上调巨噬细胞内向整流钾通道Kir2.1对巨噬细胞活化和心肌细胞炎性损伤的作用

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作者 高石 乔碧瑶 +2 位作者 王嘉欣 刘福 刘清华 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第10期1882-1891,共10页

目的:观察上调内向整流钾通道Kir2.1在脂多糖(lipopolysacharide,LPS)诱导的巨噬细胞M1炎症型极化及心肌细胞炎性损伤中的作用,探讨调节Kir2.1在心肌梗死后炎性损伤和修复中的作用及机制。方法:LPS诱导RAW264.7巨噬细胞M1极化并同时使用... 目的:观察上调内向整流钾通道Kir2.1在脂多糖(lipopolysacharide,LPS)诱导的巨噬细胞M1炎症型极化及心肌细胞炎性损伤中的作用,探讨调节Kir2.1在心肌梗死后炎性损伤和修复中的作用及机制。方法:LPS诱导RAW264.7巨噬细胞M1极化并同时使用Kir2.1激动剂zacopride或过表达Kir2.1(Kir2.1 overexpression,Kir2.1-OE)慢病毒载体。巨噬细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+zacopride组(或LPS+Kir2.1-OE组)和LPS+za⁃copride+BaCl_(2)组。我们还观察了Kir2.1-OE和Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)抑制剂AG490对巨噬细胞JAK2/信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路的影响。应用RT-qPCR或免疫荧光染色法检测巨噬细胞中CD86、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、IL-6、IL-1β及Kir2.1的表达;Western blot检测JAK2/STAT3通路相关蛋白表达。将RAW264.7巨噬细胞经LPS、LPS+zacopride或LPS+zacopride+BaCl_(2)孵育12 h后更换培养基分别与H9C2(2-1)心肌细胞共培养,48 h后收集心肌细胞,Western blot测定心肌细胞中B细胞淋巴瘤蛋白2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、caspase-3、cleaved cas⁃pase-3、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II,CaMKII)和p-CaMKII的蛋白水平;将RAW264.7巨噬细胞经LPS孵育12 h后更换培养基与加入KN-93预处理的H9C2(2-1)细胞共培养,分为control组、LPS组和LPS+KN-93组,48 h后收集心肌细胞,Western blot测定心肌细胞CaMKII和p-CaMKII的表达情况。结果:zacopride可以I_(K1)依赖性抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化,同时CD86和炎性介质IL-6 mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。zacopride或Kir2.1-OE可抑制巨噬细胞中LPS诱导的炎症相关JAK2/STAT3信号通路活化,其效应与JAK2抑制剂AG490形似,且可以被I_(K1)阻断剂BaCl_(2)所逆转(P<0.05)。与M1极化后的巨噬细胞共培养的H9C2(2-1)心肌细胞出现炎性损伤并且凋亡率升高,zacopride可以抑制炎性巨噬细胞诱导的心肌细胞炎性损伤,表现为促炎介质IL-1β、IL-6产生减少,抗炎介质IL-4生成增多,细胞凋亡减少(P<0.05)。zacopride还I_(K1)依赖性抑制了与炎性巨噬细胞共培养的H9C2(2-1)心肌细胞CaMKII的磷酸化(P<0.05)。结论:上调Kir2.1可能通过抑制炎症相关JAK2/STAT3信号通路从而抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化;上调巨噬细胞Kir2.1可能通过调节心肌细胞CaMKII信号通路而发挥心肌保护作用。 展开更多

关键词 内向整流钾通道 心肌梗死 巨噬细胞 炎症 JAK2/STAT3信号通路

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重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对急性肝损伤小鼠的保护作用及机制

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作者 鲁玲君 杨小迪 +3 位作者 张华平 梁媛 石秀兰 周鑫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1126-1134,共9页

