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地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系的构建 被引量:2
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作者 寇冰 段志光 +3 位作者 刘田福 宋国华 陈朝阳 张持晨 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第12期74-78,共5页
目的构建地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系,为高校实验动物管理工作的评价提供参考。方法根据研究主题确定咨询专家人选37人,采用Delphi法进行问卷调查和统计分析。结果两轮咨询问卷回收率分别为70.27%和76.92%。权威系数... 目的构建地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系,为高校实验动物管理工作的评价提供参考。方法根据研究主题确定咨询专家人选37人,采用Delphi法进行问卷调查和统计分析。结果两轮咨询问卷回收率分别为70.27%和76.92%。权威系数为0.855;第二轮指标体系的协调系数为0.486。结论本次研究构成的地方医科大学实验动物管理工作水平评价指标体系是可靠的。 展开更多
关键词 医学院校 实验动物 管理 指标体系
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重组人CC16蛋白抑制香烟烟雾提取物诱导的人气道上皮细胞及COPD小鼠肺组织衰老相关分泌表型
2
作者 杜凯艳 李婷 +6 位作者 刘超锋 栗馨洋 张晶煜 郭民 陈朝阳 庞敏 王海龙 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期294-302,共9页
目的:评价重组人CC16蛋白(recombinant human CC16 protein,rhCC16)对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的人气道上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)及慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary d... 目的:评价重组人CC16蛋白(recombinant human CC16 protein,rhCC16)对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的人气道上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)及慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)小鼠肺组织衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype,SASP)的影响,并探讨其机制。方法:5%CSE诱导HBECs衰老,250 ng/mL rhCC16干预衰老的HBECs,2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)染色法分析HBECs内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot检测衰老相关异染色灶(senescence associated heterochromatic foci,SAHF)标志物第9位赖氨酸三甲基化的组蛋白H3(trimethylated histone H3 at lysine 9,H3K9me3)含量;RT-qPCR和ELISA分别检测HBECs中SASP指标[白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、趋化因子(C-X-C基序)配体1[chemokine(C-X-C motif)ligand 1,CXCL-1]、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP1)和MMP3的mRNA和蛋白表达。被动吸烟法制备COPD小鼠,从熏烟16周开始,在熏烟前2 h用2.5μg/g体重rhCC16或等体积PBS对熏烟小鼠进行滴鼻干预制备COPD+rhCC16组或COPD+PBS组,造模及干预(24周)结束后DCFH-DA染色法检测小鼠肺组织细胞中ROS含量,Western blot检测各组小鼠肺组织SAHF标志物H3K9me3含量;RT-qPCR和ELISA分别检测小鼠肺组织及肺组织匀浆液中SASP相关指标(IL-1β、IL-6、IL-8、CXCL-1、MMP1和MMP3)的mRNA和蛋白表达。