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以氧消耗速率指导的补料培养基优化提升糖化酶发酵水平 被引量：1
1
作者 张士杨 王泽建 +4 位作者 王兴吉 郭美锦 储炬 庄英萍 张嗣良 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期17-23,共7页
黑曲霉产糖化酶发酵过程数据显示,发酵中后期产酶速率的下降与采集的生理代谢参数氧消耗速率(oxygen uptake rate,OUR)的降低有着重要相关性,OUR的降低与某些营养元素控制的菌体生长和代谢有关。该文利用Design Expert软件,通过单因素... 黑曲霉产糖化酶发酵过程数据显示,发酵中后期产酶速率的下降与采集的生理代谢参数氧消耗速率(oxygen uptake rate,OUR)的降低有着重要相关性,OUR的降低与某些营养元素控制的菌体生长和代谢有关。该文利用Design Expert软件,通过单因素筛选实验、Plackett-Burman设计和中心组合设计对黑曲霉产糖化酶发酵过程中的补料培养基进行优化,确定了流加培养基:棉籽蛋白4.19 g/L,糖蜜9.01 g/L,硫酸铜0.015 g/L,由此明显改变了后期OUR快速下降和产物合成速率降低的问题。50 L反应器中的发酵验证实验表明,添加了优化的补料培养基的糖化酶酶活比未添加的罐批提升了11.35%以上,可明显提升糖化酶生产效率。 展开更多
关键词 氧消耗速率(OUR) 黑曲霉 糖化酶 补料培养基 优化 PLACKETT-BURMAN设计 中心组合设计
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鸡血管生成素样蛋白4重组蛋白对肉鸡肝脏和胸肌脂肪代谢的影响 被引量：2
2
作者 侯彦茹 赵旭 +2 位作者 黄华山 张金红 井长伟 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期1260-1267,共8页
本试验旨在探究鸡血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)重组蛋白对肉鸡肝脏和胸肌脂肪代谢的影响。分体内动物试验和体外细胞试验2部分进行。体内动物试验选用35日龄健康禁食状态下爱拔益加肉公鸡36只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复1只鸡。... 本试验旨在探究鸡血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)重组蛋白对肉鸡肝脏和胸肌脂肪代谢的影响。分体内动物试验和体外细胞试验2部分进行。体内动物试验选用35日龄健康禁食状态下爱拔益加肉公鸡36只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复1只鸡。对照组翅静脉注射灭菌的生理盐水,试验组分别翅静脉注射20、100、500、2 500、12 500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白,注射剂量均为550μL,试验期30 min。体外细胞试验设3个组,分别是生理盐水组、组氨酸-小分子泛素样修饰蛋白(His-SUMO)标签组和鸡ANGPTL4重组蛋白组,分别在细胞培养基中添加灭菌的生理盐水、His-SUMO标签蛋白(其含量与鸡ANGPTL4重组蛋白组中标签蛋白含量一致)和鸡ANGPTL4重组蛋白(250 pg/mL),添加剂量均为5μL,5%CO_(2)、37℃孵育24 h。结果发现:1)与对照组相比,20、100、500、2 500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组的肝脏脂肪酸合成酶(FAS)mRNA相对表达量和500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组的肝脏FAS活性均显著提高(P<0.05)。随着鸡ANGPTL4重组蛋白注射剂量增加,肝脏FAS mRNA相对表达量和活性均呈现一次线性和二次曲线增加的效应(P<0.05)。2)与对照组相比,100、500、2 500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组的肝脏苹果酸酶(ME) mRNA相对表达量和12 500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组的肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC) mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05)。随着鸡ANGPTL4重组蛋白注射剂量增加,肝脏ACC mRNA相对表达量呈现一次线性和二次曲线降低的效应(P<0.05)。不同注射剂量的鸡ANGPTL4重组蛋白对肉鸡肝脏ME和ACC活性均无显著影响(P>0.05)。3)与对照组相比,500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组的胸肌脂蛋白脂酶(LPL)活性显著增加(P<0.05)。4)鸡ANGPTL4重组蛋白组的成肌细胞甘油三酯(TG)含量显著高于生理盐水组和His-SUMO标签组(P<0.05)。综上所述,鸡ANGPTL4重组蛋白具有调控肉鸡肝脏脂肪合成相关基因mRNA表达和酶活性以及促进肉鸡胸肌脂肪沉积的作用,以500 ng/kg BW注射剂量效果较好。 展开更多
关键词 鸡ANGPTL4重组蛋白 肉鸡 肝脏 胸肌 脂肪代谢
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鸡血管生成素样蛋白4重组蛋白的原核表达及其对肉鸡血清生化指标和激素水平的影响
3
作者 赵旭 黄华山 苏闪闪 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1859-1866,共8页
本试验旨在实现鸡血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)重组蛋白的原核表达,并探讨其对肉鸡血清生化指标和激素水平的影响。将带有His-SUMO标签的鸡ANGPTL4基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pET21a(+)的NdeⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组原核表... 本试验旨在实现鸡血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)重组蛋白的原核表达,并探讨其对肉鸡血清生化指标和激素水平的影响。将带有His-SUMO标签的鸡ANGPTL4基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pET21a(+)的NdeⅠ和XhoⅠ双酶切位点上,构建重组原核表达质粒pET21a-His-SUMO-ANGPTL4,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对其菌液进行诱导表达,经包涵体复性和复性蛋白的Ni柱纯化,得到预期大小的融合蛋白His-SUMO-ANGPTL4。将得到的鸡ANGPTL4重组蛋白按照0(对照)、20、100、500、2500和12500 ng/kg BW的剂量静脉注射给35日龄的健康爱拔益加肉公鸡,每个剂量注射6只,并于注射后30 min采集肉鸡的空腹血液。结果显示:1)与对照组相比,2500和12500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组其血清葡萄糖(GLU)和极低密度脂蛋白(VLDL)含量均显著提高(P<0.05);同时,随着鸡ANGPTL4重组蛋白注射剂量从0增加到12500 ng/kg BW,血清GLU和VLDL含量均呈现一次线性和二次曲线增加的效应(P<0.05)。2)与对照组相比,20、2500和12500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组血清生长激素水平显著降低(P<0.05);同时,随着鸡ANGPTL4重组蛋白注射剂量从0增加到12500 ng/kg BW,血清生长激素水平呈现一次线性和二次曲线降低的效应(P<0.05)。3)与对照组相比,20、100、500、2500和12500 ng/kg BW鸡ANGPTL4重组蛋白组血清瘦素水平显著降低(P<0.05)。由此可见,本试验实现了鸡ANGPTL4重组蛋白的原核表达,静脉注射2500和12500 ng/kg BW该重组蛋白均可显著提高肉鸡血清中GLU和VLDL含量,显著降低肉鸡血清中生长激素和瘦素水平。 展开更多
关键词 鸡ANGPTL4重组蛋白 原核表达 肉鸡 血清生化指标 血清激素水平
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