。模型组较单模组脑梗死体积比明显增大(0.44±0.02 vs 0.16±0.02,P<0.01);实验组较药物组脑梗死体积比明显减小(0.12±0.01 vs 0.37±0.02,P<0.01);药物组较模型组脑梗死体积比亦明显减小(P<0.05)。模型组TNF-α和IL-1β及NF-κB蛋白表达较单模组和药物组增加(P<0.01);实验组TNF-α和IL-1β及NF-κB蛋白表达较单模组减少(P<0.05)。结论糖尿病加重脑缺血再灌注损伤,炎性反应在糖尿病加重脑缺血再灌注损伤中有重要作用;DA3-CH可能通过减轻神经炎症对合并糖尿病的脑缺血再灌注损伤起保护作用。展开更多
目的:探讨应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后细胞体积的效果。方法:取新生24h内Sprague-Dawley乳鼠,取出乳鼠脊髓采用胰酶消化及差速粘附法分离大鼠脊髓星形胶质细胞,并进行体外扩增培养。将第4代成熟的...目的:探讨应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后细胞体积的效果。方法:取新生24h内Sprague-Dawley乳鼠,取出乳鼠脊髓采用胰酶消化及差速粘附法分离大鼠脊髓星形胶质细胞,并进行体外扩增培养。将第4代成熟的星形胶质细胞进行氧糖剥夺/复氧处理,并分为4组:A组(不做糖氧剥夺及复氧处理),B组(糖氧剥夺6h,复氧12h),C组(糖氧剥夺6h,复氧24h),D组(糖氧剥夺6h,复氧48h)。通过活细胞工作站扫描检测计算各组细胞的体积,利用光镜及透射电镜观察细胞形态和超微结构变化,通过Western blot测定其水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)表达变化来进一步验证活细胞工作站测量细胞体积的准确性。结果:利用活细胞工作站检测体积,与A组细胞2810.19±306.11μm3相比,B组细胞体积4311.53±407.73μm3明显高于A组(P<0.01),C组细胞体积6248.86±702.11μm3为到最大值,D组细胞体积4541.33±503.17μm3,细胞体积较C组有所下降,但仍明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.01)。光镜下观察细胞B组出现肿胀、折光性增强,C组细胞水肿达到高峰,D组水肿虽有缓解,但仍很明显;透射电镜下观察B组可见细胞器开始肿胀,C组细胞肿胀更加明显,出现线粒体嵴发生断裂等表现,D组水肿稍有缓解,但仍很明显。Western blot 结果显示,A组细胞AQP4蛋白表达为(12.37±0.85)%,B组细胞AQP4蛋白表达为(34.17±2.07)%,C组细胞AQP4蛋白表达(43.57±1.75)%,D组细胞AQP4蛋白表达(32.26±1.37)%,与A组细胞相比,B组、C组、D组明显高于A组(P<0.01),与C组细胞相比,B组、D组明显低于C组(P<0.01)。结论:活细胞工作站能较为准确地检测大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后细胞体积,可作为一种常规的检测手段运用于星形胶质细胞体积测量。展开更多
文摘目的研究新型胰高血糖素样肽1(GLP-1)/葡萄糖依赖性促胰岛素样肽双受体激动剂DA-CH5对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致亚急性帕金森病(PD)小鼠步态运动行为的影响,并对比分析其与GLP-1受体激动剂NLY01的效果。方法将48只雄性C57BL小鼠随机分为对照组、MPTP组、MPTP+DA-CH5组(联合1组)、MPTP+NLY01组(联合2组),每组12只。在PD建模第7天进行行为学测试,采用免疫组织化学染色观察小鼠脑组织黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数。结果与对照组比较,MPTP组步态实验步幅、前爪摇摆时间百分比、后爪摇摆时间百分比、转棒实验掉落潜伏期、旷场实验总移动距离、中脑黑质区TH阳性细胞数、TH和Bcl-2表达明显降低,后爪步幅宽度、α突触核蛋白、Bax、Bax/Bcl-2比值明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与MPTP组比较,联合1组和联合2组步态实验步幅、前爪摇摆时间百分比、后爪摇摆时间百分比、转棒实验掉落潜伏期、旷场实验总移动距离、TH阳性细胞数、TH及Bcl-2表达明显升高,联合1组后爪步幅宽度、α突触核蛋白、Bax、Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.01)。联合1组步态实验步幅、前爪摇摆时间百分比、后爪摇摆时间百分比、转棒实验掉落潜伏期、旷场实验总移动距离、TH阳性细胞数、TH、Bcl-2表达明显高于联合2组(P<0.05,P<0.01),后爪步幅宽度、α突触核蛋白、Bax、Bax/Bcl-2比值明显低于联合2组[(37.50±2.20)mm vs(44.99±1.58)mm,0.45±0.03 vs 0.97±0.02,0.70±0.03 vs 0.88±0.05,0.89±0.08 vs 1.36±0.11;P<0.05,P<0.01]。结论DA-CH5可抑制小鼠PD导致的步态行为学障碍,减少酪氨酸神经元丢失,具有神经保护作用,且效果优于NLY01。
