生物炭固定化石油降解菌剂的制备 被引量：16

1

作者 张闻 赵延君 +3 位作者 王加宁 张强 黄玉杰 卢媛 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第6期341-345,共5页

以前期筛选的高效石油烃降解菌多食鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium multivorum）为目标微生物,选择多种生物质材料（松针、玉米芯、草）为前体物制备生物炭载体,采用吸附法制备固定化石油降解菌剂,探索获得较高除油效果菌剂的制备条件。... 以前期筛选的高效石油烃降解菌多食鞘氨醇杆菌（Sphingobacterium multivorum）为目标微生物,选择多种生物质材料（松针、玉米芯、草）为前体物制备生物炭载体,采用吸附法制备固定化石油降解菌剂,探索获得较高除油效果菌剂的制备条件。结果表明：以松针及其生物炭为载体的菌剂除油效果优于玉米芯系列和草系列;以生物炭为载体的菌剂除油效果优于以其前体物为载体的菌剂。由于玉米芯易在当地大量低成本获得,考察了玉米芯炭固定化菌剂的制备条件：300℃热解玉米芯4 h,以粒径〉200目的玉米芯炭为载体,投加量为1 g/100 m L的固定化培养基,菌接种量为5%,固定时间为18 h,转速160 r/min,温度30℃,离心后沉淀用无菌生理盐水清洗2次获得菌剂。该菌剂对5 g/L原油培养基的周除油率是47.6%～50.7%;菌剂含降解菌5.8×109CFU/g,吸附法对菌的固定效率为80.7%,降解菌主要附着区域为玉米芯炭表面及孔。该菌剂可为进一步修复油田石油污染土壤提供技术支撑。 展开更多

关键词 生物炭 固定化 石油 降解 菌剂 除油率

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响应面法优化仿刺参酶解工艺及其改善睡眠活性的研究 被引量：3

2

作者 袁文鹏 张绵松 +4 位作者 胡炜 刘昌衡 张永刚 史亚萍 崔修岭 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期198-202,207,共6页

以水解度为主要指标,筛选了动物蛋白酶、海参水解酶、木瓜蛋白酶、水产蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶对仿刺参的酶解效果,考察了酶解温度、加酶量、水解时间、p H等单因素条件对水解度的影响,在此... 以水解度为主要指标,筛选了动物蛋白酶、海参水解酶、木瓜蛋白酶、水产蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶对仿刺参的酶解效果,考察了酶解温度、加酶量、水解时间、p H等单因素条件对水解度的影响,在此基础上通过响应面分析获得仿刺参的最佳酶解工艺,并对最佳工艺条件下酶解液高、中、低剂量对小鼠改善睡眠的功能进行了研究。结果表明:水产蛋白酶对仿刺参蛋白的水解效果优于其他受试蛋白酶,且响应面结果显示其加酶量对水解度具有极显著影响(p<0.01);响应面法优化得到刺参酶解的最适条件为:p H7、温度49℃、加酶量8%(酶/底物百分比)、时间4h,其水解度达到28.0%;仿刺参酶解液高、中、低剂量组对小鼠没有明显的直接催眠作用,但中剂量组能显著增加阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠发生率(p<0.05)。 展开更多

关键词 仿刺参 酶解 水解度 响应面 改善睡眠

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柠檬酸废水厌氧处理工艺优化研究 被引量：3

3

作者 陈程程 张强 +3 位作者 裴振洪 刘同军 祁庆生 王加宁 《安徽农业科学》 CAS 2012年第24期12229-12231,12234,共4页

[目的]得到更高的COD去除率以指导柠檬酸工业废水的处理。[方法]研究了柠檬酸废水厌氧处理过程中主要可控因素酸化时间、厌氧水力停留时间以及厌氧进水COD浓度对COD去除率的影响,并用响应面法进行了COD去除率优化。[结果]酸化时间与其他... [目的]得到更高的COD去除率以指导柠檬酸工业废水的处理。[方法]研究了柠檬酸废水厌氧处理过程中主要可控因素酸化时间、厌氧水力停留时间以及厌氧进水COD浓度对COD去除率的影响,并用响应面法进行了COD去除率优化。[结果]酸化时间与其他2个因素基本没有交互作用,厌氧停留时间和厌氧进水COD浓度对COD去除率有显著影响,而且有交互作用。优化的最佳工艺条件为酸化时间1.53 h,厌氧水力停留时间3.52 h,厌氧进水COD浓度2 698 mg/L,预测最大COD去除率为93.31%,验证试验实际测得去除率为93.23%。[结论]用响应面法优化柠檬酸废水厌氧处理过程,可得到较好的优化结果。 展开更多

关键词 柠檬酸废水 COD去除率 响应面分析 工艺优化

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荒漠植物的适应策略 被引量：7

4

作者 石兆勇 王发园 魏艳丽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第17期5222-5224,共3页

从荒漠植物对荒漠干旱、盐渍化和养分贫瘠的适应策略方面进行了阐述,并概述了荒漠植物种群延续的适应策略;同时,对荒漠植物适应策略问题的研究进行了展望。

关键词 荒漠植物 适应策略 干旱 盐渍化 养分

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高渗处理对根癌农杆菌介导转化平菇菌丝体的影响 被引量：5