结果:DCFH-DA染色结果显示CSE刺激可以增加HBECs中ROS含量,rhCC16干预则减少HBECs中ROS含量(P<0.01);Western blot结果显示CSE刺激可以增加HBECs的SAHF,而rhCC16干预则减少SAHF(P<0.01);RT-qPCR和ELISA结果显示CSE刺激可以增加HBECs中IL-1β、IL-6、IL-8、CXCL-1、MMP1和MMP3 mRNA表达及其蛋白含量,rhCC16干预则减少HBECs中上述指标的表达(P<0.05);DCFH-DA染色结果显示COPD小鼠肺组织细胞中ROS含量增加,rhCC16干预则减少其含量(P<0.01);Western blot结果显示COPD小鼠肺组织中SAHF增加,而rhCC16干预则减少SAHF(P<0.01);RT-qPCR和ELISA结果显示COPD小鼠肺组织中IL-1β、IL-6、IL-8、CXCL-1、MMP1和MMP3 mRNA表达及其蛋白含量增加,rhCC16干预则减少上述指标的表达(P<0.05),PBS干预组与COPD组小鼠肺组织上述指标变化差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:rhCC16能有效抑制CSE诱导的HBECs及COPD小鼠肺组织中SASP的产生,其机制可能与ROS-H3K9me3信号通路的抑制有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 重组人CC16蛋白 香烟烟雾提取物 活性氧 第9位赖氨酸三甲基化组蛋白H3 衰老相关分泌表型
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医学院校屏障环境开放性动物实验室管理初探 被引量:9
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作者 樊林花 刘茂林 刘田福 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2011年第4期150-153,共4页
针对高等医学院校屏障环境开放性动物实验室管理的特殊性,在实践经验的基础上,从人员、动物、设施运行和规章制度与操作规程5个方面总结了屏障环境开放性动物实验室管理方面应注意的问题。参照国家有关实验动物标准,结合屏障设施,建立... 针对高等医学院校屏障环境开放性动物实验室管理的特殊性,在实践经验的基础上,从人员、动物、设施运行和规章制度与操作规程5个方面总结了屏障环境开放性动物实验室管理方面应注意的问题。参照国家有关实验动物标准,结合屏障设施,建立了一套行之有效的屏障环境实验室运行管理规范,提高了医学院校屏障环境管理水平。 展开更多
关键词 高等医学院校 屏障环境 开放性动物实验室 管理
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基于Kv7离子通道探讨木犀草素对大鼠胸主动脉血管环的舒张作用
4
作者 王星茹 杨泽熔 +4 位作者 武莉 邓文娟 宋豪瑞 陈朝阳 李卫萍 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第6期84-92,共9页
目的探讨木犀草素(luteolin,Lut)对去除内皮的离体大鼠胸主动脉(denuded-endothelium rat thoracic aorta,DRTA)血管环的舒张作用,以及该作用机制是否与Kv7通道有关。方法用离体组织灌流肌张力检测系统检测DRTA血管环的张力,用60 mmol/L... 目的探讨木犀草素(luteolin,Lut)对去除内皮的离体大鼠胸主动脉(denuded-endothelium rat thoracic aorta,DRTA)血管环的舒张作用,以及该作用机制是否与Kv7通道有关。方法用离体组织灌流肌张力检测系统检测DRTA血管环的张力,用60 mmol/L KCl或0.3μmol/L U46619预收缩DRTA血管环,观察木犀草素在1、3、10、30、100、300μmol/L时对血管环的舒张作用,以及加入4-AP(3 mmol/L)、XE-991(3μmol/L)、ML213(1μmol/L)对木犀草素舒张血管环的影响;用RT-qPCR检测胸主动脉组织中KCNQ1-KCNQ5基因的表达,并观察木犀草素对KCNQ1-KCNQ5基因表达的影响;Western blot检测不同浓度木犀草素对DRTA组织Kv7.1和Kv7.4蛋白表达的影响。结果(1)木犀草素对60 mmol/L KCl和0.3μmol/L U46619预收缩的DRTA血管环的最大舒张百分率分别是(97.67±8.51)%和(98.42±9.76)%,且该舒张作用具有浓度依赖性(P<0.05);(2)4-AP(3 mmol/L)能显著抑制10、30、100μmol/L木犀草素对DRTA血管环的舒张作用(P<0.05);XE-991(3μmol/L)能显著抑制30、100μmol/L木犀草素对DRTA血管环的舒张作用(P<0.05);ML213(1μmol/L)能显著增加木犀草素在3、10、30μmol/L时对DRTA血管环的舒张作用(P<0.05);(3)在正常DRTA组织中,Kv7通道各亚型的基因表达量由高到低依次为:KCNQ1>KCNQ5>KCNQ4>KCNQ3>KCNQ2,其中KCNQ1的表达量最多;(4)木犀草素在3、10、30、100μmol/L时可显著增加KCNQ1的表达(P<0.05);在1、3、10、30、100μmol/L时可显著增加KCNQ2的表达(P<0.05),在3、10、30、100μmol/L时可显著增加KCNQ3的表达(P<0.05),在10、30、100μmol/L时可显著增加KCNQ4的表达(P<0.05),但是木犀草素在1、3、10、30、100μmol/L时对KCNQ5的表达无显著影响(P>0.05);(5)木犀草素在3、10、30、100μmol/L时可显著增加DRTA血管Kv7.1蛋白的表达(P<0.05);木犀草素在10、30、100μmol/L时可显著增加DRTA血管Kv7.4蛋白的表达(P<0.05)。