目的 探讨重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤小鼠的保护作用及机制。方法 将72只雄性C57BL/6J小鼠(6~8周龄)随机分为正常对照组、LPS/D-GaIN模型组、LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组和rSj-Cys对照组(n=18)。LPS... 目的 探讨重组日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤小鼠的保护作用及机制。方法 将72只雄性C57BL/6J小鼠(6~8周龄)随机分为正常对照组、LPS/D-GaIN模型组、LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组和rSj-Cys对照组(n=18)。LPS/D-GaIN组和LPS/D-GaIN+rSj-Cys组小鼠均腹腔注射LPS(10μg/kg)和D-GaIN(700 mg/kg)造模;造模后30 min,LPS/D-GaIN+rSj-Cys组及rSj-Cys对照组小鼠均腹腔注射rSj-Cys(1.25 mg/kg),正常对照组小鼠注射等体积PBS。造模6 h后,每组随机挑选8只小鼠处死,收集小鼠血清及肝组织,进行后续检测,每组剩余10只分别在3、6、12、24 h观察其生存情况,并计算生存率。检测血清丙氨酸转移酶(ALT)、天冬氨酸转移酶(AST)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肝脏组织病理形态,采用ELISA检测小鼠血清炎性因子肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-6)表达,采用免疫组化法检测肝组织巨噬细胞表面标记物CD68表达水平,采用免疫组化和免疫印迹法检测肝组织Bax、Bcl-2蛋白水平,采用TUNEL检测肝细胞凋亡情况,采用免疫印迹法检测肝组织内质网应激相关蛋白表达水平。结果 模型组小鼠12 h生存率为30%,rSj-Cys治疗组小鼠12 h生存率为80%。模型组小鼠24 h生存率为10%,rSj-Cys治疗组小鼠24 h生存率为60%;与正常对照组相比,LPS/D-GaIN模型组小鼠血清中AST、ALT、IL-6、TNF-α含量均显著上升(P<0.01),病理结构损伤严重,肝脏巨噬细胞标志物CD68表达明显增强(P<0.01),促凋亡蛋白Bax表达显著增加(P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低(P<0.01),肝细胞凋亡水平显著增加,肝组织内质网应激相关信号通路GRP78、CHOP、NF-κB p-p65的蛋白表达水平显著上调(P<0.05或P<0.01);而LPS/D-GaIN+rSj-Cys治疗组小鼠转氨酶AST、ALT和炎症因子IL-6、TNF-α水平显著下降(P<0.01),肝脏病理损伤程度减轻,肝脏巨噬细胞标志物CD68表达明显降低(P<0.01),Bax表达显著降低(P<0.01),Bcl-2表达显著增强(P<0.01),肝组织内质网应激相关信号通路GRP78、CHOP、NF-κB p-p65的蛋白表达水平下调(P<0.05或P<0.01);rSj-Cys对照组与正常对照组相比,各指标无统计学差异(P>0.05)。结论 rSj-Cys通过抑制内质网应激,减轻炎症和肝细胞凋亡缓解LPS/D-GalN引起的小鼠急性肝损伤。 展开更多

关键词 急性肝损伤 日本血吸虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂 内质网应激 炎症 凋亡

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丹参防治实验性急性肝损伤机制的研究 被引量：31

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作者 郑晓宾 韩德五 +2 位作者 许瑞龄 赵元昌 马学惠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期157-158,共2页

给Ｗｉｓｔａｒ大鼠注射硫代乙酰胺，引发肠源性内毒素血症，血浆肿瘤坏死因子－α升高，进一步介导肝损伤。给丹参煎剂后，发现血浆肿瘤坏死因子－α下降，同时血浆ＡＬＴ和肝损伤面积减少，与肝损伤组相比有显著性差异。提示肿瘤坏死... 给Ｗｉｓｔａｒ大鼠注射硫代乙酰胺，引发肠源性内毒素血症，血浆肿瘤坏死因子－α升高，进一步介导肝损伤。给丹参煎剂后，发现血浆肿瘤坏死因子－α下降，同时血浆ＡＬＴ和肝损伤面积减少，与肝损伤组相比有显著性差异。提示肿瘤坏死因子－α在肝损伤中起重要作用。丹参防治肝损伤的机理之一可能是通过减少肿瘤坏死因子－α的合成而发挥作用。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 肝损伤 丹参 中药 防治

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TNF-α在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治机制研究 被引量：28

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作者 郑晓宾 韩德五 +2 位作者 马学惠 许瑞龄 赵元昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期51-53,共3页

目的：研究肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治肝损伤机制。方法：用硫代乙酰胺（ＴＡＡ）诱发大鼠急性肝损伤，检测血浆内毒素、ＴＮＦ－α及丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）水平变化，并与丹参治疗组进... 目的：研究肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治肝损伤机制。方法：用硫代乙酰胺（ＴＡＡ）诱发大鼠急性肝损伤，检测血浆内毒素、ＴＮＦ－α及丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）水平变化，并与丹参治疗组进行比较。结果：ＴＡＡ诱发急性肝损伤大鼠血浆内毒素及ＴＮＦ－α含量升高，二者呈正相关；血浆ＡＬＴ亦升高，与ＴＮＦ－α亦呈正相关。丹参治疗组大鼠血浆ＴＮＦ－α及ＡＬＴ水平均低于肝损伤对照组。结论：ＴＡＡ引起肠源性内毒素血症，内毒素促进ＴＮＦ－α释放，ＴＮＦ－α进一步介导肝损伤。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子Α 内毒素血症 丹参 肝损伤

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TNFα和IL-10在肝硬化发生发展中动态变化的研究 被引量：17

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作者 牛春红 韩德五 +1 位作者 刘近春 赵元昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期2469-2470,2473,共3页

