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紫苏质体型PfLPAT1B基因的克隆及其在油脂合成中的功能分析
1
作者
黄旭升
周雅莉
+4 位作者
柴旭东
闻婧
王计平
贾小云
李润植
《生物技术通报》
北大核心
2025年第7期226-236,共11页
【目的】溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAT)在植物生长发育和脂质代谢等过程中发挥重要作用,探究紫苏PfLPAT1B基因的生物学功能,为紫苏及其他油料作物的遗传改良和新品系培育提供科学依据。【方法】从...
【目的】溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAT)在植物生长发育和脂质代谢等过程中发挥重要作用,探究紫苏PfLPAT1B基因的生物学功能,为紫苏及其他油料作物的遗传改良和新品系培育提供科学依据。【方法】从紫苏基因组数据库鉴定PfLPAT1B基因序列,利用组学工具分析其序列特征及系统进化,通过RT-qPCR检测PfLPAT1B基因在紫苏不同组织及种子不同发育时期表达特性,利用LPAT缺陷型菌株SM2-1检测PfLPAT1B蛋白的活性,通过酿酒酵母与烟草遗传转化分析PfLPAT1B在油脂合成中的功能。【结果】PfLPAT1B共编码369个氨基酸,为碱性不稳定亲水蛋白;PfLPAT1B具有典型的LPAT酰基转移酶活性保守结构域。PfLPAT1B基因在紫苏不同组织及种子不同发育时期均有表达,在花中的表达量最高,且随着种子发育PfLPAT1B的表达量逐渐升高。亚细胞定位结果表明紫苏PfLPAT1B定位于叶绿体。SM2-1菌株互补酶活检测证明紫苏PfLPAT1B具有LPAT酶活性。酵母与烟草转化结果表明,过表达PfLPAT1B基因导致转基因酵母及烟草总油脂含量显著上升,且C16:0和C16:1含量显著上升。此外,过表达PfLPAT1B促进转基因烟草淀粉含量显著上升,可溶性糖含量显著降低,表明PfLPAT1B过表达可能促进转基因烟草碳通量的分配,使其从糖代谢途径进入油脂代谢途径。【结论】紫苏PfLPAT1B基因编码蛋白具有LPAT酰基转移酶活性,异源过表达PfLPAT1B可显著提高宿主组织油脂产量,并改变主要脂肪酸组分的含量。
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关键词
紫苏
溶血磷脂酸酰基转移酶
油脂合成积累
序列特征分析
表达特性分析
大肠杆菌互补功能测试
酿酒酵母转化
烟草异源表达
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职称材料
大豆BCAT基因家族鉴定及GmBCAT3在干旱胁迫中的功能分析
2
作者
王碧成
景海青
+5 位作者
万坤
张莹莹
丁家豪
李润植
薛金爱
张海平
《生物技术通报》
北大核心
2025年第10期196-209,共14页
【目的】支链氨基酸(branched-chain amino acids,BCAAs)是植物在干旱胁迫下积累的主要代谢物,支链氨基酸转氨酶(branched-chain amino acid transaminase,BCAT)是支链氨基酸合成最后一步反应的关键酶。研究大豆GmBCAT的生物学功能,为...