结论木犀草素舒张DRTA血管环可能与其增强KCNQ1-4的mRNA水平及增加Kv7.1和Kv7.4通道蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 木犀草素 大鼠胸主动脉 舒张 Kv7离子通道
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生物医学研究中的实验动物福利问题 被引量:41
5
作者 张建红 刘田福 +3 位作者 武冬梅 王锐利 王海龙 陈朝阳 《中国实验动物学杂志》 2001年第1期62-64,共3页
动物福利问题形式多样 ,涉及科学进步和社会发展的多个层次。在生物医学研究过程中 ,每位科学家都应正确看待这些问题 ,增进对问题多样性的了解 ,倡导人道的使用和管理实验动物 ,并采取积极有效措施 ,遵循有关的规章制度和操作要求扩大... 动物福利问题形式多样 ,涉及科学进步和社会发展的多个层次。在生物医学研究过程中 ,每位科学家都应正确看待这些问题 ,增进对问题多样性的了解 ,倡导人道的使用和管理实验动物 ,并采取积极有效措施 ,遵循有关的规章制度和操作要求扩大动物福利 ,推进我国实验动物标准化进程和生物医学事业的发展。 展开更多
关键词 动物福利问题 扩大 形式多样 推进 发展 中国 生物医学研究 实验动物 有效措施 规章制度
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微卫星标记及其在实验动物中的应用 被引量:20
6
作者 宋国华 刘田福 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第4期244-248,共5页
微卫星序列广泛存在于各类真核基因组中,是一种简单序列重复(simplesequencerepeats,SSR)。由于它具有多态性高、结果稳定可靠等特点,因此是一种十分理想的分子标记,在遗传图谱构建、数量性状位点(QTL)定位、标记辅助选择、遗传多样性... 微卫星序列广泛存在于各类真核基因组中,是一种简单序列重复(simplesequencerepeats,SSR)。由于它具有多态性高、结果稳定可靠等特点,因此是一种十分理想的分子标记,在遗传图谱构建、数量性状位点(QTL)定位、标记辅助选择、遗传多样性评估、遗传监测等领域都有着重要的应用价值。 展开更多
关键词 微卫星重复 动物 实验
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GDF-15通过激活NO-cGMP-PKG信号通路促进大鼠急性心肌梗死侧枝循环改善心功能的研究
7
作者 尚小森 杨依纯 +4 位作者 侯佳楠 樊林花 陈小平 卫兵艳 陈朝阳 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第5期60-70,共11页
目的探讨生长分化因子-15(GDF-15)通过激活一氧化氮(NO)-环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠侧枝循环及心功能的影响。方法通过结扎冠状动脉左前降支,构建AMI大鼠模型,造模成功后,随机分成假手术组、模型... 目的探讨生长分化因子-15(GDF-15)通过激活一氧化氮(NO)-环磷酸鸟苷(cGMP)-蛋白激酶G(PKG)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠侧枝循环及心功能的影响。方法通过结扎冠状动脉左前降支,构建AMI大鼠模型,造模成功后,随机分成假手术组、模型组、GDF-15组,每组12只,GDF-15组腹腔注射GDF-15重组蛋白,其余2组注射等量生理盐水,每周2次,连续8周。超声心动图检测大鼠心功能;HE染色观察大鼠心肌组织病理损伤;CD31免疫组化染色观察大鼠侧枝循环的情况;qPCR检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达;取模型组和GDF-15组大鼠心脏组织进行转录组学测序,筛选差异表达基因(DEGs),通过京都基因和基因组百科全书(KEGG)对差异表达基因进行通路富集分析。