洋葱伯克霍尔德氏菌L68的细胞裂解液经硫酸铵分级沉淀后,依次经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤分离,提取到邻苯二酚双加氧酶.经SDS-PAGE检测,达到电泳纯.将酶反应与氧电极偶联,研究了...洋葱伯克霍尔德氏菌L68的细胞裂解液经硫酸铵分级沉淀后,依次经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤分离,提取到邻苯二酚双加氧酶.经SDS-PAGE检测,达到电泳纯.将酶反应与氧电极偶联,研究了检测水体中邻苯二酚的邻苯二酚双加氧酶传感器.以100mmol/L磷酸钠标准缓冲液(pH7.24)作为该酶传感器的的工作介质,在25℃条件下测得传感器对邻苯二酚标准液的工作曲线线性范围为0.2~3mmol/L,检测限为0.05mmol/L,响应时间为1min,平均回收率达到1.03%.展开更多
目的研究阿司咪唑对斑马鱼的心脏毒性,为斑马鱼的心脏毒性模型提供依据。方法选择1、4、10、20μmol·L-1的阿司咪唑观察其对72 hpf(hour post fertilization)斑马鱼的形态影响,包括畸形、心囊水肿、血细胞在心区堆积等情况,计算心...目的研究阿司咪唑对斑马鱼的心脏毒性,为斑马鱼的心脏毒性模型提供依据。方法选择1、4、10、20μmol·L-1的阿司咪唑观察其对72 hpf(hour post fertilization)斑马鱼的形态影响,包括畸形、心囊水肿、血细胞在心区堆积等情况,计算心率、死亡率及EC50,测量静脉窦-动脉球(SV-BA)间距,以及对2 hpf斑马鱼心脏发育的影响。结果阿司咪唑处理后,斑马鱼出现出心率下降、SV-BA间距增大、血细胞在心区堆积、全身无血流、心囊水肿、心脏停止跳动等中毒现象,并具有时间、剂量依赖性;同时观察到阿司咪唑对2 hpf斑马鱼的心脏发育有明显影响。结论利用阳性药物阿司咪唑探讨药物对斑马鱼心脏功能和发育方面的毒性,有助于建立基于斑马鱼的心脏毒性评价筛选体系。展开更多
目的利用斑马鱼炎症模型探讨姜黄素抗炎作用,分析姜黄素抗炎的分子机制。方法采用3dp(fdays after fertilization)转基因斑马鱼Tg(Lyz:GFP)幼鱼,用姜黄素0,5,10,30和50μmol·L-1处理1 h后,通过用硫酸铜20μmol·L-1处理造成急...目的利用斑马鱼炎症模型探讨姜黄素抗炎作用,分析姜黄素抗炎的分子机制。方法采用3dp(fdays after fertilization)转基因斑马鱼Tg(Lyz:GFP)幼鱼,用姜黄素0,5,10,30和50μmol·L-1处理1 h后,通过用硫酸铜20μmol·L-1处理造成急性炎症,体式显微镜下观察姜黄素对中性粒细胞的迁移、定位,并统计迁移中性粒细胞的数量;通过脂多糖(LPS)10μmol·L-1处理受精后24 h野生型斑马鱼AB品系造成炎症模型,并姜黄素0,5,10,30和50μmol·L-1,通过NO和ROS检测试剂盒检测NO和ROS的表达水平,通过荧光倒置显微镜进行拍照,统计荧光强度。结果在硫酸铜造成的转基因斑马鱼急性炎症模型下,与对照处理相比,姜黄素30和50μmol·L-1抑制硫酸铜造成的中心粒细胞向斑马鱼测线的渗漏,渗漏的中性粒细胞数目明显减少(P<0.05);LPS和姜黄素处理斑马鱼幼鱼,姜黄素30和50μmol·L-1可以降低LPS处理诱导的NO和ROS的表达水平(P<0.05)。结论本研究通过不同斑马鱼炎症模型验证了姜黄素具有抗炎的作用,其机制是通过抑制NO和ROS信号的释放,减少中性粒细胞的渗漏,从而缓解炎症。展开更多