文摘目的观察犬尿氨酸3单加氧酶(KMO)抑制剂对慢性脑低灌注大鼠模型认知功能的影响及其相关代谢产物变化情况。方法选取成年健康雄性SD大鼠45只,随机分成假手术组、手术组、抑制剂组,每组15只。手术组和抑制剂组行血管性认知障碍模型制备。假手术组和手术组生理盐水灌胃,抑制剂组KMO抑制剂灌胃。Western Blot检测血细胞及海马区脑组织KMO活性。结果与手术组比较,抑制剂组第1、2、4、5天逃避潜伏期时间明显缩短,平台象限游泳距离百分比明显升高(P<0.05)。与假手术组比较,手术组大鼠血细胞和海马区KMO活性明显升高(0.297±0.012 vs 0.147±0.017,0.880±0.029 vs 0.690±0.035,P<0.05);抑制剂组大鼠血细胞KMO活性明显低于手术组(0.177±0.023 vs 0.297±0.012,P<0.05)。与手术组比较,抑制剂组大鼠血清和海马区犬尿喹啉酸水平明显升高,大鼠血清KMO、3-羟基犬尿氨酸及血清和海马区喹啉酸水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论KMO抑制剂可改善血管性认知障碍大鼠的认知功能,机制可能是升高犬尿喹啉酸,降低喹啉酸实现的。
文摘目的探讨新型胰高血糖素样肽1和葡萄糖依赖性促胰岛素分泌多肽双受体激动剂(DA3-CH)对糖尿病大鼠脑缺血再灌注模型炎性反应的影响。方法将54只SD大鼠随机分为5组:对照组6只、模型组12只、单模组12只、实验组12只、药物组12只。后4组用改良线栓法造脑缺血再灌注模型,其中模型组和药物组于脑缺血再灌注模型前先用链脲佐菌素造糖尿病模型,实验组和药物组造模前给腹腔注射DA3-CH 10nmol/(kg·d),连续14d。测定各组血糖、体质量及Longa评分,氯化-2,3,5-三苯基四氮唑染色法测定脑梗死体积比,采用Western blot测定TNF-α、白细胞介素(IL)-1β、NF-κB蛋白表达。结果与对照组和单模组比较,模型组血糖明显升高[(22.82±7.04)mmol/L vs(5.58±1.09)mmol/L和(5.29±0.78)mmol/L,P<0.01];体质量明显下降[(292.6±10.1)g vs(303.6±10.7)g和(301.2±12.8)g,P<0.05]。模型组较单模组和药物组Longa评分明显升高(P<0.05,P<0.01)。模型组较单模组脑梗死体积比明显增大(0.44±0.02 vs 0.16±0.02,P<0.01);实验组较药物组脑梗死体积比明显减小(0.12±0.01 vs 0.37±0.02,P<0.01);药物组较模型组脑梗死体积比亦明显减小(P<0.05)。模型组TNF-α和IL-1β及NF-κB蛋白表达较单模组和药物组增加(P<0.01);实验组TNF-α和IL-1β及NF-κB蛋白表达较单模组减少(P<0.05)。结论糖尿病加重脑缺血再灌注损伤,炎性反应在糖尿病加重脑缺血再灌注损伤中有重要作用;DA3-CH可能通过减轻神经炎症对合并糖尿病的脑缺血再灌注损伤起保护作用。
文摘目的:探讨应用活细胞工作站测量大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后细胞体积的效果。方法:取新生24h内Sprague-Dawley乳鼠,取出乳鼠脊髓采用胰酶消化及差速粘附法分离大鼠脊髓星形胶质细胞,并进行体外扩增培养。将第4代成熟的星形胶质细胞进行氧糖剥夺/复氧处理,并分为4组:A组(不做糖氧剥夺及复氧处理),B组(糖氧剥夺6h,复氧12h),C组(糖氧剥夺6h,复氧24h),D组(糖氧剥夺6h,复氧48h)。通过活细胞工作站扫描检测计算各组细胞的体积,利用光镜及透射电镜观察细胞形态和超微结构变化,通过Western blot测定其水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)表达变化来进一步验证活细胞工作站测量细胞体积的准确性。结果:利用活细胞工作站检测体积,与A组细胞2810.19±306.11μm3相比,B组细胞体积4311.53±407.73μm3明显高于A组(P<0.01),C组细胞体积6248.86±702.11μm3为到最大值,D组细胞体积4541.33±503.17μm3,细胞体积较C组有所下降,但仍明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.01)。光镜下观察细胞B组出现肿胀、折光性增强,C组细胞水肿达到高峰,D组水肿虽有缓解,但仍很明显;透射电镜下观察B组可见细胞器开始肿胀,C组细胞肿胀更加明显,出现线粒体嵴发生断裂等表现,D组水肿稍有缓解,但仍很明显。Western blot 结果显示,A组细胞AQP4蛋白表达为(12.37±0.85)%,B组细胞AQP4蛋白表达为(34.17±2.07)%,C组细胞AQP4蛋白表达(43.57±1.75)%,D组细胞AQP4蛋白表达(32.26±1.37)%,与A组细胞相比,B组、C组、D组明显高于A组(P<0.01),与C组细胞相比,B组、D组明显低于C组(P<0.01)。结论:活细胞工作站能较为准确地检测大鼠脊髓星形胶质细胞氧糖剥夺/复氧后细胞体积,可作为一种常规的检测手段运用于星形胶质细胞体积测量。