试剂盒检测NO、活性氧(ROS)、cGMP表达水平;Western blot检测VEGF、eNOS单体、p-eNOSser1177单体、eNOS二聚体及PKG蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组左室收缩末期内径(LVEDs)、左室舒张末期内径(LVEDd)增加(P<0.001),左室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS)降低(P<0.001),心肌细胞坏死严重,梗死区血管密度降低(P<0.05),但VEGF mRNA和蛋白水平没有变化(P>0.05),NO、eNOS二聚体、cGMP水平及PKG蛋白表达水平降低(P<0.05),ROS、eNOS单体及p-eNOSser1177单体的表达水平增高(P<0.05);与模型组相比,GDF-15组LVEDs、LVEDd降低(P<0.05),LVEF、FS升高(P<0.01),心肌细胞坏死得到缓解,梗死区血管密度明显增加(P<0.0001),VEGF mRNA水平增高(P<0.0001),转录组学测序结果显示,共鉴定到324个DEGs,其中230个上调,94个下调。KEGG富集分析T20通路中cGMP-PKG信号通路差异最显著。VEGF、NO、eNOS二聚体、cGMP水平及PKG蛋白水平增高(P<0.05),ROS、eNOS单体及p-eNOSser1177单体的表达水平降低(P<0.05)。结论GDF-15可通过抑制eNOS解偶联并激活NO-cGMP-PKG通路,促进缺血心肌侧枝循环、改善心功能。 展开更多
关键词 生长分化因子-15 急性心肌梗死 侧枝循环 NO-cGMP-PKG信号通路
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miR-181a-5p过表达慢病毒载体构建及其对OSCC细胞侵袭和迁移的影响
8
作者 薛瑞 续国强 +3 位作者 杨钧婷 杨一言 吴学海 宋国华 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第2期193-199,共7页
目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株... 目的:构建过表达miR-181a-5p的口腔鳞状细胞癌(OSCC)稳转细胞株,观察miR-181a-5p对OSCC细胞生物学行为的影响并探讨其潜在机制。方法:构建miR-181a-5p和对照慢病毒载体,分别转染CAL-27细胞,嘌呤霉素筛选获得稳定转染miR-181a-5p的细胞株(OE)和对照细胞株(NC);运用激光共聚焦显微镜观察稳转细胞株荧光;qRT-PCR检测稳转株中miR-181a-5p和Bcl-2的表达、Western blot检测靶蛋白Bcl-2的表达;运用细胞划痕、Transwell实验和克隆形成实验检测稳转株的侵袭、迁移和增殖能力;使用qRT-PCR检测细胞侵袭和迁移关键因子的表达。结果:OE细胞中miR-181a-5p的表达量显著高于NC和未转染的空白对照组(Control)(P<0.01),OE组中Bcl-2的表达显著降低;同时,OE细胞的侵袭、迁移和增殖能力降低。此外,OE细胞中MMP2、MMP9、Vimentin和Ki67表达水平降低,而E-cadherin升高(P<0.01)。结论:miR-181a-5p过表达可显著抑制口腔癌的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 miR-181a-5p 稳转细胞株 口腔癌 侵袭 迁移
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高等医学院校实验动物福利伦理审查实践思考 被引量:11
9
作者 郭永昌 王春芳 +1 位作者 陈朝阳 燕娟 《医学与哲学》 北大核心 2021年第16期18-21,共4页
动物实验是医学人才培养的重要手段、医学科学研究的基本途径,加强实验动物福利伦理审查既是保护实验动物福利的有效措施,又关系到动物实验结果的科学性。结合山西医科大学实验动物福利伦理审查实践,梳理高等医学院校实验动物福利伦理... 动物实验是医学人才培养的重要手段、医学科学研究的基本途径,加强实验动物福利伦理审查既是保护实验动物福利的有效措施,又关系到动物实验结果的科学性。结合山西医科大学实验动物福利伦理审查实践,梳理高等医学院校实验动物福利伦理审查存在的问题,如审查的被动性和滞后性、研究者认知的模糊性,提出保障实验动物福利伦理审查全覆盖、注重实验动物福利伦理跟踪审查、提供实验动物福利伦理咨询服务、完善实验动物从业人员资质管理体系的建议。 展开更多
关键词 实验动物 动物福利 伦理审查
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Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响 被引量:1
10
作者 刘茂林 王晓堂 +3 位作者 宋晓娜 马云辉 常潇琪 宋国华 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期1-9,共9页
目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分... 目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。 展开更多
关键词 TCA8113细胞 口腔癌 GLI2 细胞迁移 细胞侵袭 HEDGEHOG通路 上皮间充质转化
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结合系统药理学与代谢组学探究黄芩素治疗高尿酸血症的作用机制
11