目的:研究肝硬化发生发展过程中TNFα和IL-10的动态变化。方法:采用本室建立的以复合因子致肝纤维化、肝硬化动物模型进行实验。对血浆TNFα和IL-10水平进行动态检测。结果:血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)随肝纤维化进程而增高,并与血浆内... 目的:研究肝硬化发生发展过程中TNFα和IL-10的动态变化。方法:采用本室建立的以复合因子致肝纤维化、肝硬化动物模型进行实验。对血浆TNFα和IL-10水平进行动态检测。结果:血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)随肝纤维化进程而增高,并与血浆内毒素水平与肝组织胶原蛋白含量均呈正相关。而血浆白细胞介素10(IL-10)在第5周前随肝纤维化进程逐渐增高,至第5周开始IL-10水平逐渐下降,到第8周末降至更低。肝组织学观察结果显示,第4周末肝组织中每100个肝细胞中含淋巴细胞数明显高于第8周末。结论:在肝硬化发展过程中促炎与促纤维化因子TNFα起着主导作用。随着肝内炎症反应的消退,IL-10不再发挥其抗纤维化作用。 展开更多

关键词 肝硬化 内毒素血症 肿瘤坏死因子 白细胞介素10 大鼠

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急性肝衰竭时肠源性内毒素血症对肝脏能量代谢的影响 被引量：18

6

作者 任大宾 韩德五 赵元昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期890-892,共3页

目的 :研究急性肝衰竭时肠源性内毒素血症对肝脏能量代谢的影响。方法 :以硫代乙酰胺 (TAA)染毒建立急性肝损伤大鼠模型 ;应用酶荧光法测定动脉血酮体 (乙酰乙酸、β -羟基丁酸 )浓度及肝细胞线粒体ATP含量 ;采用结肠切除术并观察血浆... 目的 :研究急性肝衰竭时肠源性内毒素血症对肝脏能量代谢的影响。方法 :以硫代乙酰胺 (TAA)染毒建立急性肝损伤大鼠模型 ;应用酶荧光法测定动脉血酮体 (乙酰乙酸、β -羟基丁酸 )浓度及肝细胞线粒体ATP含量 ;采用结肠切除术并观察血浆内毒素水平与血清丙氨酸氨基移换酶 (ALT)活性的变化。结果 :TAA组大鼠血浆内毒素水平与血清ALT活性均显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,动脉血酮体比 (AKBR)降至 0 4以下 ,动脉血中总酮体浓度显著低于正常对照组 (P <0 0 1)。切除结肠的TAA染毒组大鼠未发生内毒素血症 ,肝细胞线粒体ATP含量显著高于TAA组 (P <0 0 1) ,血清ALT活性虽高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,但显著低于TAA组 (P <0 0 1)。结论 :肠源性内毒素血症可损伤肝脏能量代谢 ,使肝脏代谢和功能发生严重障碍 。 展开更多

关键词 肝 内毒素类 能量代谢 大鼠 急性肝衰竭 肠源性内毒素血症 肝损伤

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酒精刺激对枯否细胞清除LPS功能的影响 被引量：9

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作者 陈贤明 马学惠 +2 位作者 许瑞龄 赵元昌 韩德五 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期381-384,共4页

目的和方法：应用免疫荧光及免疫电镜技术，对慢性酒精投与之实验大鼠及重症酒精性肝炎患者肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能进行了观察。结果：经门静脉注射ＬＰＳ１０ｍｉｎ后，Ｌｉｅｂｅｒ’ｓ酒精饮食投与６周之大鼠肝脏枯否细胞内... 目的和方法：应用免疫荧光及免疫电镜技术，对慢性酒精投与之实验大鼠及重症酒精性肝炎患者肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能进行了观察。结果：经门静脉注射ＬＰＳ１０ｍｉｎ后，Ｌｉｅｂｅｒ’ｓ酒精饮食投与６周之大鼠肝脏枯否细胞内抗ＬＰＳ荧光显色低于正常大鼠，电镜下枯否细胞内抗ＬＰＳ阳性颗粒少见，而肝窦壁内皮细胞及肝细胞内抗ＬＰＳ阳性物增多。重症酒精性肝炎患者肝穿组织枯否细胞内抗ＬＰＳ荧光显色亦显著低于正常对照。结论：酒精刺激后肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能降低。 展开更多

关键词 肝炎 酒精性肝炎 脂多糖类 枯否细胞

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乙型肝炎患者肠源性内毒素血症、高组胺血症与细胞免疫功能之间的关系 被引量：12

8

作者 李红 韩德五 +1 位作者 张素美 赵龙凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期559-562,共4页