为了实现长周期光栅透射谱测量模式的远距离监测,设计了单端面镀反射膜的测量装置系统,对单端面镀银膜长周期光栅的传感原理做了分析,并从实验的角度分别对单端面镀银膜模式系统和直接透射模式系统的长周期光栅在不同折射率的环境介质...为了实现长周期光栅透射谱测量模式的远距离监测,设计了单端面镀反射膜的测量装置系统,对单端面镀银膜长周期光栅的传感原理做了分析,并从实验的角度分别对单端面镀银膜模式系统和直接透射模式系统的长周期光栅在不同折射率的环境介质中的响应进行了研究,比较了它们的异同。首先,采用2×2单模光纤耦合器分别连接光谱分析仪、光源、长周期光栅。然后,在包含长周期光栅的光纤的另一个端面制备反射银膜。最后,通过测量一系列不同折射率的环境介质,比较了直接透射模式与单端面镀银膜模式下的长周期光栅的响应光谱。实验结果表明:采用波长解调表达时,对于同一种环境介质,两种模式下长周期光栅的响应光谱的谐振波长基本相同;采用功率/峰值解调表达时,随着甘油浓度从水变为80%的甘油溶液,直接透射模式下的光损耗从-6.05 d B变为-9.22 d B,单端面镀银膜模式下的光损耗从-8.03 d B变为-11.33d B。与直接透射模式相比,单端面镀银膜的长周期光栅光谱中的相对光损耗明显增加,谐振峰更尖锐,更有利于谐振波长和谐振峰光损耗值的识别。本研究设计的单端面镀银膜的长周期光栅测量系统不仅保留了长周期光栅透射谱的感应模式,而且使长周期光栅在对环境介质的测量中操作更加灵活方便,尤其是在远距离、恶劣环境或深层液体的折射率测量中具有独特的优势。展开更多
文摘洋葱伯克霍尔德氏菌L68的细胞裂解液经硫酸铵分级沉淀后,依次经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析,Hydroxyapatite柱层析和Sephadex G-150 凝胶过滤分离,提取到邻苯二酚双加氧酶.经SDS-PAGE检测,达到电泳纯.将酶反应与氧电极偶联,研究了检测水体中邻苯二酚的邻苯二酚双加氧酶传感器.以100mmol/L磷酸钠标准缓冲液(pH7.24)作为该酶传感器的的工作介质,在25℃条件下测得传感器对邻苯二酚标准液的工作曲线线性范围为0.2~3mmol/L,检测限为0.05mmol/L,响应时间为1min,平均回收率达到1.03%.
文摘目的利用斑马鱼炎症模型探讨姜黄素抗炎作用,分析姜黄素抗炎的分子机制。方法采用3dp(fdays after fertilization)转基因斑马鱼Tg(Lyz:GFP)幼鱼,用姜黄素0,5,10,30和50μmol·L-1处理1 h后,通过用硫酸铜20μmol·L-1处理造成急性炎症,体式显微镜下观察姜黄素对中性粒细胞的迁移、定位,并统计迁移中性粒细胞的数量;通过脂多糖(LPS)10μmol·L-1处理受精后24 h野生型斑马鱼AB品系造成炎症模型,并姜黄素0,5,10,30和50μmol·L-1,通过NO和ROS检测试剂盒检测NO和ROS的表达水平,通过荧光倒置显微镜进行拍照,统计荧光强度。结果在硫酸铜造成的转基因斑马鱼急性炎症模型下,与对照处理相比,姜黄素30和50μmol·L-1抑制硫酸铜造成的中心粒细胞向斑马鱼测线的渗漏,渗漏的中性粒细胞数目明显减少(P<0.05);LPS和姜黄素处理斑马鱼幼鱼,姜黄素30和50μmol·L-1可以降低LPS处理诱导的NO和ROS的表达水平(P<0.05)。结论本研究通过不同斑马鱼炎症模型验证了姜黄素具有抗炎的作用,其机制是通过抑制NO和ROS信号的释放,减少中性粒细胞的渗漏,从而缓解炎症。
文摘为了实现长周期光栅透射谱测量模式的远距离监测,设计了单端面镀反射膜的测量装置系统,对单端面镀银膜长周期光栅的传感原理做了分析,并从实验的角度分别对单端面镀银膜模式系统和直接透射模式系统的长周期光栅在不同折射率的环境介质中的响应进行了研究,比较了它们的异同。首先,采用2×2单模光纤耦合器分别连接光谱分析仪、光源、长周期光栅。然后,在包含长周期光栅的光纤的另一个端面制备反射银膜。最后,通过测量一系列不同折射率的环境介质,比较了直接透射模式与单端面镀银膜模式下的长周期光栅的响应光谱。实验结果表明:采用波长解调表达时,对于同一种环境介质,两种模式下长周期光栅的响应光谱的谐振波长基本相同;采用功率/峰值解调表达时,随着甘油浓度从水变为80%的甘油溶液,直接透射模式下的光损耗从-6.05 d B变为-9.22 d B,单端面镀银膜模式下的光损耗从-8.03 d B变为-11.33d B。与直接透射模式相比,单端面镀银膜的长周期光栅光谱中的相对光损耗明显增加,谐振峰更尖锐,更有利于谐振波长和谐振峰光损耗值的识别。本研究设计的单端面镀银膜的长周期光栅测量系统不仅保留了长周期光栅透射谱的感应模式,而且使长周期光栅在对环境介质的测量中操作更加灵活方便,尤其是在远距离、恶劣环境或深层液体的折射率测量中具有独特的优势。