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蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质(英文)
被引量：
1
1
作者
张建林
刘志贞
+6 位作者
王晓媛
姚建强
罗佳
王建华
杨利军
杨琦
牛勃
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期519-523,共5页
目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质。方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法...
目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质。方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法。结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%。EDNase的相对分子质量约为63000。Mg2+,Mn2+和Ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而Na+则轻微的提高酶的活性。在pH4.4～5.2的范围内EDNase酶活性稳定,其最适pH值为4.8。该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性。EDNase的等电点为6.20。在以小牛胸腺DNA为底物的条件下,酶的Km为1.52g/L,Vmax为4.89mg/(mL·min)。该酶可有效降解超螺旋质粒DNA,线状λ-噬菌体DNA和细菌染色体DNA,对RNA未见任何降解作用。结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶。
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关键词
脱氧核糖核酸酶类
分离和提纯
寡毛目
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职称材料
PVAX-MAGE-1基因疫苗延缓小鼠肝癌细胞H22腹水瘤和实体瘤的生长
被引量：
1
2
作者
杨晓玲
吕婧
+2 位作者
王建华
张悦红
牛勃
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期472-477,共6页
为观察重组基因疫苗PVAX-MAGE-1的抑瘤效应,构建黑色素瘤抗原-1(melanoma antigen-1,MAGE-1)真核基因表达载体--PVAX-MAGE-1.以重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,ELISA法检测表明,与对照鼠(PVAX-1和生理盐水注射小鼠)比较,免疫小鼠脾淋巴细胞...
为观察重组基因疫苗PVAX-MAGE-1的抑瘤效应,构建黑色素瘤抗原-1(melanoma antigen-1,MAGE-1)真核基因表达载体--PVAX-MAGE-1.以重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,ELISA法检测表明,与对照鼠(PVAX-1和生理盐水注射小鼠)比较,免疫小鼠脾淋巴细胞上清液中的细胞因子IL-2和IFN-γ明显升高(P<0.05);淋巴细胞-肿瘤细胞混合培养证明,免疫小鼠外周血CD8+T细胞对靶细胞的特异性杀伤作用明显增强(P<0.05).体内实验证明,PVAX-MAGE-1免疫C57BL/6小鼠,可显著延缓移植性H22腹水瘤及实体瘤在小鼠体内的生长.实验结果提示,重组基因疫苗PVAX-MAGE-1有明显的延缓肿瘤生长的作用,其抑瘤作用与提高T淋巴细胞IL和IFN表达,增强对肿瘤杀伤作用直接相关.
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关键词
肝细胞癌
黑色素瘤抗原-1
基因疫苗
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职称材料
题名
蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质(英文)
被引量：
1
1
作者
张建林
刘志贞
王晓媛
姚建强
罗佳
王建华
杨利军
杨琦
牛勃
机构
山西医科大学生物化学与分子生物学系
首都儿科研究所
山西
医科
大学
科技处
中国疾病预防与控制中心
出处
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期519-523,共5页
基金
China National Science Foundation(30472251)
Shanxi Youth Science and Technology Research Fundation(20051044)~~
文摘
目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称EDNase)并研究其酶学性质。方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、SDS-PAGE电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法。结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%。EDNase的相对分子质量约为63000。Mg2+,Mn2+和Ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而Na+则轻微的提高酶的活性。在pH4.4～5.2的范围内EDNase酶活性稳定,其最适pH值为4.8。该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性。EDNase的等电点为6.20。在以小牛胸腺DNA为底物的条件下,酶的Km为1.52g/L,Vmax为4.89mg/(mL·min)。该酶可有效降解超螺旋质粒DNA,线状λ-噬菌体DNA和细菌染色体DNA,对RNA未见任何降解作用。结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶。
关键词
脱氧核糖核酸酶类
分离和提纯
寡毛目
Keywords
Deoxyribonucleases
Isolation and purification
Oligochaeta
分类号
R446.62 [医药卫生—诊断学]
R996.3 [医药卫生—毒理学]
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职称材料
题名
PVAX-MAGE-1基因疫苗延缓小鼠肝癌细胞H22腹水瘤和实体瘤的生长
被引量：
1
2
作者
杨晓玲
吕婧
王建华
张悦红
牛勃
机构
山西医科大学生物化学与分子生物学系
北京首都儿科研究所
生物
技术室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期472-477,共6页
文摘
为观察重组基因疫苗PVAX-MAGE-1的抑瘤效应,构建黑色素瘤抗原-1(melanoma antigen-1,MAGE-1)真核基因表达载体--PVAX-MAGE-1.以重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,ELISA法检测表明,与对照鼠(PVAX-1和生理盐水注射小鼠)比较,免疫小鼠脾淋巴细胞上清液中的细胞因子IL-2和IFN-γ明显升高(P<0.05);淋巴细胞-肿瘤细胞混合培养证明,免疫小鼠外周血CD8+T细胞对靶细胞的特异性杀伤作用明显增强(P<0.05).体内实验证明,PVAX-MAGE-1免疫C57BL/6小鼠,可显著延缓移植性H22腹水瘤及实体瘤在小鼠体内的生长.实验结果提示,重组基因疫苗PVAX-MAGE-1有明显的延缓肿瘤生长的作用,其抑瘤作用与提高T淋巴细胞IL和IFN表达,增强对肿瘤杀伤作用直接相关.
关键词
肝细胞癌
黑色素瘤抗原-1
基因疫苗
Keywords
hepatocellular carcinoma
melanoma antigen-1（MAGE-1）
gene vaccine
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R735 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质(英文)
张建林
刘志贞
王晓媛
姚建强
罗佳
王建华
杨利军
杨琦
牛勃
《北京大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
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职称材料
2
PVAX-MAGE-1基因疫苗延缓小鼠肝癌细胞H22腹水瘤和实体瘤的生长
杨晓玲
吕婧
王建华
张悦红
牛勃
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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