【目的】支链氨基酸(branched-chain amino acids,BCAAs)是植物在干旱胁迫下积累的主要代谢物,支链氨基酸转氨酶(branched-chain amino acid transaminase,BCAT)是支链氨基酸合成最后一步反应的关键酶。研究大豆GmBCAT的生物学功能,为大豆及其他作物抗旱遗传改良奠定理论基础,亦为培育优异抗逆性能的大豆新种质提供科学参考。【方法】从大豆全基因组鉴定GmBCAT基因家族成员,并预测GmBCAT蛋白亚细胞定位,通过烟草遗传转化研究GmBCAT3在BCAA合成积累及干旱胁迫应答中的功能。【结果】从大豆基因组中共鉴定到10个GmBCATs基因,同一类群GmBCAT成员具有相似的保守结构域及基因结构;GmBCATs启动子含有多种与植物生长发育及非生物胁迫相关的顺式元件;RT-qPCR分析发现,GmBCATs在大豆不同组织及种子不同发育时期差异表达,GmBCAT2和GmBCAT3在根和叶中表达水平显著高于其他组织;干旱胁迫处理后,大豆幼苗GmBCAT3表达量最高。亚细胞定位结果表明,GmBCAT3蛋白定位在叶绿体。烟草遗传转化显示,正常条件下,GmBCAT3转基因烟草缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸含量分别增加37.48%、63.46%和72.62%。干旱胁迫下,转基因烟草亮氨酸含量增加57.42%,而缬氨酸和异亮氨酸含量分别增加2.00和1.90倍;同时,转基因烟草脯氨酸含量增加3.40倍,丙二醛含量降低23.01%,SOD和POD活性分别升高72.33%和74.91%;过表达GmBCAT3烟草影响了BCAAs代谢相关基因的表达。【结论】大豆GmBCAT3异源过表达显著提高转基因烟草BCAAs含量,提高植株耐旱性。
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关键词
大豆
支链氨基酸转氨酶
基因组鉴定
表达分析
干旱胁迫应答
烟草遗传转化
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职称材料
题名
紫苏质体型PfLPAT1B基因的克隆及其在油脂合成中的功能分析
1
作者
黄旭升
周雅莉
柴旭东
闻婧
王计平
贾小云
李润植
机构
山西农业大学农学院山西省特用作物遗传与代谢工程研究中心
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第7期226-236,共11页
基金
国家重点研发计划(2023YFD1200700,2023YFD1200701)
国家外国专家局引智项目(G2022004007L,G2023004003L)
+1 种基金
山西省基础研究计划(自由探索类)项目(202403021212310,20210302123418)
山西省科技合作项目(202304041101009)。
文摘
【目的】溶血磷脂酸酰基转移酶(lysophosphatidic acid acyltransferase,LPAT)在植物生长发育和脂质代谢等过程中发挥重要作用,探究紫苏PfLPAT1B基因的生物学功能,为紫苏及其他油料作物的遗传改良和新品系培育提供科学依据。【方法】从紫苏基因组数据库鉴定PfLPAT1B基因序列,利用组学工具分析其序列特征及系统进化,通过RT-qPCR检测PfLPAT1B基因在紫苏不同组织及种子不同发育时期表达特性,利用LPAT缺陷型菌株SM2-1检测PfLPAT1B蛋白的活性,通过酿酒酵母与烟草遗传转化分析PfLPAT1B在油脂合成中的功能。【结果】PfLPAT1B共编码369个氨基酸,为碱性不稳定亲水蛋白;PfLPAT1B具有典型的LPAT酰基转移酶活性保守结构域。PfLPAT1B基因在紫苏不同组织及种子不同发育时期均有表达,在花中的表达量最高,且随着种子发育PfLPAT1B的表达量逐渐升高。亚细胞定位结果表明紫苏PfLPAT1B定位于叶绿体。SM2-1菌株互补酶活检测证明紫苏PfLPAT1B具有LPAT酶活性。酵母与烟草转化结果表明,过表达PfLPAT1B基因导致转基因酵母及烟草总油脂含量显著上升,且C16:0和C16:1含量显著上升。此外,过表达PfLPAT1B促进转基因烟草淀粉含量显著上升,可溶性糖含量显著降低,表明PfLPAT1B过表达可能促进转基因烟草碳通量的分配,使其从糖代谢途径进入油脂代谢途径。【结论】紫苏PfLPAT1B基因编码蛋白具有LPAT酰基转移酶活性,异源过表达PfLPAT1B可显著提高宿主组织油脂产量,并改变主要脂肪酸组分的含量。
关键词
紫苏
溶血磷脂酸酰基转移酶
油脂合成积累
序列特征分析
表达特性分析
大肠杆菌互补功能测试
酿酒酵母转化
烟草异源表达