作者 梁景珍 高映杰 +3 位作者 叶文倩 卫兵艳 陈朝阳 杨帆 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期1-11,共11页
目的探究黄芩素治疗高尿酸血症的作用及机制。方法采用酵母膏联合氧嗪酸钾的方法构建高尿酸血症小鼠模型。通过生化指标、病理改变、非靶代谢组学及网络药理学技术深入研究黄芩素治疗高尿酸血症的作用及潜在机制。结果黄芩素能降低血清... 目的探究黄芩素治疗高尿酸血症的作用及机制。方法采用酵母膏联合氧嗪酸钾的方法构建高尿酸血症小鼠模型。通过生化指标、病理改变、非靶代谢组学及网络药理学技术深入研究黄芩素治疗高尿酸血症的作用及潜在机制。结果黄芩素能降低血清尿酸、肌酐和尿素氮的含量,减轻肾组织炎性损伤,上调尿酸排泄蛋白表达水平,下调尿酸重吸收蛋白表达水平。网络药理学筛选出BCL2、SIRT1和XDH等9个药物疾病相关靶点。代谢组学分析筛选出烟酸和烟酰胺代谢、咖啡因代谢和嘌呤代谢等6条关键代谢通路。结论黄芩素可治疗高尿酸血症,减轻肾损伤,其作用机制可能与SIRT1和喹啉酸共调控的烟酸和烟酰胺代谢等途径有关。 展开更多
关键词 黄芩素 高尿酸血症 网络药理学 代谢组学 分子对接
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过表达miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在银屑病动物模型中的作用 被引量:1
12
作者 景志杰 付明阳 王春芳 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1394-1401,共8页
目的:研究内在过表达miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型发生发展中的作用。方法:从文献及PubMed收集与银屑病相关基因,使用Target Scan Human数据库预测miR-31靶基因。使用咪喹莫特乳膏对野生型FVB小鼠和miR... 目的:研究内在过表达miR-31及其下游靶基因Sfn、SuFu在咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型发生发展中的作用。方法:从文献及PubMed收集与银屑病相关基因,使用Target Scan Human数据库预测miR-31靶基因。使用咪喹莫特乳膏对野生型FVB小鼠和miR-31转基因小鼠进行银屑病造模,每日采集造模小鼠背部变化图像,随后使用PASI评分评价小鼠银屑病样情况。HE染色观察组织形态学变化。取0 d、3 d、7 d模型小鼠的背部皮肤,随后进行RT-PCR检测miR-31及其下游靶基因mRNAs的表达,筛选出2个miR-31靶基因,并对筛选靶基因进行免疫荧光及Western blot检测分析。结果:Target Scan Human数据库预测出8个miR-31下游靶基因,经荧光定量PCR筛选出2个与银屑病相关靶基因Sfn、SuFu。咪喹莫特诱导小鼠产生银屑病样症状,表现为背部出现红斑、银白鳞屑,表皮增厚等,实验结果显示miR-31实验组较野生型FVB实验组银屑病样症状轻,HE染色切片同样证实此情况。RT-PCR检测3 d、7 d时miR-31,Sfn和SuFu的表达,结果显示野生型FVB小鼠miR-31的表达均升高,而miR-31转基因小鼠miR-31的表达却降低,其靶基因Sfn、SuFu均出现相反情况,免疫荧光及western blot结果均与PCR结果一致。结论:在银屑病动物模型中,内在过表达miR-31的皮肤,其银屑病样症状较弱,它可能联合机体内与银屑病相关的器官通过内在过表达miR-31的调控作用而减弱银屑病严重程度。Sfn、SuFu作为miR-31下游靶基因,可能在银屑病的发病过程中起抑制作用。 展开更多
关键词 微小RNA-31 银屑病 丝氨酸/苏氨酸激酶Fused抑制物 分层蛋白
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基因编辑技术在免疫缺陷动物模型研究中的应用进展 被引量:1
13
作者 马云辉 王晓堂 +1 位作者 高继萍 宋国华 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期134-143,共10页
免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领... 免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领域的发展。基因编辑技术主要包括HEs、ZFNs、TALENs与CRISPR/Cas9系统。目前,研究者已利用该技术建立了多种类型的免疫缺陷动物模型,各有其优势和局限性。近年来,大量研究证实人源化免疫缺陷动物模型能够精准模拟癌细胞、药物以及免疫系统在人体内的作用,可以更好地模拟人类疾病,广泛用于研究人类免疫生物学及人类复杂疾病的潜在机制。本文对利用基因编辑技术构建免疫缺陷动物模型的研究应用进展进行综述,对基因编辑技术在免疫缺陷动物模型制备中存在的问题及优化策略深入探讨,并对其未来发展前景进行了展望,以期为研究者选用和建立免疫缺陷动物模型提供参考。 展开更多