目的:探讨慢性乙型肝炎患者肠源性内毒素血症(IETM)、组胺与细胞免疫功能之间的关系。方法:慢性乙肝患者80例,根据测定的血浆内毒素水平,将其分为内毒素(ET)阳性组和阴性组,分别检测血清白细胞介素10、12(IL-10、IL-12)、干扰素γ(IFN-... 目的:探讨慢性乙型肝炎患者肠源性内毒素血症(IETM)、组胺与细胞免疫功能之间的关系。方法:慢性乙肝患者80例,根据测定的血浆内毒素水平,将其分为内毒素(ET)阳性组和阴性组,分别检测血清白细胞介素10、12(IL-10、IL-12)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素2、4(IL-2、IL-4)浓度,组胺(HA)水平、类胰蛋白酶(TS)释放和AP50单位。结果:各肝炎患者IL-4与IL-10水平明显高于健康人,而IL-12和IFN-γ水平明显低于健康人(P<0.05);按照内毒素分组,阳性组患者IL-4与IL-10水平明显高于阴性组(P<0.05),而IL-12和IFN-γ水平在两组之间无明显差别。AP50、HA、TS水平在肝炎患者均明显高于正常对照组(P<0.05),且在内毒素阳性组均明显高于阴性组。乙肝患者内毒素分别与IL-4、IL-10、AP50及HA呈显著正相关,而HA分别与IL-12、IFN-γ呈明显负相关,与AP50、TS呈明显正相关。内毒素阳性组患者,内毒素水平分别与IL-4、IL-10、AP50及HA水平呈显著正相关,而在阴性组则无此相关性。结论:AP50可以作为IETM存在的标志物,IETM通过激活补体而导致高组胺血症并且长期持续存在,引起细胞免疫功能低下,对肝病非常不利。 展开更多

关键词 内毒素血症 肝炎 乙型 组胺 白细胞介素类

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血清型A肉毒杆菌神经毒素重链对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用 被引量：6

9

作者 高美玲 王红 +2 位作者 张彩云 兰婧 李夏青 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2221-2227,共7页

目的:观察血清型A肉毒杆菌神经毒素重链(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain,Bo NT/A HC)对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用并探讨与其相关的细胞内信号机制。方法:采用体外细胞培养技术,在培养液中加入不同浓度的Bo NT/A H... 目的:观察血清型A肉毒杆菌神经毒素重链(botulinum neurotoxin serotype A heavy chain,Bo NT/A HC)对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用并探讨与其相关的细胞内信号机制。方法:采用体外细胞培养技术,在培养液中加入不同浓度的Bo NT/A HC(0.01 nmol/L、0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L)进行干预,于24 h、48 h和72 h时收集细胞进行免疫荧光染色,再计算细胞突起长度及有突起细胞的百分比;在此基础上,选择最有效的Bo NT/A HC浓度作为处理剂量加入细胞培养液,于Bo NT/A HC作用后不同时点收集全细胞蛋白,采用Western blot检测p-ERK1/2及p-Akt的蛋白水平。结果:当Bo NT/A HC浓度为0.1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L时,细胞突起的长度及有突起细胞的百分比与对照组相比皆明显增加,差异显著(P<0.05),其中1 nmol/L效果最显著。在细胞培养液内加入1 nmol/L Bo NT/A HC后,p-ERK1/2的蛋白水平呈增加趋势,其中Bo NT/A HC作用60 min后,p-ERK1/2的增加与对照组相比差异显著(P<0.05);与p-ERK1/2变化趋势类似,细胞培养液内加入1 nmol/L的Bo NT/A HC后,p-Akt的蛋白水平也呈增加趋势,其中Bo NT/A HC作用15 min和60 min时,p-Akt增加显著(P<0.05)。结论:一定剂量的Bo NT/A HC可以促进神经细胞突起再生和生长;Bo NT/A HC对Neuro-2a细胞的促神经突起再生作用机制可能通过激活与神经再生相关的信号蛋白ERK1/2和Akt的磷酸化而实现。 展开更多

关键词 血清型A肉毒杆菌神经毒素重链 Neuro-2a细胞株 神经突起再生 细胞外信号调节激酶 蛋白激酶B

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Zacopride增强心肌内向整流钾电流(I_(K1))发挥抗心律失常效应 被引量：7

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作者 刘清华 吴博威 +1 位作者 张杨 林媛媛 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1041-1046,共6页

