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抗钠钙交换体特异位点抗体对大鼠单个心室肌细胞钙瞬变的影响
被引量：
2
1
作者
白晓洁
吴博威
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1795-1798,共4页
目的:观察抗钠钙交换体(Sodium calcium exchanger,NCX)特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体对正常成年大鼠心室肌细胞钙瞬变的影响。方法:利用Langendorff灌流方法,分离得到单个大鼠心室肌细胞;负载荧光染料Fura-2/AM和2%...
目的:观察抗钠钙交换体(Sodium calcium exchanger,NCX)特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体对正常成年大鼠心室肌细胞钙瞬变的影响。方法:利用Langendorff灌流方法,分离得到单个大鼠心室肌细胞;负载荧光染料Fura-2/AM和2%牛血清白蛋白后,利用离子影像分析系统记录激发光为340 nm和380 nm时心室肌细胞成对系列图像,计算钙瞬变峰值(F340/F380)、细胞钙恢复90%时程(TR_(90))以及钙敏感性(F340/F380与细胞缩短数值的比值)。结果:抗NCX特异位点抗体可以增加正常成年大鼠单个心室肌细胞F340/F380,缩短TR_(90),对钙敏感性无显著影响;尼卡地平和KB-R7943分别预处理心室肌细胞可以抵消大部分抗体对F340/F380和TR_(90)的增加或缩短效应,联合使用二者预处理心室肌细胞后,该抗体对钙瞬变不再有显著影响。结论:抗NCX特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体可以增加心室肌细胞钙瞬变峰值,同时缩短细胞钙恢复时程,这种效应主要与其激动L-型Ca^(2+)通道和NCX的作用有关。
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关键词
Na+-Ca2+交换体
抗体
钙瞬变
心室肌细胞
L-型Ca2+通道
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职称材料
抗钠-钙交换体α-2（840-877）单克隆抗体3F10的制备及其预处理对大鼠缺血性心律失常的抑制作用
2
作者
王苗苗
陈依春
+2 位作者
白晓洁
马瑞君
封启龙
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第23期2827-2831,共5页
目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可...
目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可稳定分泌NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过ELISA和SDS-PAGE等方法检测其效价和纯度。结扎冠脉左前降支建立大鼠缺血性心律失常模型。缺血前5 min用3F10(10μg/ml)抗体灌注离体心脏,在体实验经大鼠尾静脉注射3F10(50μg/kg)抗体,观察抗体大鼠室早数目、室速和室颤发生率和持续时间的影响。应用全细胞膜片钳技术观察3F10(10μg/ml)抗体对正常大鼠心肌细胞I Na/Ca的影响。结果:①成功制备并获得抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体3F10,其效价和浓度分别为1∶40960、1.62 mg/ml。②3F10抗体预处理可明显抑制大鼠离体和在体缺血性心律失常的发生。缺血前5 min给予3F10(10μg/ml)抗体预处理后,离体心脏的室速、室颤的发生率分别由100%和77.78%降至25%和25%,其持续时间和室早的个数也明显减少(P<0.05)。在麻醉大鼠,当给予3F10(50μg/kg)抗体预处理后,与模型组相比,大鼠室速和室颤的发生率分别由100%和83.33%降至33.33%和33.33%,其持续时间及室早的数目均明显减少(P<0.05)。③膜片钳实验发现3F10抗体(10μg/ml)对I Na/Ca具有显著抑制作用。在钳制电位为+50 mV和-100 mV时,外向和内向I Na/Ca分别由(3.23±0.05)和(-50.57±0.13)pA/pF降至(2.14±0.03)和(-3.14±0.06)pA/pF(P<0.05)。结论:成功获得一株可稳定分泌抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3F10),该抗体预处理对大鼠缺血性心律失常具有显著抑制作用,推测其作用机制与抑制心肌I Na/Ca有关。
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关键词
缺血性心律失常
钠-钙交换体
单克隆抗体
全细胞膜片钳
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职称材料
题名
抗钠钙交换体特异位点抗体对大鼠单个心室肌细胞钙瞬变的影响
被引量：
2
1
作者
白晓洁
吴博威
机构
山西医科大学生理学系细胞生理学山西省重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第12期1795-1798,共4页
文摘
