抗血管紧张素ⅡAT1受体抗体对大鼠脾脏T淋巴细胞的促增殖作用 被引量：8

1

作者 张苏丽 杨丽红 +5 位作者 郑荣华 李晓宇 闫莉 武烨 贺忠梅 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2009年第2期135-138,共4页

目的观察抗AT1受体（AT1R）抗体对培养的大鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性的影响。方法以人工合成的AT1R细胞外第二环肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原主动免疫Wistar大鼠，利用亲和层析法提纯免疫大鼠血清中含有抗AT1R抗体的IgGs；培养大鼠脾淋巴细... 目的观察抗AT1受体（AT1R）抗体对培养的大鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性的影响。方法以人工合成的AT1R细胞外第二环肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原主动免疫Wistar大鼠，利用亲和层析法提纯免疫大鼠血清中含有抗AT1R抗体的IgGs；培养大鼠脾淋巴细胞，刀豆蛋白A（ConA）诱导其活化和增殖，分别给予不同浓度的提纯IgGs（0．01、0．1、1umol／L）和血管紧张素Ⅱ进行干预，通过CCK-8法测定脾淋巴细胞增殖情况，并确定抗AT，R抗体的作用位点。结果ConA刺激48h后，大鼠脾淋巴细胞CCK-8吸光度显著高于空白对照组（0．38±0．05比0．27±0．02，P〈0．05）；不同浓度的IgGs剂量依赖性促进脾脏T淋巴细胞增殖（A值分别为0．53±0．03、0．71±0．04和0．94±0．05），与血管紧张素Ⅱ的作用相类似（A值为0．73±0．14、1．52±0．17和2．14±0．12）；AT1R特异性阻断剂Losartan和AT，R—ECⅡ均可显著减弱含抗AT1R抗体IgGs的促增殖效应（A值由0．71±0．04分别降为0．54±0．02，P〈0．01；0．52±0．04，P〈0．01）。结论抗AT1R抗体具有受体激动剂样效应，通过特异结合AT1R—ECⅡ剂量依赖性增强离体脾T淋巴细胞增殖活性。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ1型受体 抗体 T淋巴细胞 细胞增殖

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外源性硫氧还蛋白对高糖、高脂刺激引起的H9c2细胞损伤和凋亡的影响 被引量：4

2

作者 薛晓维 姚艳玲 +2 位作者 范丽芬 张燕 焦向英 《中国心血管病研究》 CAS 2012年第1期58-62,共5页

目的 观察给予外源性硫氧还蛋白（Trx）后对高糖、高脂刺激引起的心肌细胞损伤和凋亡的影响,并分析其可能机制.方法 将处于对数生长期的H9c2心肌细胞随机分为三组：正常对照组（普通DMEM培养基葡萄糖5 mmol/L加入20 mmol/L甘露醇）、高... 目的 观察给予外源性硫氧还蛋白（Trx）后对高糖、高脂刺激引起的心肌细胞损伤和凋亡的影响,并分析其可能机制.方法 将处于对数生长期的H9c2心肌细胞随机分为三组：正常对照组（普通DMEM培养基葡萄糖5 mmol/L加入20 mmol/L甘露醇）、高糖高脂组（DMEM高糖25 mmol/L培养基加入高脂600 μmol/L软脂酸）和Trx干预组（在高糖高脂组的培养基中加入3 ＊9滋mol/L Trx）.培养48 h后,分别收集培养基上清与细胞,进行指标检测.结果 与正常对照组比较,高糖高脂组乳酸脱氢酶及caspase-3活性均显著升高（P＜0.01）.给予Trx干预后,与高糖高脂组比较,Trx干预组乳酸脱氢酶及caspase-3活性均显著下降（P＜0.01）.与正常组比较,高糖高脂组Trx的表达量未见明显改变（P＞0.05）,但是Trx活性显著下降（P＜0.01）.结论 高糖、高脂刺激可以引起H9c2心肌细胞损伤和凋亡,其机制与内源性Trx活性的降低有关.外源性补充Trx可明显提高Trx的活性,减轻心肌细胞的损伤和凋亡. 展开更多

关键词 高糖 高脂 凋亡 H9C2细胞 硫氧还蛋白

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高糖高脂对培养成年大鼠心肌细胞损伤观察及机制初探 被引量：4

3

作者 张燕 薛晓维 +1 位作者 赵晓琴 焦向英 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第1期56-59,共4页