目的:探讨zacopride对乌头碱、氯化钡药物性心律失常模型的影响和增强心肌内向整流钾电流(IK1)与其抗心律失常的关系。方法:应用全细胞膜片钳技术观测zacopride对大鼠心室肌细胞膜主要离子流及静息膜电位(RMP)、动作电位(AP)和乌头碱所... 目的:探讨zacopride对乌头碱、氯化钡药物性心律失常模型的影响和增强心肌内向整流钾电流(IK1)与其抗心律失常的关系。方法:应用全细胞膜片钳技术观测zacopride对大鼠心室肌细胞膜主要离子流及静息膜电位(RMP)、动作电位(AP)和乌头碱所致延迟后除极(DAD)及触发活动(TA)的影响。并观察zacopride对乌头碱(30μg/kg,iv)和氯化钡(4 mg/kg,iv)2种药物性心律失常的影响。结果:0.1-10.0μmol/L zacopride可浓度依赖性激活大鼠心室肌IK1(P<0.01),而对INa、Ito、ICa-L等影响动作电位的主要离子流均无显著影响(P>0.05);使心室肌细胞膜超极化,动作电位时程(APD)缩短。1.0μmol/L为其最大效应浓度,使IK1内向电流部分(-100mV)增大33.8%,外向电流部分(-60 mV)增大32.4%;RMP由(-81.3±0.9)mV增大至(-87.5±1.7)mV,APD90由(32.48±2.70)ms缩短至(25.61±3.97)ms(P<0.01),并有效消除乌头碱所致延迟后除极(DAD)和触发活动(TA)。对于乌头碱、氯化钡所致心律失常,15μg/kg zacopride可使2种心律失常持续时间分别由(57.58±3.21)min、(49.31±2.46)min缩短至(38.25±2.59)min和(30.94±1.73)min(P<0.01)。结论:Zacopride对乌头碱、氯化钡药物性心律失常的抑制作用是由其激活心肌细胞IK1进而增大静息膜电位介导的。增强心室肌IK1可能成为抗心律失常的新机制。 展开更多

关键词 心律失常 乌头碱 静息膜电位 动作电位 内向整流钾电流 Zacopride

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一氧化氮在实验性肝损伤中的作用 被引量：4

11

作者 郑晓宾 韩德五 +3 位作者 马学惠 高飞 许瑞龄 赵元昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期1090-1093,共4页

目的：观察３ 种细胞因子对体外培养大鼠肝细胞产生一氧化氮（ ＮＯ） 的影响及ＮＯ 在实验性肝损伤中的作用。方法与结果：给大鼠注射内毒素后分离肝细胞，培养液中加入细胞因子（γ－ ＩＦＮ，ＩＬ－ ２ ，ＴＮＦ－ α） ，上清液中Ｎ... 目的：观察３ 种细胞因子对体外培养大鼠肝细胞产生一氧化氮（ ＮＯ） 的影响及ＮＯ 在实验性肝损伤中的作用。方法与结果：给大鼠注射内毒素后分离肝细胞，培养液中加入细胞因子（γ－ ＩＦＮ，ＩＬ－ ２ ，ＴＮＦ－ α） ，上清液中ＮＯ 含量增加，两种以上细胞因子联合应用，ＮＯ 含量增加更明显；大鼠注射内毒素及Ｌ－ 精氨酸，血清中ＮＯ 含量增加，肝损伤减轻；大鼠给硫代乙酰胺（ＴＡＡ） 灌胃，并注射ＮＯ 生成抑制剂Ｌ－ ＮＮＡ，动物出现嗜睡及肝昏迷脑电图，血浆ＬＤＨ、Ｃｒ升高。结论：内毒素及细胞因子促进ＮＯ 合成，ＮＯ 在内毒素诱发的肝损伤及ＴＡＡ 致肝功能不全中具有对抗作用。 展开更多

关键词 一氧化氮 细胞活素类 肝损伤 大鼠

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急性肝功能衰竭时肠粘膜屏障损伤的研究 被引量：21

12

作者 段美丽 王彦军 韩德五 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期906-908,共3页

目的：探讨急性肝功能衰竭（简称肝衰）时肠粘膜屏障损伤及其机制，并观察中药大黄对它的防治作用。方法：采用鲨试剂法作血浆内毒素定量，酚一次氨酸法测定谷氨酰胺浓度及荧光法测定谷氨酰胺酶活性和组胺含量，Dans蓝染色法测定肠粘膜... 目的：探讨急性肝功能衰竭（简称肝衰）时肠粘膜屏障损伤及其机制，并观察中药大黄对它的防治作用。方法：采用鲨试剂法作血浆内毒素定量，酚一次氨酸法测定谷氨酰胺浓度及荧光法测定谷氨酰胺酶活性和组胺含量，Dans蓝染色法测定肠粘膜通透性。结果：硫代乙酰胺（thioacetamide,TAA)引发大鼠急性肝衰，并伴有严重的肠源性内毒素血症（intestinalendotoxemiaIETM)：肠谷氨酸肢酶活性降低，肠粘膜对谷氨酸胺利用减少，肠粘膜通透性增加。组织细胞学显示，TAA组动物肝细胞发生严重变性坏死；肠粘膜淤血、水肿、糜烂，肠肥大细胞脱颗粒。电镜示肠微绒毛倒伏、脱落，细胞间紧密连接破坏。大黄组动物IETM与肝组织损伤明显减轻。结论：急性肝袁伟有肠粘膜屏障损伤，其发生机制与IETM及其介导的组腹增多有关。大黄对急性肝衰时肠粘膜屏障损伤有一定防治作用。 展开更多

