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糜子高频胚胎发生品种遗传转化体系的建立
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作者 张欢欢 穆晓娅 +5 位作者 周静宜 吕高培 肖楠 李敏 郝曜山 吴慎杰 《生物技术通报》 北大核心 2025年第10期164-174,共11页
【目的】以具有高频胚胎发生能力的糜子品种为受体,建立高效的糜子遗传转化体系,为糜子分子育种和基因功能研究提供技术支撑。【方法】以最适合糜子诱导胚性愈伤组织的SI培养基,从39份糜子品种中筛选具有高频胚胎发生能力的材料,比较成... 【目的】以具有高频胚胎发生能力的糜子品种为受体,建立高效的糜子遗传转化体系,为糜子分子育种和基因功能研究提供技术支撑。【方法】以最适合糜子诱导胚性愈伤组织的SI培养基,从39份糜子品种中筛选具有高频胚胎发生能力的材料,比较成熟胚的茎尖、中胚轴、根的诱导胚性愈伤组织的能力差异;以最优材料为受体,分析比较不同菌株、愈伤处理方式、乙酰丁香酮(AS)浓度、菌液浓度、共培养时间等条件对农杆菌侵染效率的影响,构建基于nptII选择标记的遗传转化体系。【结果】筛选出适合糜子诱导胚性愈伤组织的SI培养基,并从39份糜子品种中,鉴定出3份高频胚胎发生品种(系),其中赤黍2号胚性愈伤组织诱导率最高(77.7%)。以赤黍2号成熟胚诱导的胚性愈伤组织为受体,优化了农杆菌侵染条件,明确了LBA4404菌株、OD600为0.2的菌液浓度、100μmol/L的乙酰丁香酮浓度、42℃热激处理5 min及48 h共培养时间为农杆菌侵染的最佳转化条件。建立了nptII为选择标记基因的遗传转化体系,转化效率达到4.94%。【结论】筛选出具有高频胚胎发生能力的糜子品种赤黍2号,并建立了农杆菌介导的糜子遗传转化体系。 展开更多
关键词 糜子 赤黍2号 胚性愈伤组织 农杆菌 遗传转化 胚胎发生 茎尖 再生
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