目的:观察抗钠钙交换体(Sodium calcium exchanger,NCX)特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体对正常成年大鼠心室肌细胞钙瞬变的影响。方法:利用Langendorff灌流方法,分离得到单个大鼠心室肌细胞;负载荧光染料Fura-2/AM和2%牛血清白蛋白后,利用离子影像分析系统记录激发光为340 nm和380 nm时心室肌细胞成对系列图像,计算钙瞬变峰值(F340/F380)、细胞钙恢复90%时程(TR_(90))以及钙敏感性(F340/F380与细胞缩短数值的比值)。结果:抗NCX特异位点抗体可以增加正常成年大鼠单个心室肌细胞F340/F380,缩短TR_(90),对钙敏感性无显著影响;尼卡地平和KB-R7943分别预处理心室肌细胞可以抵消大部分抗体对F340/F380和TR_(90)的增加或缩短效应,联合使用二者预处理心室肌细胞后,该抗体对钙瞬变不再有显著影响。结论:抗NCX特异位点_(124)HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF_(145)抗体可以增加心室肌细胞钙瞬变峰值,同时缩短细胞钙恢复时程,这种效应主要与其激动L-型Ca^(2+)通道和NCX的作用有关。
关键词
Na+-Ca2+交换体
抗体
钙瞬变
心室肌细胞
L-型Ca2+通道
Keywords
Na＋-Ca2＋exchanger
Antibody
Calcium transient
Ventricular myocyte
L-type Ca2＋channel
分类号
R331.3 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
抗钠-钙交换体α-2（840-877）单克隆抗体3F10的制备及其预处理对大鼠缺血性心律失常的抑制作用
2
作者
王苗苗
陈依春
白晓洁
马瑞君
封启龙
机构
山西
医科
大学
生理学
系
西藏民族
大学
医学部
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第23期2827-2831,共5页
基金
山西省归国留学人员基金资助项目(No.2017-055)
山西省重点实验室建设项目(No.2015012003-08)
文摘
目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca 2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响。方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可稳定分泌NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过ELISA和SDS-PAGE等方法检测其效价和纯度。结扎冠脉左前降支建立大鼠缺血性心律失常模型。缺血前5 min用3F10(10μg/ml)抗体灌注离体心脏,在体实验经大鼠尾静脉注射3F10(50μg/kg)抗体,观察抗体大鼠室早数目、室速和室颤发生率和持续时间的影响。应用全细胞膜片钳技术观察3F10(10μg/ml)抗体对正常大鼠心肌细胞I Na/Ca的影响。结果:①成功制备并获得抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体3F10,其效价和浓度分别为1∶40960、1.62 mg/ml。②3F10抗体预处理可明显抑制大鼠离体和在体缺血性心律失常的发生。缺血前5 min给予3F10(10μg/ml)抗体预处理后,离体心脏的室速、室颤的发生率分别由100%和77.78%降至25%和25%,其持续时间和室早的个数也明显减少(P<0.05)。在麻醉大鼠,当给予3F10(50μg/kg)抗体预处理后,与模型组相比,大鼠室速和室颤的发生率分别由100%和83.33%降至33.33%和33.33%,其持续时间及室早的数目均明显减少(P<0.05)。③膜片钳实验发现3F10抗体(10μg/ml)对I Na/Ca具有显著抑制作用。在钳制电位为+50 mV和-100 mV时,外向和内向I Na/Ca分别由(3.23±0.05)和(-50.57±0.13)pA/pF降至(2.14±0.03)和(-3.14±0.06)pA/pF(P<0.05)。结论:成功获得一株可稳定分泌抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3F10),该抗体预处理对大鼠缺血性心律失常具有显著抑制作用,推测其作用机制与抑制心肌I Na/Ca有关。
关键词
缺血性心律失常
钠-钙交换体
单克隆抗体
全细胞膜片钳
Keywords
Ischemic arrhythmia
Sodium-calcium exchanger
Monoclonal antibody
Whole-cell patch clamp technique
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
R331.3 [医药卫生—人体生理学]
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被引量
操作
1
抗钠钙交换体特异位点抗体对大鼠单个心室肌细胞钙瞬变的影响
白晓洁
吴博威
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
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职称材料
2
抗钠-钙交换体α-2（840-877）单克隆抗体3F10的制备及其预处理对大鼠缺血性心律失常的抑制作用
王苗苗
陈依春
白晓洁
马瑞君
封启龙
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
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