期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
人乳头瘤病毒16型纳米抗体的筛选及鉴定
被引量：
1
1
作者
王若瑜
白崇智
+3 位作者
仲启明
范瑞文
牛林茹
韩鹏程
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CSCD
北大核心
2024年第12期1211-1217,共7页
目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白纳米抗体初级文库,通过筛选鉴定获得一株HPV16 L1特异性纳米抗体。方法:以HPV 16 L1蛋白为抗原对羊驼进行免疫,采用噬菌体展示技术构建初级抗体文库。经3轮淘选,采用ELISA法鉴定阳性克隆,将阳性...
目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白纳米抗体初级文库,通过筛选鉴定获得一株HPV16 L1特异性纳米抗体。方法:以HPV 16 L1蛋白为抗原对羊驼进行免疫,采用噬菌体展示技术构建初级抗体文库。经3轮淘选,采用ELISA法鉴定阳性克隆,将阳性反应最强克隆的VHH序列进行真核表达。经亲和纯化、凝胶过滤层析纯化、SDS-PAGE和WB法鉴定,获得目的纳米抗体;采用表面等离子共振(SPR)技术检测纳米抗体与HPV 16 L1蛋白之间的亲和力,CCK-8法检测纳米抗体对人永生化角质细胞HaCat的毒性,荧光素酶报告基因实验检测纳米抗体对HPV 16假病毒的中和活性。结果:初级文库库容为1.304×10^(10),丰度为6.5×10^(9)个/mL,ELISA法鉴定获得36个阳性克隆。表达、纯化获得蛋白单体与二聚体,经鉴定为目的纳米抗体(命名为Nb)。Nb与HPV 16 L1蛋白结合的亲和力为35.41 nmol/L。Nb实验组HaCat细胞增殖活力与空白组没有显著差异(P>0.05)。与阴性组比较,0.1和1μmol/L Nb均能抑制假病毒感染293FT细胞(均P<0.01)。结论:成功获得一株纯度较好、亲和力较高,对上皮细胞没有明显毒性作用、有效抑制HPV 16假病毒感染293FT细胞的纳米抗体Nb,为防治HPV 16感染提供了有效的候选抗体类药物。
展开更多
关键词
人乳头瘤病毒16型
噬菌体展示技术
纳米抗体
亲和力
在线阅读
下载PDF
职称材料
黑色素瘤细胞单域抗体文库的构建及鉴定
被引量：
1
2
作者
姬凯元
齐淑慧
+3 位作者
刘博
蒋书东
范瑞文
董常生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第11期1294-1302,共9页
黑色素瘤作为一种多发于皮肤部位的恶性肿瘤,严重危害着动物和人们的健康。与传统抗体比较,单域抗体具有结构简单、分子量小、免疫原性弱等特点,使其在疾病的诊断及治疗方面具有广阔的应用空间。本研究以B16-F10细胞蛋白质为研究对象,...
