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Fasudil通过TLR4通路抑制脂多糖诱导的小鼠BV-2小胶质细胞TNF-α和IL-1β的表达 被引量:12
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作者 李艳花 杨兴旺 +6 位作者 张辉 尉杰忠 刘春云 丰玲 李俊莲 肖保国 马存根 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期11-14,共4页
目的探讨Fasudil对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞系促炎细胞因子表达中的作用。方法体外培养BV-2小胶质细胞系,实验分为PBS对照组、LPS刺激组、LPS联合Fasudil干预组,ELISA检测细胞TNF-α、IL-1β的释放,Griess法检测NO释放水平,流式... 目的探讨Fasudil对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞系促炎细胞因子表达中的作用。方法体外培养BV-2小胶质细胞系,实验分为PBS对照组、LPS刺激组、LPS联合Fasudil干预组,ELISA检测细胞TNF-α、IL-1β的释放,Griess法检测NO释放水平,流式细胞术检测Toll样受体4(TLR4)、TLR2蛋白表达。结果 LPS刺激BV-2细胞可导致TNF-α、IL-1β和NO的释放明显增加,还可导致炎性信号通路中的受体TLR4表达明显增加。Fasudil能明显抑制炎性因子的释放和TLR4的表达。结论 Fasudil可抑制LPS诱导的小胶质细胞NO、TNF-α和IL-1β释放,其作用机制可能与Fasudil下调TLR4通路有关。 展开更多
关键词 脂多糖 BV-2小胶质细胞 TLR4受体 盐酸法舒地尔
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口服盐酸法舒地尔治疗小鼠EAE有效性初探 被引量:11
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作者 张辉 张海飞 +10 位作者 李艳花 刘春云 尉杰忠 丁智斌 杨兴旺 杨琬芳 李俊莲 冯前进 丰玲 肖保国 马存根 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2060-2065,共6页
目的:探讨盐酸法舒地尔口服对实验性自身免疫性脊髓炎(EAE)的治疗效果及机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35肽(MOG35-55)免疫雌性C57BL/6小鼠建立慢性EAE模型,随机分为EAE模型组和法舒地尔治疗组。免疫后第3天,对照组予以灌胃... 目的:探讨盐酸法舒地尔口服对实验性自身免疫性脊髓炎(EAE)的治疗效果及机制。方法:采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-35肽(MOG35-55)免疫雌性C57BL/6小鼠建立慢性EAE模型,随机分为EAE模型组和法舒地尔治疗组。免疫后第3天,对照组予以灌胃生理盐水,治疗组予以法舒地尔,每天1次至免疫后第27天。比较2组小鼠体重变化和临床评分。第28天处死动物,脊髓冰冻切片进行髓鞘染色和HE染色,流式细胞术检测脾细胞M1型和M2型巨噬细胞的表型,ELISA法检测脾细胞培养上清液白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放。结果:法舒地尔口服推迟EAE发病时间,减缓EAE症状,减少体重下降,减少EAE髓鞘脱失和中枢神经系统炎症浸润,抑制M1型巨噬细胞CD16/32表达,增加M2型巨噬细胞CD206和IL-10表达,同时抑制炎症细胞因子IL-1β和TNF-α的释放。结论:法舒地尔口服具有良好的治疗效果,可明显减轻中枢神经系统的髓鞘脱失和炎症病灶。其作用机制可能使M1型巨噬细胞向M2型转化,从而抑制炎症细胞因子释放。 展开更多
关键词 法舒地尔 口服 实验性自身免疫性脊髓炎 巨噬细胞 细胞因子类
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INF-γ在可溶性β-淀粉样蛋白(fAβ)介导的小胶质细胞神经毒性中的增敏作用 被引量:5
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作者 李艳花 张海飞 +6 位作者 张鑫辰 张辉 尉杰忠 丰玲 霍明章 肖保国 马存根 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期259-264,共6页
目的通过体外实验的方法研究炎性环境促进异常聚集的可溶性β-淀粉样蛋白(fibrillarβ-amyloid,fAβ)1-42引发神经毒性的分子机制。方法使用INF-γ(100U/mL)或/和fAβ1-42(50μg/mL)剌激BV2小胶质细胞系,检测其膜式受体表达和炎性分子释... 目的通过体外实验的方法研究炎性环境促进异常聚集的可溶性β-淀粉样蛋白(fibrillarβ-amyloid,fAβ)1-42引发神经毒性的分子机制。方法使用INF-γ(100U/mL)或/和fAβ1-42(50μg/mL)剌激BV2小胶质细胞系,检测其膜式受体表达和炎性分子释放;并通过小胶质细胞和PC12神经元共培养体系,检测PC12细胞死亡和线粒体膜电位变化。结果 INF-γ诱导BV2细胞表面Aβ受体FPR2、RAGE和CD36表达明显增加。在INF-γ刺激下,fAβ1-42诱导小胶质细胞释放更多的炎性因子。在BV2和PC12共培养体系中,INF-γ和fAβ1-42的协同作用促使更多的PC12细胞走向死亡,使PC12细胞线粒体膜电位发生更强变化。结论 INF-γ诱导的Aβ结合受体表达量上调,可能参与Aβ激活小胶质细胞的炎性反应和随后的神经元毒性,可能成为今后阿尔茨海默病(Alzheimer′s disase,AD)患者治疗的靶点。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病(AD) 小胶质细胞 神经元 BETA-AMYLOID INF-Γ