关键词 肝功能衰竭 肠粘膜 肠粘膜屏障损伤

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N-乙酰半胱氨酸对脂多糖诱导的小鼠肝MAPK磷酸化的影响 被引量：6

13

作者 田新强 许瑞龄 尹蕾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1565-1569,共5页

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的肝MAPK磷酸化的影响。方法:雄性昆明种小鼠54只随机分为对照组(n=6):0.9%NaCl0.2mLip;LPS组(n=24):LPS5mgip;NAC+LPS组(n=24):NAC150mg·kg-1.d-1ip,连续3d;第3dNAC灌胃后1h时,LPS5... 目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)诱导的肝MAPK磷酸化的影响。方法:雄性昆明种小鼠54只随机分为对照组(n=6):0.9%NaCl0.2mLip;LPS组(n=24):LPS5mgip;NAC+LPS组(n=24):NAC150mg·kg-1.d-1ip,连续3d;第3dNAC灌胃后1h时,LPS5mgip。将小鼠分别在注射LPS或生理盐水后0.5h、1h、2h和6h时,在戊巴比妥钠麻醉下开腹取肝,测定肝MDA和还原型谷胱甘肽(GSH)含量;Western blotting方法测定肝脏MEK1/2、ERK1/2、p38MAPK磷酸化水平,放免法测定肝TNF-α含量。结果:NAC预处理使肝MDA含量明显下降,使肝GSH含量升高。NAC预处理显著抑制了LPS所致的肝MEK1/2、ERK1/2、p38MAPK磷酸化,同时使肝TNF-α水平显著降低。结论:在LPS诱导的急性肝损伤过程中,活性氧(ROS)在激活MAPK信号转导中起重要作用。NAC通过其抗氧化作用部分抑制了LPS诱导的MAPK磷酸化,使TNF-α生成减少,从而发挥抗损伤作用。 展开更多

关键词 肝损伤 有丝分裂素激活蛋白激酶类 脂多糖类 乙酰半胱氨酸 活性氧

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Zacopride缺血后适应抑制大鼠缺血/再灌注性心律失常 被引量：3

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作者 李瑜 杨迎 +4 位作者 郭云飞 曹晓娜 张研 翟旭雯 刘清华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1921-1927,共7页

目的：探讨心肌内向整流钾通道（Kir）激动剂zacopride缺血后适应对大鼠缺血/再灌注性心律失常的影响及可能的电生理学机制。方法：SD大鼠Langendorff离体灌流心脏和在体麻醉大鼠冠状动脉左前降支结扎15 min后松扎15 min诱发缺血/再灌... 目的：探讨心肌内向整流钾通道（Kir）激动剂zacopride缺血后适应对大鼠缺血/再灌注性心律失常的影响及可能的电生理学机制。方法：SD大鼠Langendorff离体灌流心脏和在体麻醉大鼠冠状动脉左前降支结扎15 min后松扎15 min诱发缺血/再灌注性心律失常。在冠状动脉左前降支松扎前3 min给予zacopride,观察缺血后适应对再灌注性心律失常的影响。胶原酶法分离大鼠单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察zacopride对心室肌细胞缺氧/复氧致延迟后除极的影响和对细胞膜表面ATP敏感性钾通道（KATP）的影响。结果：大鼠离体心脏再灌注时预先给予0.1～10μmol/L zacopride可有效抑制再灌注性心律失常的发生。其中0.1μmol/L zacopride为最大效应浓度,可使期前收缩数减少,室速和室颤发生率均下降,持续时间均缩短;再灌前3 min将1μmol/L BaCl2和0.1μmol/L zacopride同时灌流心脏,BaCl2可部分逆转zacopride的保护效应（P〈0.01）,表明zacopride的后适应保护与其增强Kir电流的作用有关。在1.5～5μg/kg剂量范围内,zacopride对大鼠在体再灌注诱发的室速和室颤有明显抑制效应,但对期前收缩数无明显影响。1.5μg/kg zacopride抗心律失常的效应与阳性对照药利多卡因（7.5 mg/kg）相似。进一步研究发现zacopride可有效抑制缺氧/复氧所致心室肌细胞延迟后除极,降低其发生率（P〈0.01）。Zacopride的上述效应与K（ATP）无关。结论：Zacopride对大鼠缺血/再灌注性心律失常的抑制作用是由激活心肌细胞Kir介导的。激活Kir并消除延迟后除极所诱发的触发性活动可能是zacopride缺血后适应的主要机制。 展开更多

关键词 Zacopride 心律失常 后适应 内向整流钾通道 延迟后除极

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Zacopride对血管紧张素Ⅱ诱发的心肌纤维化的影响 被引量：5

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作者 张研 张海楠 +6 位作者 许静 吕艺蓁 张瑾 彭菁 李盼 乔希 刘清华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1183-1188,共6页