5

作者 任艳 黄玉杰 +1 位作者 张新建 杨合同 《食用菌学报》 北大核心 2010年第1期6-13,共8页

采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,EHA105菌株)介导法,对平菇(Pleurotus ostreatus)菌丝体遗传转化的最佳试验条件进行研究,结果表明:当平菇菌丝体与甘露醇和山梨醇的混合液预处理20min,且与农杆菌共培养60min时,转化效率高且... 采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,EHA105菌株)介导法,对平菇(Pleurotus ostreatus)菌丝体遗传转化的最佳试验条件进行研究,结果表明:当平菇菌丝体与甘露醇和山梨醇的混合液预处理20min,且与农杆菌共培养60min时,转化效率高且用时较少。经PCR和Southern Blotting检测表明,转移DNA(transferred DNA,T-DNA)中的潮霉素抗性基因hph已整合到转化子基因组中。 展开更多

关键词 平菇 根癌农杆菌 hph基因 高渗 共培养

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犊牛前胸腺素α基因在大肠埃希菌中的表达及活性分析 被引量：2

6

作者 魏艳丽 李红梅 +3 位作者 任艳 智庆文 张显升 杨合同 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期56-60,共5页

以RT-PCR法扩增犊牛前胸腺素α基因(prothymosin-α,ProT-α),与原核表达载体pGEX-4T-1连接生成重组质粒pGEX/ProT-α,再将重组表达质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)。重组菌经IPTG诱导后表达的GST-ProT-α融合蛋白主要存在于细菌裂解液中。... 以RT-PCR法扩增犊牛前胸腺素α基因(prothymosin-α,ProT-α),与原核表达载体pGEX-4T-1连接生成重组质粒pGEX/ProT-α,再将重组表达质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)。重组菌经IPTG诱导后表达的GST-ProT-α融合蛋白主要存在于细菌裂解液中。SDS-PAGE电泳表明,GST—ProT-α融合蛋白表达量较高,分子量为38 ku;Western-blot和动物细胞试验表明,该产物能与胸腺素α1抗体发生特异性免疫反应,并可显著提高小鼠脾细胞增殖率和NK细胞杀伤活性。 展开更多

关键词 前胸腺素基因 重组质粒 表达 活性分析

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一株盖姆斯木霉TW20050的鉴定及功能评价 被引量：2

7

作者 陈凯 李纪顺 +4 位作者 扈进冬 尹姗姗 张广志 赵晓燕 杨合同 《科学技术与工程》 北大核心 2016年第18期156-160,共5页

明确木霉菌株TW20050的分类地位,并评价其生物学功能。通过形态学特征结合ITS、tef1及rpb2序列分析进行种类鉴定,利用菌丝生长速率法测定菌株的抑菌能力,利用透明圈大小定性检测菌株的水解酶活性。结果表明:菌株TW20050的形态学特征与Tr... 明确木霉菌株TW20050的分类地位,并评价其生物学功能。通过形态学特征结合ITS、tef1及rpb2序列分析进行种类鉴定,利用菌丝生长速率法测定菌株的抑菌能力,利用透明圈大小定性检测菌株的水解酶活性。结果表明:菌株TW20050的形态学特征与Trichoderma gamsii一致,其ITS、tef1和rpb2序列与Trichoderma gamsii的同源性均达到99%以上,在以rpb2构建的系统发育进化树中,TW20050与Trichoderma gamsii strain S488[KJ665270.1]位于同一分支。菌株TW20050在PDA平板上对10种植物病原真菌均有抑制作用,对终极腐霉的抑制率最高,达92.0%。菌株TW20050具有蛋白酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶及纤维素酶活性,其中蛋白酶活性和纤维素酶活性较高,透明圈宽度分别为9.8 mm和6.5 mm。综合形态学特征和序列分析,将菌株TW20050鉴定为盖姆斯木霉。菌株TW20050不但对植物病原真菌具有广谱抗性,而且具有多种水解酶活性,是一株较有潜力的生物防治菌株。 展开更多

关键词 TW20050 盖姆斯木霉 抑菌能力 水解酶活性

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龙脑香植物丛枝菌根真菌多样性 被引量：3

8

作者 石兆勇 王发园 魏艳丽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第14期4195-4196,共2页

概述了龙脑香科植物根际丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,简称AM)真菌的物种多样性,其寄主龙脑香科植物的多样性以及龙脑香科植物对AM真菌多样性的影响。到目前为止,在龙脑香科植物根际共报道了5属50种AM真菌,而与AM真菌共生的龙脑香科... 概述了龙脑香科植物根际丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,简称AM)真菌的物种多样性,其寄主龙脑香科植物的多样性以及龙脑香科植物对AM真菌多样性的影响。到目前为止,在龙脑香科植物根际共报道了5属50种AM真菌,而与AM真菌共生的龙脑香科植物则已经报道了24种,隶属于5个属。 展开更多