关键词 免疫缺陷动物模型 基因编辑技术 锌指核酸酶 转录激活因子样效应核酸酶 CRISPR/Cas9
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近交系自发性2型糖尿病中国地鼠山医群体血液生理生化指标的检测分析
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作者 杨钰婷 杨依纯 +3 位作者 卫兵艳 武剑琴 张瑞虎 陈朝阳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第9期19-23,共5页
目的对课题组前期建立的近交系自发性2型糖尿病(T2DM)中国地鼠山医群体的血液生理生化指标进行检测并分析。方法选取12月龄近交系自发性T2DM中国地鼠山医群体及正常地鼠各10只,进行空腹采血,应用Sysmex XT自动血液分析仪及Hitachi全自... 目的对课题组前期建立的近交系自发性2型糖尿病(T2DM)中国地鼠山医群体的血液生理生化指标进行检测并分析。方法选取12月龄近交系自发性T2DM中国地鼠山医群体及正常地鼠各10只,进行空腹采血,应用Sysmex XT自动血液分析仪及Hitachi全自动生化仪对血液15项生理指标及16项生化指标进行测定并进行统计分析。结果与对照组相比,糖尿病组白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(HGB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)等指标差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对课题组前期建立的近交系中国地鼠自发性T2DM模型进行血液生理生化指标检测分析,其变化符合人类T2DM发病的趋势,为该模型的应用及发展提供了基础数据。 展开更多
关键词 中国地鼠 2型糖尿病 生理指标 生化指标
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过表达miR-181a-5p的口腔癌皮下移植瘤小鼠模型的小肠代谢组学研究
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作者 吴学海 杨一言 +4 位作者 王晓堂 陈文璐 宋晓娜 王恬 宋国华 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期8-17,共10页
目的通过检测口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢通路的变化,分析过表达miR-181a-5p对皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢物组的影响。方法实验分为3组,空白对照(Control)组、阴性对照(negative control,NC)组以及实验(over express... 目的通过检测口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢通路的变化,分析过表达miR-181a-5p对皮下移植瘤小鼠小肠中代谢物和代谢物组的影响。方法实验分为3组,空白对照(Control)组、阴性对照(negative control,NC)组以及实验(over expression of miR-181a-5p,OE)组。将不同组别处理后的细胞混悬液,通过皮下注射到M-NSG重度免疫缺陷雌性小鼠右侧腹股沟中上部,构建成口腔癌皮下移植瘤小鼠模型。按时记录小鼠体重变化,对小鼠小肠组织进行HE染色,观察各组病理变化。采用超高效液相色谱-串联飞行时间质谱联用仪和串联Orbitrap质谱联用仪检测NC组、OE组和Control组小鼠小肠中的代谢物,使用XCMS预分析原始数据,质量评价样本数据,鉴定Control组与NC组、NC组与OE组的差异代谢物,进行KEGG富集分析获取差异代谢通路。结果Control组和NC组小肠组织中共鉴定出170种差异代谢物。代谢物富集的显著性信号通路包括胆碱代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、γ-氨基丁酸(GABA)神经突触代谢、甘油磷脂代谢、环磷酸腺苷(cAMP)信号通路代谢、癌症中心碳代谢以及烟酸和烟碱胺代谢通路。NC组和OE组相比,小鼠小肠中检测到VIP(variable importance in the projection)>2的差异代谢物有16种,显著性差异代谢物包括甘油磷酰胆碱、棕榈酸、3-羟基丁酰肉碱、β-羟丁酸等。代谢物富集到的显著性差异通路为胆碱代谢通路。结论口腔癌皮下移植瘤可引起小鼠小肠的代谢物发生变化,主要改变了小肠中与能量代谢相关的代谢物。过表达miR-181a-5p影响口腔癌皮下移植瘤小鼠小肠代谢物,代谢物富集通路为胆碱代谢通路。 展开更多
关键词 口腔癌 皮下移植瘤 小肠 代谢组学 miR-181a-5p
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中国地鼠口腔颊囊鳞癌组织的非靶代谢组学分析
