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Exendin-4通过拮抗钙超载改善Aβ_(31-35)诱导的HT22海马神经细胞per1基因异常表达 被引量:4
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作者 赵学玲 王丽 +6 位作者 李亚蒙 原媛 于倩倩 徐云云 李杨 曹秀丽 王晓晖 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期739-744,共6页
目的:探讨Exendin-4对Aβ_(31-35)所致的HT22神经细胞per1基因异常表达的影响及可能作用机制。方法:本研究采用海马神经细胞HT22作为实验对象。以1%血清饥饿1 h来诱导细胞同步化(CT0)。MTT实验检测细胞存活率;倒置显微镜下观察细胞形态... 目的:探讨Exendin-4对Aβ_(31-35)所致的HT22神经细胞per1基因异常表达的影响及可能作用机制。方法:本研究采用海马神经细胞HT22作为实验对象。以1%血清饥饿1 h来诱导细胞同步化(CT0)。MTT实验检测细胞存活率;倒置显微镜下观察细胞形态变化;Real-time PCR检测各CT时间per1基因的表达变化;选择per1表达差异最显著的CT时间点,采用流式细胞术检测细胞内钙离子浓度的变化情况。结果:(1)Exendin-4可以明显提高Aβ_(31-35)所致的HT22细胞存活率的下降;(2)镜下观察可见,经Exendin-4预处理后部分改善了Aβ_(31-35)对细胞的损伤作用,细胞形态有所恢复;(3)Aβ_(31-35)使per1基因在CT16时各处理组的相对表达量明显不同;与对照组相比,Aβ_(31-35)使per1基因表达量明显升高;经Exendin-4预处理后,per1基因的表达得到一定程度的恢复,差异具有统计学意义;(4)在CT16时各处理组细胞荧光强度值明显不同,与对照组相比,Aβ_(31-35)使细胞荧光强度明显增强;经Exendin-4预处理后,细胞荧光强度值明显降低,差异具有统计学意义,此结果与加入尼莫地平的结果类似。加入尼莫地平预处理后,检测各个CT时间per1基因表达变化,与Exendin-4预处理组得到的结果类似。结论:Exendin-4通过拮抗钙超载改善Aβ_(31-35)诱导的HT22海马神经细胞per1基因的异常表达。 展开更多
关键词 EXENDIN-4 Aβ31-35 HT22神经细胞 per1基因 钙超载
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低氧预处理通过激活AKT通路提高老年hBM-MSCs对氧化应激损伤的耐受能力 被引量:5
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作者 宋慧芳 郭蕊 张亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期912-916,共5页
目的:探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(h BM-MSCs)的保护作用,为提高老年自体干细胞移植治疗效果提供实验支持。方法:老年h BM-MSCs于低氧培养箱中培养24 h进行低氧预处理,实验分为年轻h BM-MSCs组(young组),老年h BM-MSCs组(ol... 目的:探讨低氧预处理对老年人骨髓间充质干细胞(h BM-MSCs)的保护作用,为提高老年自体干细胞移植治疗效果提供实验支持。方法:老年h BM-MSCs于低氧培养箱中培养24 h进行低氧预处理,实验分为年轻h BM-MSCs组(young组),老年h BM-MSCs组(old组)及低氧预处理老年h BM-MSCs组(old+hypoxia组)。300μmol/L H_2O_2作用30 min建立细胞氧化应激模型,50μmol/L LY294002作用2 h阻断PI3K/AKT信号通路,Brd U掺入实验检测细胞增殖能力;CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平和AKT磷酸化水平。结果:Brd U掺入实验显示低氧预处理的老年h BM-MSCs细胞阳性率为39.85%±3.45%,与old组相比增殖能力显著提高(P<0.05)。300μmol/L H_2O_2作用30 min诱导细胞氧化应激后,old+hypoxia组与old组比较,细胞活力显著提高(P<0.05),凋亡相关蛋白Bax表达量显著降低(P<0.05),抑制凋亡的Bcl-2蛋白表达量显著增高(P<0.05),且AKT磷酸化水平显著增高,差异有统计学显著性(P<0.05);应用LY294002抑制PI3K/AKT信号通路后,细胞活力下降(P<0.05)。结论:低氧预处理可以通过激活AKT信号通路提高老年人骨髓间充质干细胞活力及增殖能力。 展开更多
关键词 低氧 PI3K/AKT信号通路 骨髓间充质干细胞 氧化应激
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醉茄素A通过调节自噬缓解心肌细胞缺血/再灌注(缺氧/复氧)损伤 被引量:3