目的建立成年大鼠心肌细胞培养模型，观察给予高糖、高脂刺激后是否发生心肌细胞损伤和凋亡，并分析其可能机制。方法将分离所得成年大鼠心肌细胞接种入培养皿后随机分为2组进行培养。正常对照组：以M199培养基（Media199）加入5mmol／... 目的建立成年大鼠心肌细胞培养模型，观察给予高糖、高脂刺激后是否发生心肌细胞损伤和凋亡，并分析其可能机制。方法将分离所得成年大鼠心肌细胞接种入培养皿后随机分为2组进行培养。正常对照组：以M199培养基（Media199）加入5mmol／L葡萄糖与20mmol／L甘露醇作为正常对照培养基培养细胞；高糖高脂组：以M199加入高糖（25mmol／L葡萄糖）高脂（600μmol／L软脂酸）作为培养基培养模拟糖尿病。培养48h后，分别收集培养基上清与细胞，进行心肌损伤和凋亡指标测定。结果高糖高脂组乳酸脱氢酶（LDH），细胞凋亡蛋白caspase-3、caspase-8、caspase-9活性显著升高，与正常对照组比较，差异均具有统计学意义（P均〈0．01）。结论在培养的成年大鼠心肌细胞，高糖、高脂可引起心肌细胞损伤和凋亡，这种凋亡与easpase-8和caspase-9依赖的凋亡途径有关。 展开更多

关键词 高糖 高脂 凋亡 细胞培养 心肌细胞

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抗β1-肾上腺素受体抗体对大鼠T淋巴细胞的作用 被引量：2

4

作者 包海军 白克华 +6 位作者 王瑾 左琳 马秀瑞 宋峰 燕子 贺忠梅 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2009年第4期298-301,共4页

目的观察抗β1-肾上腺素受体（AR）抗体对大鼠T淋巴细胞的作用。方法用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR—ECⅡ）作为抗原主动免疫大鼠，采用流式细胞技术测定大鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化；观察抗β1-AR自身抗体... 目的观察抗β1-肾上腺素受体（AR）抗体对大鼠T淋巴细胞的作用。方法用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR—ECⅡ）作为抗原主动免疫大鼠，采用流式细胞技术测定大鼠外周血T淋巴细胞亚群的变化；观察抗β1-AR自身抗体对培养的淋巴结T细胞的影响。结果免疫组血清中T淋巴细胞亚群CD4^＋／CD8^＋在处理24h后开始升高，在第7天时达到高峰并持续2个月；抗β1-AR自身抗体可促进T淋巴细胞增殖，与β1-AR特异性阻断剂Metoprolol或β1-AR—ECⅡ共同作用时，可使抗体的促增殖效能显著减弱。结论抗β1-AR自身抗体可以使免疫系统失衡，促进T淋巴细胞的增殖。 展开更多

关键词 Β1-肾上腺素受体 自身抗体 T淋巴细胞

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β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体长期存在对大鼠免疫功能的影响 被引量：2

5

作者 王瑾 王丽 +4 位作者 吕婷婷 王洁 宋峰 燕子 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第5期370-374,共5页

目的 观察β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体（β1-AA）长期存在对大鼠免疫功能的影响.方法 用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR-ECII）作为抗原主动免疫大鼠,获取β1-AA,并经SDS-PAGE检测纯度;将纯化的β1-AA... 目的 观察β1-肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体（β1-AA）长期存在对大鼠免疫功能的影响.方法 用人工合成的β1-肾上腺素受体细胞外第二环肽段（β1-AR-ECII）作为抗原主动免疫大鼠,获取β1-AA,并经SDS-PAGE检测纯度;将纯化的β1-AA通过鼠尾静脉注入大鼠体内,建立被动免疫模型,并通过SA-ELISA方法定期检测血清中β1-AA的水平;定期采用流式细胞技术测定大鼠外周血CD4＋、CD8＋ T淋巴细胞亚群的变化;定期用直接溶血空斑和间接溶血空斑实验观察B细胞抗体生成能力的变化.结果 被动免疫模型中,β1-AA水平可以维持在与临床患者血清中该抗体相匹配的状态,较好地模拟了临床患者血清中自身抗体维持在一定水平且长期存在的状态.β1-AA的长期存在可以使机体的CD4＋/CD8＋ T淋巴细胞比值持续升高,使直接溶血空斑和间接溶血空斑数目明显增高.结论 β1-AA长期存在可以导致机体细胞免疫和体液免疫功能改变. 展开更多

