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NEK2基因敲低对多发性骨髓瘤细胞介导骨质破坏及NF-κB信号通路的影响
1
作者
王鹏
郭洁
+4 位作者
路来同
仲江波
潘盼
王洪超
刘静
《山东医药》
2025年第5期7-11,共5页
目的探讨中心体相关激酶2(NEK2)基因敲低对多发性骨髓瘤(MM)细胞介导骨质破坏及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法取MM细胞系(MM.1S细胞、RPMI 8226细胞),均设置NEK2敲低组、阴性对照组,分别用慢病毒载体-NEK2-RNA干扰、病毒CON07...
目的探讨中心体相关激酶2(NEK2)基因敲低对多发性骨髓瘤(MM)细胞介导骨质破坏及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法取MM细胞系(MM.1S细胞、RPMI 8226细胞),均设置NEK2敲低组、阴性对照组,分别用慢病毒载体-NEK2-RNA干扰、病毒CON077进行感染,用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测NRK2 mRNA表达以确认转染效率,选择敲低效率低的细胞与MM细胞共培养。提取骨髓基质细胞(BMSC),将其分为阴性对照组、NEK2敲低组,分别加入RPMI 8226细胞、敲低NEK2的RPMI 8226细胞共培养,RT-qPCR法检测细胞内骨质破坏相关指标NF-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护蛋白(OPG)mRNA表达。取NEK2敲低组、阴性对照组MM细胞,用CCK-8法检测细胞增殖(以吸光度值表示),流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB、乙酰肝素酶(HPSE)表达,RT-qPCR法检测NF-κB、HPSE mRNA表达。结果MM.1S细胞、RPMI-8226细胞NEK2敲低组NEK2 mRNA相对表达量均低于其阴性对照组(P均<0.05),基因敲低效率分别为92.2%、64.0%。与BMSC的阴性对照组比较,NEK2敲低组RANKL mRNA表达低(P<0.05),而OPG mRNA表达高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与MM.1S细胞、RPMI-8226细胞的阴性对照组比较,其NEK2敲低组吸光度值低,细胞凋亡率高,NF-κB、HPSE mRNA相对表达量低(P均<0.05),NF-κB、HPSE蛋白表达低。结论NEK2基因敲低可能通过调控NF-κB信号通路抑制MM细胞增殖、促进其凋亡,降低HPSE表达,从而抑制MM细胞介导的骨质破坏。
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关键词
多发性骨髓瘤
骨髓瘤骨病
骨质破坏
中心体相关激酶2
核因子ΚB信号通路
多发性骨髓瘤细胞
骨髓基质细胞
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职称材料
题名
NEK2基因敲低对多发性骨髓瘤细胞介导骨质破坏及NF-κB信号通路的影响
1
作者
王鹏
郭洁
路来同
仲江波
潘盼
王洪超
刘静
机构
山东
第一
医科
大学
附属
济南市中心
医院
骨科
山东第一医科大学附属济南市中心医院病理科
山东
省公共卫生临床
中心
骨二科
首都
医科
大学
附属
北京天坛
医院
血液内科
出处
《山东医药》
2025年第5期7-11,共5页
基金
山东省自然科学基金青年项目(ZR2020QH121)
山东省医药卫生科技发展计划项目(2018WS481)。
文摘
目的探讨中心体相关激酶2(NEK2)基因敲低对多发性骨髓瘤(MM)细胞介导骨质破坏及核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法取MM细胞系(MM.1S细胞、RPMI 8226细胞),均设置NEK2敲低组、阴性对照组,分别用慢病毒载体-NEK2-RNA干扰、病毒CON077进行感染,用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测NRK2 mRNA表达以确认转染效率,选择敲低效率低的细胞与MM细胞共培养。提取骨髓基质细胞(BMSC),将其分为阴性对照组、NEK2敲低组,分别加入RPMI 8226细胞、敲低NEK2的RPMI 8226细胞共培养,RT-qPCR法检测细胞内骨质破坏相关指标NF-κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护蛋白(OPG)mRNA表达。取NEK2敲低组、阴性对照组MM细胞,用CCK-8法检测细胞增殖(以吸光度值表示),流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB、乙酰肝素酶(HPSE)表达,RT-qPCR法检测NF-κB、HPSE mRNA表达。结果MM.1S细胞、RPMI-8226细胞NEK2敲低组NEK2 mRNA相对表达量均低于其阴性对照组(P均<0.05),基因敲低效率分别为92.2%、64.0%。与BMSC的阴性对照组比较,NEK2敲低组RANKL mRNA表达低(P<0.05),而OPG mRNA表达高,但差异无统计学意义(P>0.05)。与MM.1S细胞、RPMI-8226细胞的阴性对照组比较,其NEK2敲低组吸光度值低,细胞凋亡率高,NF-κB、HPSE mRNA相对表达量低(P均<0.05),NF-κB、HPSE蛋白表达低。结论NEK2基因敲低可能通过调控NF-κB信号通路抑制MM细胞增殖、促进其凋亡,降低HPSE表达,从而抑制MM细胞介导的骨质破坏。
关键词
多发性骨髓瘤
骨髓瘤骨病
骨质破坏
中心体相关激酶2
核因子ΚB信号通路
多发性骨髓瘤细胞
骨髓基质细胞
Keywords
multiple myeloma
myeloma bone disease
bone destruction
centrosome-associated kinase 2
nuclear factor-κB signaling pathway
multiple myeloma cells
bone marrow stromal cells
分类号
R733.3 [医药卫生—肿瘤]
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1
NEK2基因敲低对多发性骨髓瘤细胞介导骨质破坏及NF-κB信号通路的影响
王鹏
郭洁
路来同
仲江波
潘盼
王洪超
刘静
《山东医药》
2025
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