黑色素瘤作为一种多发于皮肤部位的恶性肿瘤,严重危害着动物和人们的健康。与传统抗体比较,单域抗体具有结构简单、分子量小、免疫原性弱等特点,使其在疾病的诊断及治疗方面具有广阔的应用空间。本研究以B16-F10细胞蛋白质为研究对象,通过反复冻融与超声破碎相结合的方式获得B16-F10蛋白质作为抗原,免疫成年雄性羊驼。采用噬菌体单域抗体展示技术,构建了质量优良的B16-F10细胞蛋白质单域抗体免疫文库,其库容为5.76×1010,VHH重组率为96%,文库丰度为3.00×1010个/mL。该结果为研究黑色素瘤的生物学特性提供了新思路,同时也为后续筛选B16-F10单域抗体奠定了基础。
展开更多
关键词
黑色素瘤
细胞蛋白质B16-F10
羊驼
单域抗体
CDNA文库
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
人乳头瘤病毒16型纳米抗体的筛选及鉴定
被引量：
1
1
作者
王若瑜
白崇智
仲启明
范瑞文
牛林茹
韩鹏程
机构
山西
省中医药研究院中心
实验室
山西农业大学羊驼生物工程实验室
君研
生物
科技(
山西
)有限公司
东南
大学
附属中大医院医学院
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CSCD
北大核心
2024年第12期1211-1217,共7页
基金
山西省科学技术厅重点研发计划项目(No.202202130501015)
山西省科学技术厅基础研究计划项目(No.202303021212353)
+1 种基金
山西省中医药管理局科研课题(No.2023ZYYA2002)
山西省卫生健康委员会科研课题(No.2022107)。
文摘
目的:构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白纳米抗体初级文库,通过筛选鉴定获得一株HPV16 L1特异性纳米抗体。方法:以HPV 16 L1蛋白为抗原对羊驼进行免疫,采用噬菌体展示技术构建初级抗体文库。经3轮淘选,采用ELISA法鉴定阳性克隆,将阳性反应最强克隆的VHH序列进行真核表达。经亲和纯化、凝胶过滤层析纯化、SDS-PAGE和WB法鉴定,获得目的纳米抗体;采用表面等离子共振(SPR)技术检测纳米抗体与HPV 16 L1蛋白之间的亲和力,CCK-8法检测纳米抗体对人永生化角质细胞HaCat的毒性,荧光素酶报告基因实验检测纳米抗体对HPV 16假病毒的中和活性。结果:初级文库库容为1.304×10^(10),丰度为6.5×10^(9)个/mL,ELISA法鉴定获得36个阳性克隆。表达、纯化获得蛋白单体与二聚体,经鉴定为目的纳米抗体(命名为Nb)。Nb与HPV 16 L1蛋白结合的亲和力为35.41 nmol/L。Nb实验组HaCat细胞增殖活力与空白组没有显著差异(P>0.05)。与阴性组比较,0.1和1μmol/L Nb均能抑制假病毒感染293FT细胞(均P<0.01)。结论:成功获得一株纯度较好、亲和力较高,对上皮细胞没有明显毒性作用、有效抑制HPV 16假病毒感染293FT细胞的纳米抗体Nb,为防治HPV 16感染提供了有效的候选抗体类药物。
关键词
人乳头瘤病毒16型
噬菌体展示技术
纳米抗体
亲和力
Keywords
human papillomavirus 16(HPV16)
phage display technology
nanobody
affinity
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
黑色素瘤细胞单域抗体文库的构建及鉴定
被引量：
1
2
作者
姬凯元
齐淑慧
刘博
蒋书东
范瑞文
董常生
机构
山西农业大学羊驼生物工程实验室
安徽
农业
大学
畜禽遗传资源保护与
生物
育种安徽省重点
实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第11期1294-1302,共9页
基金
山西省青年三晋学者和2018年安徽农业大学校青年基金(No.03087060)资助~~
文摘
黑色素瘤作为一种多发于皮肤部位的恶性肿瘤,严重危害着动物和人们的健康。与传统抗体比较,单域抗体具有结构简单、分子量小、免疫原性弱等特点,使其在疾病的诊断及治疗方面具有广阔的应用空间。本研究以B16-F10细胞蛋白质为研究对象,通过反复冻融与超声破碎相结合的方式获得B16-F10蛋白质作为抗原,免疫成年雄性羊驼。采用噬菌体单域抗体展示技术,构建了质量优良的B16-F10细胞蛋白质单域抗体免疫文库,其库容为5.76×1010,VHH重组率为96%,文库丰度为3.00×1010个/mL。该结果为研究黑色素瘤的生物学特性提供了新思路,同时也为后续筛选B16-F10单域抗体奠定了基础。
关键词
黑色素瘤
细胞蛋白质B16-F10
羊驼
单域抗体
CDNA文库
Keywords
melanoma
cell protein B16-F10
alpaca
single domain antibody
cDNA library
分类号
S852 [农业科学—基础兽医学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人乳头瘤病毒16型纳米抗体的筛选及鉴定
王若瑜
白崇智
仲启明
范瑞文
牛林茹
韩鹏程
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CSCD
北大核心
2024
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
黑色素瘤细胞单域抗体文库的构建及鉴定
姬凯元
齐淑慧
刘博
蒋书东
范瑞文
董常生
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