目的:研究内向整流钾通道(IK1)激动剂扎考必利(zacopride,Zac)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFb)细胞活力和凋亡的影响,探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法:以组织块消化和差速贴壁法... 目的:研究内向整流钾通道(IK1)激动剂扎考必利(zacopride,Zac)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFb)细胞活力和凋亡的影响,探讨其抑制心肌纤维化的机制。方法:以组织块消化和差速贴壁法原代分离培养SD乳鼠心室成纤维细胞,用AngⅡ诱导细胞建立细胞活化模型。将分离培养的CFb随机分为空白对照组、AngⅡ模型组、Zac干预组、Zac+Ba Cl2干预组、Zac+氯喹干预组和AngⅡ+卡托普利阳性对照组。CCK-8法检测Zac对CFb活力的影响;ELISA法测定CFb上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测心肌内向整流钾通道蛋白Kir2.1表达的变化。结果:与空白对照组比较,AngⅡ模型组CFb活力及胶原合成显著增加,Kir2.1的表达降低(P<0.05);与AngⅡ模型组比较,Zac干预组CFb活力及胶原合成显著降低,凋亡率显著升高,Kir2.1的表达明显上调(P<0.05);IK1阻断剂Ba Cl2和氯喹可阻断Zac对IK1通道的激动效应,明显逆转Zac的抗心肌纤维化作用。结论:Zac可明显抑制AngⅡ诱发的心肌纤维化,其机制可能与激动心肌内向整流钾通道,进而抑制成纤维细胞活力并诱导其凋亡有关。 展开更多

关键词 内向整流钾通道 扎考比利 血管紧张素Ⅱ 心肌纤维化 细胞凋亡

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A型肉毒杆菌神经毒素重链干预大鼠脊髓损伤后蛋白表达的初步研究 被引量：2

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作者 兰婧 王红 +2 位作者 白娟 王亚芳 李夏青 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2125-2132,共8页

目的:初步观察大鼠脊髓损伤模型基础上局部注射小剂量A型肉毒杆菌神经毒素重链(BoNT/A HC)后对局部蛋白表达谱的影响,为探讨BoNT/A HC干预在体神经损伤后相关蛋白表达及其干预神经再生机制提供实验基础。方法:复制大鼠单侧腰段脊髓损伤... 目的:初步观察大鼠脊髓损伤模型基础上局部注射小剂量A型肉毒杆菌神经毒素重链(BoNT/A HC)后对局部蛋白表达谱的影响,为探讨BoNT/A HC干预在体神经损伤后相关蛋白表达及其干预神经再生机制提供实验基础。方法:复制大鼠单侧腰段脊髓损伤模型;采用SDS-PAGE及双向电泳观察不同剂量BoNT/A HC(2μg、4μg、6μg和8μg)对脊髓损伤后局部(包括损伤部位及其近头端部分脊髓组织)蛋白表达谱的干预作用。结果:大鼠单侧腰段脊髓损伤2 d时局部脊髓组织结构明显破坏崩解,损伤波及左侧脊髓灰质及白质;脊髓损伤局部SDS-PAGE及考马斯亮蓝染色显示,于损伤同时局部一次性注射不同剂量BoNT/A HC后,某些蛋白表达与单纯损伤组相比明显不同,而与正常组基本一致;双向电泳结果进一步显示,损伤局部注射6μg BoNT/A HC后2 d和20 d时,在不同等电点及不同蛋白分子量水平上,有10余种蛋白表达与单纯损伤组明显不同,呈向正常转化的趋势。结论:大鼠脊髓损伤局部注射BoNT/A HC一定时间可影响损伤局部蛋白表达谱的变化,这种变化呈现由损伤造成的蛋白表达变化被转向正常的趋势。 展开更多

关键词 脊髓损伤 A型肉毒杆菌神经毒素重链 神经损伤 神经再生

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不同剂量内毒素刺激枯否细胞分泌肿瘤坏死因子-α及内皮素-1的体外观察 被引量：5

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作者 刘立新 韩德五 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1298-1300,共3页

目的 :探讨体外脂多糖 (LPS)刺激枯否细胞 (KC)分泌肿瘤坏死因子 -α (TNF -α)及内皮素 - 1(ET - 1)的作用。方法 :采用大鼠肝KC分离与培养技术 ,动态观察LPS刺激KC分泌TNF -α和ET - 1的作用。结果 :LPS具有明显活化KC作用 ,在一定LP... 目的 :探讨体外脂多糖 (LPS)刺激枯否细胞 (KC)分泌肿瘤坏死因子 -α (TNF -α)及内皮素 - 1(ET - 1)的作用。方法 :采用大鼠肝KC分离与培养技术 ,动态观察LPS刺激KC分泌TNF -α和ET - 1的作用。结果 :LPS具有明显活化KC作用 ,在一定LPS浓度范围内对KC分泌的TNF -α及ET - 1有促进作用。结论 :LPS可促进体外培养的KC分泌TNF -α及ET - 1。 展开更多