Keywords
Perilla frutescens
lysophosphatidic acid acyltransferase
oil biosynthesis and accumulation
sequence characteristic analysis
expression characteristic analysis
Escherichia coli complementation function test
yeast transformation
tobacco heterologous expression
分类号
S565.9 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
大豆BCAT基因家族鉴定及GmBCAT3在干旱胁迫中的功能分析
2
作者
王碧成
景海青
万坤
张莹莹
丁家豪
李润植
薛金爱
张海平
机构
山西农业大学农学院山西省特用作物遗传与代谢工程研究中心
山西
农业
大学
农业
基因资源
研究
中心
农业
农村部黄土高原
作物
基因资源与种质创制重点实验室
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第10期196-209,共14页
基金
山西省重大专项计划“揭榜挂帅”项目(202201140601025),国家重点研发计划(2021YFD1600601-03),科技创新2030—重大项目(2023ZD0403703),大豆种业创新良种联合攻关项目(NYGG27-01-01),山西省现代农业产业技术体系建设专项资金(2025CYJSTX05)。
文摘
【目的】支链氨基酸(branched-chain amino acids,BCAAs)是植物在干旱胁迫下积累的主要代谢物,支链氨基酸转氨酶(branched-chain amino acid transaminase,BCAT)是支链氨基酸合成最后一步反应的关键酶。研究大豆GmBCAT的生物学功能,为大豆及其他作物抗旱遗传改良奠定理论基础,亦为培育优异抗逆性能的大豆新种质提供科学参考。【方法】从大豆全基因组鉴定GmBCAT基因家族成员,并预测GmBCAT蛋白亚细胞定位,通过烟草遗传转化研究GmBCAT3在BCAA合成积累及干旱胁迫应答中的功能。【结果】从大豆基因组中共鉴定到10个GmBCATs基因,同一类群GmBCAT成员具有相似的保守结构域及基因结构;GmBCATs启动子含有多种与植物生长发育及非生物胁迫相关的顺式元件;RT-qPCR分析发现,GmBCATs在大豆不同组织及种子不同发育时期差异表达,GmBCAT2和GmBCAT3在根和叶中表达水平显著高于其他组织;干旱胁迫处理后,大豆幼苗GmBCAT3表达量最高。亚细胞定位结果表明,GmBCAT3蛋白定位在叶绿体。烟草遗传转化显示,正常条件下,GmBCAT3转基因烟草缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸含量分别增加37.48%、63.46%和72.62%。干旱胁迫下,转基因烟草亮氨酸含量增加57.42%,而缬氨酸和异亮氨酸含量分别增加2.00和1.90倍;同时,转基因烟草脯氨酸含量增加3.40倍,丙二醛含量降低23.01%,SOD和POD活性分别升高72.33%和74.91%;过表达GmBCAT3烟草影响了BCAAs代谢相关基因的表达。【结论】大豆GmBCAT3异源过表达显著提高转基因烟草BCAAs含量,提高植株耐旱性。
关键词
大豆
支链氨基酸转氨酶
基因组鉴定
表达分析
干旱胁迫应答
烟草遗传转化
Keywords
soybean
branched-chain amino acid transaminase
genomic identification
expression analysis
drought stress response
tobacco genetic transformation
分类号
S565.1 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
紫苏质体型PfLPAT1B基因的克隆及其在油脂合成中的功能分析
黄旭升
周雅莉
柴旭东
闻婧
王计平
贾小云
李润植
《生物技术通报》
北大核心
2025
0
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下载PDF
职称材料
2
大豆BCAT基因家族鉴定及GmBCAT3在干旱胁迫中的功能分析
王碧成
景海青
万坤
张莹莹
丁家豪
李润植
薛金爱
张海平
《生物技术通报》
北大核心
2025
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