关键词 Β1-肾上腺素受体 自身抗体 淋巴细胞

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链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠的心肌损伤观察及机制初探 被引量：5

6

作者 赵晓琴 赵俊杰 +3 位作者 张燕 李晓宇 王可 焦向英 《中国心血管病研究》 CAS 2010年第1期52-56,共5页

目的观察链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病后不同时期大鼠心肌损伤及凋亡的程度，并对其机制进行分析。方法使用高糖、高脂加STZ注射造成大鼠2型糖尿病模型，于STZ注射后不同时间点分批处死动物，对心肌损伤及凋亡指标进行测定。结果糖... 目的观察链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病后不同时期大鼠心肌损伤及凋亡的程度，并对其机制进行分析。方法使用高糖、高脂加STZ注射造成大鼠2型糖尿病模型，于STZ注射后不同时间点分批处死动物，对心肌损伤及凋亡指标进行测定。结果糖尿病大鼠经STZ处理1周后，与对照组大鼠相比，空腹血糖明显升高（FBG≥16．7mmol／L），而血清胰岛素含量升高或无明显变化，提示2型糖尿病造模成功。糖尿病大鼠第12周起LVSP、＋dp／dtmax、-dp／dtmax显著降低，提示糖尿病可引起心功能下降。糖尿病大鼠第2周、4周和12周CK—MB明显增高，第12周和24周cTnI明显增高，提示糖尿病第2周即可诱发心肌损伤，并随着病程的发展加重。凋亡指标测定表明，糖尿病大鼠在第4周和12周时，caspase-3和caspase-8活性显著增高，第12周和24周时caspase-9活性显著增高，提示糖尿病第4周即可造成心肌细胞凋亡，且可能依赖caspase-8途径早于依赖caspase-9途径。结论糖尿病可以引起心肌损伤和细胞凋亡，并随病程的延长而加重，这种凋亡与caspase-8和caspase-9依赖的凋亡途径有关。 展开更多

关键词 糖尿病 2型 心肌 损伤 细胞凋亡

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血管紧张素Ⅱ-1型受体抗体的制备及其生物效应检测 被引量：4

7

作者 刘忠保 张苏丽 赵荣瑞 《中国心血管病研究》 CAS 2010年第12期934-938,共5页

目的 利用主动免疫方法 在大鼠血清中制备AT1受体的抗体并检测其对心血管系统的生物效应,以探讨血管紧张素Ⅱ-1型（AT1）受体的抗体与心血管疾病的关系.方法 按照人AT1受体细胞外第二环表位肽段合成抗原肽段,以此对大鼠进行主动免疫,获... 目的 利用主动免疫方法 在大鼠血清中制备AT1受体的抗体并检测其对心血管系统的生物效应,以探讨血管紧张素Ⅱ-1型（AT1）受体的抗体与心血管疾病的关系.方法 按照人AT1受体细胞外第二环表位肽段合成抗原肽段,以此对大鼠进行主动免疫,获取抗AT1受体抗体,并提纯抗体IgG,检测该抗体对大鼠血管环和离体心脏的生物效应.结果 ELISA检测表明,抗体滴度从免疫后第2周开始升高,第8周滴度达到一个高峰;PAGE凝胶电泳检测显示纯化结果 理想.AT1受体抗体可剂量依赖性地使大鼠主动脉血管环收缩增加,使离体灌流心脏的收缩和舒张功能增强.上述效应与血管紧张素Ⅱ的作用一致,并可被AT1受体阻断剂Losartan所阻断.结论 用主动免疫法可在大鼠血清中获取足量AT1受体抗体,借以研究其生物效应.AT1受体抗体对大鼠主动脉血管环和离体心脏均有激动剂样的刺激效应,提示该抗体可能与心血管疾病的发病有关. 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ-1型受体 抗体 血管收缩 心功能

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α1-肾上腺素受体自身抗体的检测及初步应用 被引量：2

8

作者 杨光照 闫莉 +3 位作者 王晓樑 马秀瑞 张苏丽 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2009年第7期546-549,共4页