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作者 郭蕊 宋慧芳 康毅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1361-1366,共6页
目的:探讨醉茄素A(WFA)通过对自噬的调节在心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤中的作用,为寻找有效药物缓解MI/R治疗后引起的心肌损伤提供依据。方法:(1)离体培养大鼠心肌H9C2细胞通过缺氧/复氧处理模拟在体缺血/再灌注(SI/R)模型,Western blot... 目的:探讨醉茄素A(WFA)通过对自噬的调节在心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤中的作用,为寻找有效药物缓解MI/R治疗后引起的心肌损伤提供依据。方法:(1)离体培养大鼠心肌H9C2细胞通过缺氧/复氧处理模拟在体缺血/再灌注(SI/R)模型,Western blot法分别检测对照组、SI/R组、WFA治疗(WFA+SI/R)组和氯喹(CQ)预处理(CQ+WFA+SI/R)组自噬相关蛋白的变化,CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测cleaved caspase-3蛋白水平,试剂盒检测caspase-3活性。C57BL/6小鼠吸入麻醉下,施心脏冠状动脉左前降支结扎术,30 min后打开结扎线恢复血液灌注3或12 h。(2)将小鼠随机分成假手术(sham)组、MI/R组、WFA+MI/R组和CQ+WFA+MI/R组。将再灌注3 h的小鼠分离心脏组织用于TUNEL染色,再灌注12 h的小鼠用于超声成像以检测左心室功能。结果:(1)与SI/R组相比,WFA+SI/R组LC3-II/LC3-I、beclin-1和p62水平显著降低,溶酶体相关膜蛋白2(Lamp-2)表达水平显著升高。与WFA+SI/R组相比,CQ+WFA+SI/R组LC3-II/LC3-I、beclin-1、p62、Lamp-2和cleaved caspase-3水平显著升高,心肌细胞活力显著降低,caspase-3活性显著升高。(2)在体研究显示,与WFA+MI/R组相比,CQ+WFA+MI/R组小鼠左心室功能显著降低,心肌细胞凋亡率显著升高。结论:醉茄素A通过降低过高的自噬水平,维持自噬平衡,从而改善缺血/再灌注损伤后的心功能。 展开更多
关键词 醉茄素A 自噬 缺血/再灌注损伤 心肌梗死 细胞凋亡
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小鼠急性肝损伤对棕色脂肪组织功能的影响及机制研究 被引量:1
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作者 冯妙 卜浩林 +3 位作者 李丽红 郭林芝 苗宇船 郭建红 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期63-69,共7页
目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤小鼠在不同时间点对棕色脂肪组织的影响及相关机制。方法18只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、CCl42周组、CCl44周组,每组6只,CCl4组注射CCl42次,对照组给予同剂量橄榄油。称重棕色脂肪组织... 目的探讨四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤小鼠在不同时间点对棕色脂肪组织的影响及相关机制。方法18只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组、CCl42周组、CCl44周组,每组6只,CCl4组注射CCl42次,对照组给予同剂量橄榄油。称重棕色脂肪组织;HE染色观察肝和棕色脂肪组织的病理变化;免疫组织化学和实时定量PCR检测棕色脂肪组织解偶联蛋白1(UCP1)的表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;Pearson法检验Ucp1 mRNA水平与TNF-α含量间的关系。结果与对照组相比,CCl42周组血清ALT、AST含量增多(P<0.01),棕色脂肪组织重量减少(P<0.05),UCP1蛋白表达减少(P<0.05),Ucp1 mRNA表达减少(P<0.05),血清中TNF-α含量增多(P<0.001);与CCl42周组相比,CCl44周组血清中ALT、AST含量减少(P<0.05),棕色脂肪组织重量增加(P<0.05),Ucp1 mRNA表达增多(P<0.01),血清中TNF-α含量减少(P<0.001);CCl42周组和CCl44周组Ucp1 mRNA水平与TNF-α含量均呈显著负相关(r=-0.950,P<0.01;r=-0.859,P<0.05)。结论急性肝损伤可导致棕色脂肪组织功能下降,机体产热减少,从而影响代谢稳态,机制可能与TNF-α含量升高有关。 展开更多
关键词 棕色脂肪组织 解偶联蛋白1 肝损伤 肿瘤坏死因子-Α
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