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刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析
被引量：
14
1
作者
刘转转
王海龙
+3 位作者
殷国荣
马广源
张建中
凡振伟
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期334-337,共4页
目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PC...
目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结论RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。
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关键词
刚地弓形虫
PEROXIREDOXIN
克隆
原核表达
免疫原性
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职称材料
题名
刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析
被引量：
14
1
作者
刘转转
王海龙
殷国荣
马广源
张建中
凡振伟
机构
山西医科大学医学寄生虫学研究所、寄生虫学教研室
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
山西
医科
大学
第一临床
医学
院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期334-337,共4页
基金
国家自然科学基金(No.30640057)资助
文摘
目的对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。方法收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。结果从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明,目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。结论RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。
关键词
刚地弓形虫
PEROXIREDOXIN
克隆
原核表达
免疫原性
Keywords
Toxoplasma gondii
peroxiredoxin
cloning
prokaryotic expression
immunogenicity
分类号
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
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作者
出处
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1
刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析
刘转转
王海龙
殷国荣
马广源
张建中
凡振伟
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
14
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