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褪黑素通过cGAS-STING-NLRP3通路减轻氧诱导视网膜病变大鼠的炎症反应
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作者 王晨旭 肖培伦 +5 位作者 赵玉泽 张丽军 刘中宝 林雨轩 王晓莉 赵岩松 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第4期429-436,共8页
目的:探讨褪黑素(Mel)对氧诱导视网膜病变(OIR)大鼠视网膜炎症损伤的影响以及分子机制。方法:将健康SD新生大鼠分为假手术(Sham)组、模型(OIR)组和褪黑素治疗(OIR+Mel)组。采用50%和10%氧浓度交替14 d诱导建立OIR模型,OIR+Mel组腹腔注射... 目的:探讨褪黑素(Mel)对氧诱导视网膜病变(OIR)大鼠视网膜炎症损伤的影响以及分子机制。方法:将健康SD新生大鼠分为假手术(Sham)组、模型(OIR)组和褪黑素治疗(OIR+Mel)组。采用50%和10%氧浓度交替14 d诱导建立OIR模型,OIR+Mel组腹腔注射10 mg·kg^(-1)褪黑素。苏木素-伊红染色(HE)观察视网膜组织形态学变化;免疫组织化学染色检测视网膜cleaved caspase-1、IL-1β的表达,免疫荧光染色检测视网膜cGAS-STING-NLRP3通路信号分子及小胶质细胞GSDMD的表达。结果:HE染色结果显示,与Sham组相比,OIR组视网膜细胞排列紊乱,内层视网膜厚度显著变薄,OIR+Mel组相较于OIR组视网膜细胞排列较整齐(P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,OIR组大鼠视网膜cleaved caspase-1^(+)、IL-1β^(+)细胞数较Sham组显著增多,OIR+Mel组大鼠视网膜cleaved caspase-1^(+)、IL-1β^(+)细胞数较OIR组显著减少(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,OIR组大鼠视网膜cGAS^(+)、STING^(+)和NLRP3^(+)细胞数较Sham组显著增多,OIR+Mel组大鼠视网膜cGAS^(+)、STING^(+)和NLRP3^(+)细胞数较OIR组显著减少(P<0.05);OIR组大鼠视网膜Iba-1^(+)/GSDMD+细胞数较Sham组显著增加,而OIR+Mel组大鼠视网膜Iba-1^(+)/GSDMD^(+)细胞数显著少于OIR组,但仍多于Sham组(P<0.05)。结论:褪黑素可通过抑制OIR大鼠视网膜小胶质细胞焦亡,进而减轻视网膜炎症损伤,其机制可能与cGAS-STING-NLRP3信号通路相关。 展开更多
关键词 氧诱导视网膜病变 褪黑素 cGAS-STING-NLRP3通路 小胶质细胞 焦亡 大鼠
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大鼠脑缺血再灌注损伤后肠道不同节段内褪黑素受体的变化
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作者 王洁 肖培伦 +4 位作者 陈雨婷 范佳琦 张月霞 王晓莉 于树娜 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期295-304,共10页
目的:脑缺血再灌注损伤(CIRI)可通过脑-肠轴对胃肠道等远隔器官造成损害。已知褪黑素可通过激活特定的受体发挥神经保护作用。然而,脑组织缺血后胃肠道中褪黑素受体的变化及其与肠道损伤的关系仍不清楚。方法:将24只成年雄性SD大鼠随机... 目的:脑缺血再灌注损伤(CIRI)可通过脑-肠轴对胃肠道等远隔器官造成损害。已知褪黑素可通过激活特定的受体发挥神经保护作用。然而,脑组织缺血后胃肠道中褪黑素受体的变化及其与肠道损伤的关系仍不清楚。方法:将24只成年雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组和CIRI组,CIRI组采用Zea-Longa线栓法制备脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h后收集大鼠空肠、回肠及结肠组织。采用2,3,5-三苯四唑氯(TTC)染色和HE染色观察CIRI后脑组织和肠组织的损伤程度,免疫荧光染色观察肠道封闭蛋白1(ZO-1)和Claudin5的表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫荧光染色和Western Blot检测褪黑素受体1(MT1)和褪黑素受体2(MT2)的表达变化。通过一般线性回归分析CIRI后褪黑素受体与肠道紧密连接蛋白的相关性。结果:TTC染色显示,CIRI组大鼠脑梗死面积明显高于Sham组;HE染色显示,CIRI组大鼠肠绒毛断裂、缩短,杯状细胞减少。免疫荧光染色结果显示CIRI组大鼠肠组织内ZO-1^(+)和Claudin5^(+)的表达明显低于Sham组(P<0.05);RT-qPCR显示,CIRI组MT1和MT2 mRNA的表达明显低于Sham组(P<0.05),其中,结肠组织的降低最为明显。免疫荧光染色和Western Blot结果也显示,与Sham组相比,CIRI组MT1和MT2蛋白的表达显著降低(P<0.05);一般线性回归分析显示,Sham组与CIRI组的MT1+和MT2+平均荧光强度的差值与两组间Claudin5+和ZO-1+平均荧光强度的差值均呈正相关。结论:CIRI后空肠、回肠和结肠内MT1和MT2的表达均降低,且结肠组织降低的最为显著,提示脑卒中的愈后不良可能与褪黑素受体的降低有一定相关性。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 脑-肠轴 褪黑素受体 大鼠