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新型Rho激酶抑制剂WAR5治疗EAE的初步研究 被引量:3
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作者 丁智斌 张辉 +10 位作者 杨兴旺 张海飞 尉杰忠 李艳花 刘春云 杨婉芳 李俊莲 冯前进 赵永飞 肖保国 马存根 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1610-1615,共6页
目的:探讨新型Rho激酶抑制剂WAR5对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果及其可能的作用机制。方法:雌性C57BL/6小鼠,随机分为EAE组和WAR5治疗组。EAE模型采用MOG35-55多肽诱导,免疫后第... 目的:探讨新型Rho激酶抑制剂WAR5对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果及其可能的作用机制。方法:雌性C57BL/6小鼠,随机分为EAE组和WAR5治疗组。EAE模型采用MOG35-55多肽诱导,免疫后第3天起隔天腹腔注射WAR5或生理盐水至第27天,观察并比较临床症状和体重变化。免疫后第28天处死动物,取脊髓进行HE和髓鞘染色,流式细胞术检测脾细胞M1和M2型巨噬细胞表型。提取脑和脊髓组织蛋白,采用Western blotting检测脑和脊髓诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达。结果:WAR5治疗能有效推迟临床发病时间,非常显著减轻EAE临床症状。病理检查发现WAR5治疗减少EAE髓鞘脱失和中枢神经系统炎症浸润。同时,WAR5抑制M1型巨噬细胞CD16/32表达,还可增加M2型巨噬细胞CD206表达,并且能够抑制脑和脊髓中iNOS的表达水平。结论:新型Rho激酶抑制剂对EAE有明显的治疗效果,可能与其诱导炎症性M1型巨噬细胞向抗炎性的M2表型转化、从而抑制中枢神经系统的炎症反应有关。 展开更多
关键词 WAR5化合物 法舒地尔 自身免疫性脑脊髓炎 实验性 巨噬细胞 一氧化氮合酶
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硫辛酸抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞细胞因子及趋化因子的表达 被引量:2
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作者 孟健 郭敏芳 +9 位作者 尉杰忠 李艳花 刘春云 侯绍蔚 丰玲 杨琬芳 李俊莲 冯前进 肖保国 马存根 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期346-350,共5页
目的探讨硫辛酸(LA)对脂多糖(LPS)激活的星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10及相关趋化因子的影响。方法分离并鉴定新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,1μg/mL LPS刺激第2代星形胶质细胞,100μg/mL LA进行干预,Griess法检... 目的探讨硫辛酸(LA)对脂多糖(LPS)激活的星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10及相关趋化因子的影响。方法分离并鉴定新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,1μg/mL LPS刺激第2代星形胶质细胞,100μg/mL LA进行干预,Griess法检测NO的分泌,ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10炎性因子的含量,反转录PCR检测炎症趋化因子CC亚族趋化因子配体20(CCL20),单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)mRNA的表达。结果与正常组比较,LPS刺激星形胶质细胞后,NO、TNF-α、IL-1β、IL-6分泌显著升高,IL-10分泌下调(P<0.05);LA能抑制LPS诱导的NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,增加IL-10的分泌,与LPS组相比差异有统计学意义(P<0.05)。LA能显著下调LPS所致的CCL20、MIP-1α、MCP-1 mRNA的分泌。结论 LA能抑制LPS激活星形胶质细胞所致的炎性反应,其作用与抑制炎性因子及趋化因子的分泌有关。 展开更多
关键词 硫辛酸 脂多糖 细胞因子
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