目的 建立α1-肾上腺素受体自身抗体的检测方法.方法 以合成的人α1肾上腺素受体(α1-AR)细胞外第一环功能表位肽段(第160-169位氨基酸残基)为特异性抗原,建立间接酶联免疫吸附测定方法,并用该法检测100例血压正常者和69例原发性高血压... 目的 建立α1-肾上腺素受体自身抗体的检测方法.方法 以合成的人α1肾上腺素受体(α1-AR)细胞外第一环功能表位肽段(第160-169位氨基酸残基)为特异性抗原,建立间接酶联免疫吸附测定方法,并用该法检测100例血压正常者和69例原发性高血压患者血清中抗α1-AR自身抗体.结果 阴性质控血清的批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为5.4%和11.5%;阳性质控血清分别为4.0%和9.8%.用标准人工合成的抗原吸收该特异性抗体后,吸光度值明显降低.原发性高血压患者血清中抗α1-受体自身抗体的阳性率为27.5%(19/69),明显高于血压正常者的9%(9/100).结论 该方法稳定性、特异性良好,对临床上原发性高血压的辅助诊断将具有重要价值. 展开更多

关键词 受体 肾上腺素能α1 自身抗体 高血压

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成年大鼠心肌缺血再灌注后X染色体连锁凋亡抑制蛋白的动态表达变化 被引量：2

9

作者 王可 刘静祎 +4 位作者 田珏 燕子 左琳 郑荣华 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2010年第5期376-379,共4页

目的 测定心肌缺血再灌注过程中X染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）动态表达变化,探讨其与缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡的关系.方法 将健康成年雄性SD大鼠随机分为两组,手术组和伪手术组,每组根据再灌注时间再分为6组：缺血30min,再灌... 目的 测定心肌缺血再灌注过程中X染色体连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）动态表达变化,探讨其与缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡的关系.方法 将健康成年雄性SD大鼠随机分为两组,手术组和伪手术组,每组根据再灌注时间再分为6组：缺血30min,再灌注0、1、2、3、12、24 h组.采用半胱天冬酶-3（Caapaae-3）活性检测判定大鼠心肌细胞凋亡发生情况;用Western Blot和实时定量PCR技术分别检测各组心肌组织中XIAP的蛋白和基因表达水平.结果 Caspase-3活性从心肌缺血再灌注1 h开始升高,再灌注12 h活性最大,再灌注24 h趋于正常.心肌缺血再灌注3 h,XIAP蛋白表达开始降低,再灌注12 h表达最低;而XIAP的mRNA水平表达各组差异无统计学意义.结论 成年大鼠心肌缺血再灌注后Caspase-3活性增高可能与XIAP表达降低有关,提示XIAP表达降低可能参与了心肌缺血再灌注诱导的细胞凋亡. 展开更多

关键词 缺血再灌注 X染色体连锁凋亡抑制蛋白 半胱天冬酶-3

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抗血管紧张素Ⅱ1型受体抗体阳性孕鼠模型的制备 被引量：2

10

作者 郑荣华 王澎 +5 位作者 张苏丽 卫小红 杨丽红 燕子 张熙 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2010年第4期290-293,共4页

目的制备抗血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）抗体阳性的孕鼠模型，为先兆子痫疾病的自身免疫机制研究提供重要工具。方法以合成的人AT1R细胞外第二环肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原主动免疫雌性Wistar大鼠，待雌鼠体内抗AT1R抗体达高峰后，将其... 目的制备抗血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）抗体阳性的孕鼠模型，为先兆子痫疾病的自身免疫机制研究提供重要工具。方法以合成的人AT1R细胞外第二环肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原主动免疫雌性Wistar大鼠，待雌鼠体内抗AT1R抗体达高峰后，将其与正常雄鼠（未免疫）交配，从而建立抗AT1R抗体阳性的孕鼠模型。用SA—ELISA法检测孕鼠妊娠中期血清中抗AT1R抗体的水平、免疫球蛋白类型及亚类。结果免疫雌鼠体内抗AT，R抗体滴度在4周时明显升高，8周时达高峰（A值为2．89±0．21，同期对照组A值为0．44±0．06，P〈0．01）；与正常雄鼠交配怀孕后14d时，免疫孕鼠血清中的抗AT1R抗体仍维持高滴度。该抗体属于IgG类免疫球蛋白，而非IgM及IgA类，在大鼠IgC的4个亚型（IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG2c）中，该血清抗体主要属于IgG2b亚型（A值为0．32±0．04，同期对照组A值为0．08±0．01，P〈0．01），尚有极少部分属于IgG2a亚型（A值为0．10±0．01，同期对照组A值为0．07＋0．01，P〈0．05）。结论用主动免疫法可使孕鼠体内产生高滴度的抗AT，R抗体，且该抗体的亚型与先兆子痫患者体内的AT1受体自身抗体（AT1-AA）具有良好一致性，所以该造模方法可以作为从免疫学角度研究先兆子痫的一种工具。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ1型受体 抗体 亚型