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作者 张锐虎 王渊 +4 位作者 续国强 高继萍 宋国华 陈朝阳 轩瑞晶 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期608-613,共6页
目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病的代谢基础及相关分子机制。方法:将20只中国地鼠分为模型组和对照组(n=10),采用化学诱导法建立颊囊黏膜鳞癌模型;色谱-质谱联用鉴定2组鼠颊囊的代谢物,以正交偏最小二乘判别分析模型的变量权重值>... 目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病的代谢基础及相关分子机制。方法:将20只中国地鼠分为模型组和对照组(n=10),采用化学诱导法建立颊囊黏膜鳞癌模型;色谱-质谱联用鉴定2组鼠颊囊的代谢物,以正交偏最小二乘判别分析模型的变量权重值>1和P<0.05为标准,筛选两组样本中的差异代谢物,进行KEGG通路富集分析。结果:二甲基苯并蒽-石蜡油溶液涂抹18周,模型组地鼠颊囊有弥漫性白斑分布、乳头状突起明显,病理学诊断为高分化鳞癌;脂类和类脂质分子是癌变组织和正常组织的主要差异代谢物;不饱和脂肪酸生物合成重编程、胆固醇积累、色氨酸分解代谢增强、天冬氨酸上调、嘧啶和嘌呤合成增加等是OSCC发生发展中的重要代谢特征。结论:靶向相关代谢途径的分子干预,有望抑制OSCC发病和进展。 展开更多
关键词 中国地鼠 口腔颊囊鳞癌 组织非靶代谢组
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补骨脂素对类风湿性关节炎小鼠模型的免疫调节作用 被引量:27
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作者 张引红 李美宁 +3 位作者 王春芳 郭民 张锐虎 陈朝阳 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期207-210,共4页
目的探讨补骨脂素对II型胶原诱导的小鼠类风湿性关节炎的作用并初步探讨其作用的分子机制。方法选用DBA/1J小鼠,利用牛II型胶原诱导构建类风湿性关节炎小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为补骨脂素(PSO)、甲氨蝶呤(MTX)和模型对照(vehic... 目的探讨补骨脂素对II型胶原诱导的小鼠类风湿性关节炎的作用并初步探讨其作用的分子机制。方法选用DBA/1J小鼠,利用牛II型胶原诱导构建类风湿性关节炎小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为补骨脂素(PSO)、甲氨蝶呤(MTX)和模型对照(vehicle)三组,灌胃给药,观察关节改变情况并评分。称重并计算脾指数;流式细胞术测定脾淋巴细胞中Th1、Th2细胞数;ELISA检测血清相关炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量变化。结果与vehicle组相比,PSO组足踝肿胀、活动受限程度明显减轻;PSO组脾指数显著低于模型对照组,Th1淋巴细胞所占比例亦较Vehicle组显著下降,Th2淋巴细胞比例差异无显著性;ELISA结果显示PSO组血清TNF-α、IL-6和IL-1β显著低于Vehicle组。各项结果 PSO组与MTX组无统计学差别。结论补骨脂素通过调节Th1/Th2细胞平衡及抑制TNF-α、IL-6和IL-1β起到免疫调节作用,从而缓解RA进程。 展开更多
关键词 补骨脂素 类风湿性关节炎小鼠模型 炎症因子 TH1/TH2 免疫调节
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五味子乙素对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮水平和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达动态变化的影响 被引量:9
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作者 樊林花 刘田福 +1 位作者 郭民 刘茂林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期225-228,共4页
目的观察五味子乙素(Sch-B)对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮(NO)水平和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态变化的影响。方法将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B组,每组32只,气管暴露法建立大鼠矽肺模型,造模后d 1开始灌胃给予Sch-B治... 目的观察五味子乙素(Sch-B)对染矽尘大鼠肺组织一氧化氮(NO)水平和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态变化的影响。