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基于多参数MRI探讨大鼠脑缺血再灌注对脑细胞毒性水肿的影响
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作者 胡少坤 肖培伦 +4 位作者 张海默 李天睿 陈超 于淼 王晓莉 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期541-548,共8页
目的:采用T2加权成像(T2WI)、弥散加权成像(DWI)、脉冲梯度自旋回波(PGSE)等多参数MRI扫描结合多种组织病理学技术观察大鼠脑缺血不同时间后再灌注(CIRI)对脑组织细胞毒性水肿的影响,为缺血性脑卒中模型的建立及临床诊疗提供依据。方法... 目的:采用T2加权成像(T2WI)、弥散加权成像(DWI)、脉冲梯度自旋回波(PGSE)等多参数MRI扫描结合多种组织病理学技术观察大鼠脑缺血不同时间后再灌注(CIRI)对脑组织细胞毒性水肿的影响,为缺血性脑卒中模型的建立及临床诊疗提供依据。方法:健康成年雄性Sprague Dawley大鼠按照随机数字表法分为假手术(Sham)组、缺血60 min再灌注(IR-60 min)组、IR-120 min组及IR-180 min组。改良Zea Longa线栓法建立大鼠CIRI模型,激光多普勒血流仪结合苏木精-伊红(HE)染色法鉴定模型;多参数MRI扫描、结合脑含水量、水通道蛋白4(AQP4)免疫荧光染色、Western Blot等方法,观察各组大鼠脑组织细胞毒性水肿及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的变化。结果:HE染色及脑组织含水量结果示,随缺血时间的延长,缺血侧大脑皮质水肿程度加重;T2WI结果示,IR-60 min组损伤开始累及大脑皮质,IR-120 min组损伤已完全累及大脑皮质,IR-180 min组损伤最重(P<0.05),大脑中线明显向对侧移位。各缺血侧大脑皮质相对表观弥散系数、水交换时间均显著低于Sham组(P<0.05),且呈上升趋势;各缺血侧大脑皮层细胞膜通透性均显著高于Sham组(P<0.05)。缺血侧大脑皮质AQP4、IL-1β、TNF-α表达显著高于Sham组,且呈上升趋势(P<0.05)。结论:大鼠大脑中动脉缺血60、120及180 min后再灌注均可导致脑损伤,且缺血时间的延长会加重脑细胞毒性水肿,120 min是CIRI模型的最佳缺血时间;多参数MRI可活体监测大鼠CIRI后脑组织微结构变化,为早期临床诊疗提供可视化依据。 展开更多
关键词 多参数磁共振成像(mMRI) 脑缺血再灌注损伤(CIRI) 水通道蛋白4(AQP4) 脑水肿 大鼠
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脑缺血再灌注损伤导致大鼠神经血管单元破坏
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作者 张海默 高啸天 +4 位作者 张孝祖 肖培伦 于淼 蒋景英 王晓莉 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期724-732,共9页
目的:基于多模态MRI结合多种组织学技术评估脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠神经血管单元(NVU)损伤,为临床上CIRI提供可视化依据。方法:随机将28只健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术(Sham)组、CIRI组。模型建立24 h后,大鼠进行头部T2加... 目的:基于多模态MRI结合多种组织学技术评估脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠神经血管单元(NVU)损伤,为临床上CIRI提供可视化依据。方法:随机将28只健康雄性Sprague-Dawley大鼠分为假手术(Sham)组、CIRI组。模型建立24 h后,大鼠进行头部T2加权成像、弥散加权成像、水提取相位对比自旋标记-磁共振成像(MRI)及脑血流血氧监测。HE染色观察大脑皮质神经细胞形态变化。免疫荧光染色及透射电镜观察CIRI后NVU的变化。免疫组化染色与Western Blot检测大鼠大脑皮质claudin-5、ZO-1及基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。结果:MRI结果显示,CIRI组脑组织水肿,血流灌注量显著降低、BBB通透性较Sham组显著增加(P<0.01)。脑血流血氧监测结果显示,损伤侧大脑皮质血红蛋白氧饱和度显著低于Sham组(P<0.05)。HE染色结果显示,损伤侧大脑皮质神经细胞排列紊乱,核固缩。免疫荧光染色结果显示损伤侧大脑皮质NeuN、CD31阳性细胞数显著低于Sham组(P<0.01),大脑皮质及纹状体TUNEL阳性细胞数显著多于Sham组(P<0.05)。透射电镜观察结果显示损伤侧大脑皮质内皮细胞紧密连接破坏,神经元核固缩、星形胶质细胞胞体水肿。免疫组化染色结果显示损伤侧大脑皮质claudin-5、ZO-1阳性细胞数显著低于Sham组,MMP-9表达显著高于Sham组(P<0.01)。结论:大鼠CIRI可导致NVU损伤,破坏BBB,加重脑损伤,多模态MRI结合多种组织病理学技术可有效评估CIRI后NVU损伤。 展开更多
关键词 多模态磁共振成像 脑缺血再灌注损伤 神经血管单元 血脑屏障 大鼠
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