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免疫大鼠血清中抗β1、β3肾上腺素受体及M2乙酰胆碱受体抗体IgG亚类的分布

11

作者 马秀瑞 王瑾 +4 位作者 燕子 郭永强 韩蓉晖 李苏芬 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2010年第3期218-221,共4页

目的明确免疫大鼠血清中抗β1、β3肾上腺素受体及M2乙酰胆碱受体抗体的IgG亚类，为进一步研究此类抗体的作用机制提供实验依据。方法以合成的大鼠β1、β3肾上腺素受体和M2乙酰胆碱受体细胞外第二环肽段为抗原分别主动免疫Wistar大鼠... 目的明确免疫大鼠血清中抗β1、β3肾上腺素受体及M2乙酰胆碱受体抗体的IgG亚类，为进一步研究此类抗体的作用机制提供实验依据。方法以合成的大鼠β1、β3肾上腺素受体和M2乙酰胆碱受体细胞外第二环肽段为抗原分别主动免疫Wistar大鼠，应用免疫球蛋白纯化技术特异性提纯其血清中IgG类抗体，应用BCA进行蛋白定量，调整血清中蛋白量一致，用SA—ELISA法检测抗β1、β3肾上腺素受体和M2乙酰胆碱受体抗体的IgG亚类。结果免疫组中属于IgG2a亚类的抗β1肾上腺素受体抗体的A值为（0．45±0．01），明显高于对照组（0．08±0．003，P〈0．05）；免疫组中属于IgG2b亚类的抗艮肾上腺素受体抗体的A值为（0．59±0．02），显著高于对照组（0．2±0．02，P〈0．05）；免疫组中属于IgG2a亚类的抗M2乙酰胆碱受体抗体的A值为（0．56±0．04），显著高于对照组（0．12±0．01，P〈0．05）。结论免疫大鼠血清中抗β1肾上腺素受体抗体和抗M2乙酰胆碱受体抗体主要属于IgG2a亚类，抗β3肾上腺素受体抗体主要属于IgG2b亚类。 展开更多

关键词 Β1肾上腺素受体 Β3肾上腺素受体 M2乙酰胆碱受体 抗体 亚类

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缬沙坦对2型糖尿病大鼠血管功能损伤的保护作用

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作者 杨艳宏 张忠 焦向英 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第4期290-294,共5页

目的观察缬沙坦对2型糖尿病大鼠离体胸主动脉、肾动脉、肠系膜动脉舒张功能的保护作用并分析其机制。方法使用雄性大鼠36只随机分为2组，即正常对照组和糖尿病组。糖尿病组给予高糖高脂饮食诱导结合＋STZ注射（40mg／kg体重）制备2型糖... 目的观察缬沙坦对2型糖尿病大鼠离体胸主动脉、肾动脉、肠系膜动脉舒张功能的保护作用并分析其机制。方法使用雄性大鼠36只随机分为2组，即正常对照组和糖尿病组。糖尿病组给予高糖高脂饮食诱导结合＋STZ注射（40mg／kg体重）制备2型糖尿病模型。造膜成功后随机分为糖尿病＋盐水组和糖尿病＋缬沙坦组，分别给予相应体积生理盐水或缬沙坦10mg·kg-1·d-1灌胃，持续8周后，处死动物取胸主动脉、肾动脉和肠系膜动脉，检测各组血管内皮依赖和非内皮依赖性舒张反应及血管生物化学指标。结果与正常对照组相比，糖尿病＋盐水组大鼠各血管内皮依赖性舒张功能显著下降，表现为Emax值下降和EC50显著升高，糖尿病＋缬沙坦治疗组与糖尿病＋盐水对照组相比，血管内皮依赖性舒张功能显著改善，而硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应三组差异无统计学意义。自由基测定结果表明，糖尿病引起血管组织发生自由基损伤，表现为丙二醛含量升高，超氧化物歧化酶活性降低，同时一氧化氮含量下降，舒血管功能受损。缬沙坦干预使一氧化氮生成增加，自由基损伤减轻，显著改善了糖尿病造成的血管损伤。结论缬沙坦对2型糖尿病大鼠的胸主动脉、肾动脉及肠系膜动脉的内皮依赖性舒张功能受损均有显著保护作用，作用与其抗自由基生成、促进内皮一氧化氮合成有关。 展开更多

关键词 2型糖尿病 血管紧张素Ⅱ 缬沙坦 内皮血管

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