关键词 枯否细胞 ET-1 TNFA 肝损伤 内毒素血症

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肠源性内毒素血症对肝组织细胞间粘附分子-1表达的影响 被引量：4

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作者 刘立新 韩德五 许瑞龄 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期73-75,共3页

目的 :探讨肠源性内毒素血症对肝组织细胞间粘附分子 - 1(ICAM - 1)表达的影响。方法 :采用Westernblot的方法检测硫代乙酰胺 (TAA)诱导的肠源性内毒素血症大鼠肝组织中ICAM - 1表达的变化。结果 :ICAM - 1的分子量为 95kD ,正常对照组... 目的 :探讨肠源性内毒素血症对肝组织细胞间粘附分子 - 1(ICAM - 1)表达的影响。方法 :采用Westernblot的方法检测硫代乙酰胺 (TAA)诱导的肠源性内毒素血症大鼠肝组织中ICAM - 1表达的变化。结果 :ICAM - 1的分子量为 95kD ,正常对照组与注射TAA 6h组ICAM - 1的表达很弱 ,而在注射TAA 12h以后的表达有增强 ,且与血浆内毒素水平及反映肝损伤程度的ALT活性变化相一致。结论 :肠源性内毒素血症可诱导肝组织中ICAM - 1表达的上调 ,后者与肝损伤程度相一致。 展开更多

关键词 肠毒血症 细胞粘着分子 肝 损伤

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封闭枯否细胞对LPS诱导激活丝裂原活化蛋白激酶的影响 被引量：2

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作者 陈红梅 许瑞龄 +2 位作者 张磊 郑天珍 李伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1942-1946,共5页

目的:利用小鼠LPS血症模型,探讨封闭枯否细胞(KCs)对LPS诱导MAPK信号转导通路的影响。方法:雄性昆明种小鼠在注射LPS(5 mg/kg)前48 h及24 h,分别静脉注射GdCl3(10 mg/kg)或等量的生理盐水,于LPS或生理盐水注射后30 min,分别取出肝脏或分... 目的:利用小鼠LPS血症模型,探讨封闭枯否细胞(KCs)对LPS诱导MAPK信号转导通路的影响。方法:雄性昆明种小鼠在注射LPS(5 mg/kg)前48 h及24 h,分别静脉注射GdCl3(10 mg/kg)或等量的生理盐水,于LPS或生理盐水注射后30 min,分别取出肝脏或分离KCs;体外培养小鼠KCs经GdCl3(100μmol/L)预处理1 h,加入含LPS(100μg/L)的DMEM培养基继续孵育30 min,分别检测肝脏及体内外KCs ERK1/2、p38MAPK蛋白表达和磷酸化水平,及GdCl3对KCs吞噬、分泌功能的影响。结果:GdCl3可抑制LPS诱导KCs活化和TNF-α分泌,但不能抑制LPS诱导KCs或肝脏ERK1/2、p38MAPK磷酸化,也不能影响ERK1/2、p38MAPK蛋白表达,KCs经GdCl3单独短时间处理(1 h),可使其少量分泌TNF-α。结论:封闭KCs并不能通过调节细胞内ERK1/2、p38MAPK信号转导途径,抑制LPS诱导的KCs活化及TNF-α释放,而可能是通过其它信号转导途径(JNK、NF-кB、GPCR等)间的相互作用减轻肝损伤。 展开更多

关键词 枯否细胞 脂多糖类 氯化钆 有丝分裂素激活蛋白激酶类 肿瘤坏死因子

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过氧亚硝基阴离子在肝纤维化形成中的作用 被引量：2

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作者 刘近春 韩德五 +2 位作者 李艳娇 许瑞龄 赵元昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期2043-2045,共3页

目的:探讨过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在肝纤维化形成过程中所起的作用。方法:采用复合因素 建立肝纤维化(HF)动物模型的同时,用一氧化氮合酶抑制剂L-NNA(20mg·kg-1·d-1)给大鼠灌胃(HF+NNA),于实 验4周末测定血浆脂多糖(LPS)、N... 目的:探讨过氧亚硝基阴离子(ONOO-)在肝纤维化形成过程中所起的作用。方法:采用复合因素 建立肝纤维化(HF)动物模型的同时,用一氧化氮合酶抑制剂L-NNA(20mg·kg-1·d-1)给大鼠灌胃(HF+NNA),于实 验4周末测定血浆脂多糖(LPS)、NO2-／NO3-含量;采用免疫组化的方法检测肝组织硝基酪氨酸(NT)的表达;用VG 染色观察肝组织纤维化程度。结果:在HF+NNA组血浆NO水平明显低于HF组(P<0．01),HF组NT表达最强,纤 维化程度最严重。结论:ONOO-能促进肝纤维化的发展。 展开更多

关键词 过氧亚硝基阴离子 肝硬化 一氧化氮

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