方法将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、Sch-B组,每组32只,气管暴露法建立大鼠矽肺模型,造模后d 1开始灌胃给予Sch-B治疗,药物治疗3 d、7 d、14 d和28 d后,HE染色检测肺组织病理改变;硝酸还原酶法测肺组织NO含量;RT-PCR检测肺组织iNOS mRNA的表达。结果 HE染色显示Sch-B组大鼠肺损伤较染矽尘组明显减轻。NO含量和iNOS mRNA表达在染尘后各个时间点均较相应的对照组明显升高(P<0.01),其中NO含量在d 7时达到高峰后开始下降,iNOS mRNA的峰值出现在d 14。五味子组与染矽尘组相比,各时间点NO含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),而iNOS mRNA表达仅在d 3和d 7时降低明显(P<0.05)。结论染矽尘大鼠肺组织存在着NO含量和iNOS mRNA的动态变化。Sch-B能减轻染矽尘大鼠肺组织的纤维化程度,其机制可能与染尘初期Sch-B降低iNOS mRNA转录水平,抑制NO炎症介质的合成与释放有关。 展开更多
关键词 五味子乙素 二氧化硅 肺纤维化 一氧化氮 诱导型一氧化氮合酶 大鼠
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FUT1基因多态性及其与产仔性状的关联性研究 被引量:24
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作者 张引红 周忠孝 曹果清 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期52-56,共5页
采用PCR-RFLP技术6个中外品种共245头猪的FUT1基因进行了研究,结果表明,Hin6Ⅰ位点上,大白猪、长白猪和杜洛克猪3个外来猪种均存在多态,且以敏感型(GG型和AG型)居多;山西黑猪、太原花猪和马身猪3个本地猪种的所有检测样品都表现为GG型... 采用PCR-RFLP技术6个中外品种共245头猪的FUT1基因进行了研究,结果表明,Hin6Ⅰ位点上,大白猪、长白猪和杜洛克猪3个外来猪种均存在多态,且以敏感型(GG型和AG型)居多;山西黑猪、太原花猪和马身猪3个本地猪种的所有检测样品都表现为GG型。用方差分析方法分析FUT1基因型、品种和胎次与产仔性状之间的关系,基因型和品种对猪的总产仔数的影响显著,胎次对总产仔数影响不显著。而基因型、品种和胎次对产活仔数影响均不显著。 展开更多
关键词 FUT1基因 PCR-RFLP 产仔性状
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N-乙酰半胱氨酸对COPD大鼠Clara细胞及CC16的影响 被引量:17
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作者 庞敏 王海龙 +5 位作者 许建英 王春芳 赵俊萍 辛海峰 刘飞君 马韬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期20-23,共4页
目的:观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型Clara细胞数量及其分泌蛋白CC16表达的影响。方法:单纯熏香烟法建立Wistar大鼠COPD模型。将大鼠随机分为对照组、COPD组和NAC干预组,每组10只。应用透射电镜... 目的:观察抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)干预对大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型Clara细胞数量及其分泌蛋白CC16表达的影响。方法:单纯熏香烟法建立Wistar大鼠COPD模型。将大鼠随机分为对照组、COPD组和NAC干预组,每组10只。应用透射电镜观察COPD大鼠肺组织Clara细胞超微结构的变化。免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织Clara细胞数量。酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中CC16含量。RT-PCR法检测肺组织中CC16mRNA的含量。结果:COPD组大鼠终末细支气管上皮Clara细胞占上皮细胞的百分比明显低于对照组(P<0.01);NAC干预组明显高于COPD组(P<0.01)。COPD组大鼠BALF和血清中CC16蛋白水平明显低于对照组(P<0.01);NAC干预组明显高于COPD组(P<0.05)。COPD组大鼠肺组织中CC16mRNA的含量明显低于对照组和NAC干预组(均P<0.01)。结论:COPD大鼠的气道炎症可导致Clara细胞数量及CC16的合成及分泌量减少,抗氧化剂NAC可通过促进CC16的合成和分泌抑制气道炎症反应。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 CLARA细胞 蛋白质CC16 N-乙酰半胱氨酸
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