关键词 龙脑香科 丛枝菌根真菌 寄主植物 多样性

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产碱性纤维素酶芽孢杆菌ZA-05的分离及功能基因克隆 被引量：2

9

作者 魏艳丽 李红梅 +2 位作者 李纪顺 扈进冬 杨合同 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第18期3859-3863,共5页

从造纸污泥中分离到一株芽孢杆菌ZA-05,该菌可产生内切β-1,4-葡聚糖酶酶活性,且在碱性条件下酶活较高,经生理生化和分子生物学鉴定,该菌株为淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);根据GenBank登录的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因(... 从造纸污泥中分离到一株芽孢杆菌ZA-05,该菌可产生内切β-1,4-葡聚糖酶酶活性,且在碱性条件下酶活较高,经生理生化和分子生物学鉴定,该菌株为淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);根据GenBank登录的内切-β-1,4-葡聚糖酶基因(DQ782954.1,M28332.1,AY859492.1)的同源性序列,利用PCR方法克隆到该菌株的功能基因,并对其进行测序。测序结果显示其全长为1 500 bp,推测其含499个氨基酸。 展开更多

关键词 淀粉液化芽孢杆菌 分离鉴定 碱性纤维素酶 基因克隆

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犊牛前胸腺素α基因的克隆及表达载体的构建和鉴定 被引量：1

10

作者 李红梅 魏艳丽 +5 位作者 任艳 智庆文 张凤英 王少杰 杨合同 张显升 《中兽医医药杂志》 2006年第2期40-43,共4页

关键词 胸腺素Α1 表达载体 鉴定 构建 克隆 基因 犊牛 白细胞介素 免疫系统 补体C3

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木霉几丁质酶基因克隆及植物转化载体构建

11

作者 孙红星 黄玉杰 +2 位作者 杨合同 夏洪志 张新建 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期21-26,共6页

利用PCR技术从绿色木霉LTR-2(Trichoderma virede)基因组DNA中扩增到一段序列,测序结果表明,该编码基因片段大小为1508 bp,其中包括一个1459 bp的开放阅读框,起始密码子位于45 bp,终止密码子位于1501 bp,共编码氨基酸424个。在Genbank... 利用PCR技术从绿色木霉LTR-2(Trichoderma virede)基因组DNA中扩增到一段序列,测序结果表明,该编码基因片段大小为1508 bp,其中包括一个1459 bp的开放阅读框,起始密码子位于45 bp,终止密码子位于1501 bp,共编码氨基酸424个。在Genbank中进行序列比对,发现该序列同已发表的Trichoderma viride 42 ku几丁质酶氨基酸序列具有99%的同源性。将该片段同pCAMBLA1300中的35S启动子和35S-polyA终止子连接后,插入载体pCAMBIA1302多克隆位点中,构建成植物转化载体,最后将构建好的载体pCHI1302- 42通过转化导入根癌农杆菌LBA4404中,为进一步构建转基因植物奠定了基础。 展开更多

关键词 绿色木霉LTR-2 几丁质酶 克隆 转化 载体

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1-(4-氯苯胺基)-4-(4-吡啶甲基)-2,3-二氮杂萘琥珀酸盐的合成与抑制肿瘤活性

12

作者 陈贯虹 王加宁 +1 位作者 孔学 刘可春 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1375-1378,共4页

研究了1-(4-氯苯胺基)-4-(4-吡啶甲基)-2,3-二氮杂萘琥珀酸盐的合成工艺,采用苯酞和吡啶甲醛为起始原料,经加成、重排、取代和成盐4步反应得到目标化合物。中间体及目标化合物通过1H NMR、MS和HPLC进行了表征。重结晶纯化后的目标化合... 研究了1-(4-氯苯胺基)-4-(4-吡啶甲基)-2,3-二氮杂萘琥珀酸盐的合成工艺,采用苯酞和吡啶甲醛为起始原料,经加成、重排、取代和成盐4步反应得到目标化合物。中间体及目标化合物通过1H NMR、MS和HPLC进行了表征。重结晶纯化后的目标化合物纯度为98.1%。对荷瘤(人大肠癌HT 29细胞)裸鼠的抑癌活性测定表明,该化合物具有明显的抑制肿瘤生长作用。 展开更多

关键词 氯苯胺基(甲基吡啶基)二氮杂萘琥珀酸盐 化学合成 抑制肿瘤活性

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玉米19 kD醇溶蛋白启动子克隆与植物表达载体构建 被引量：1

13

作者 李慧伦 魏艳丽 +3 位作者 李红梅 扈进冬 李纪顺 杨合同 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第13期2775-2779,共5页

从玉米自交系9801基因组DNA中克隆了玉米19 kD醇溶蛋白基因(ze19)启动子,将其连接到pMD18-T载体上。测序结果表明该序列与已报道序列同源性为94%,包含TATAbox、CAATbox启动子基本元件以及GCN4、skn-1、prolamin box、-300 element等参... 从玉米自交系9801基因组DNA中克隆了玉米19 kD醇溶蛋白基因(ze19)启动子,将其连接到pMD18-T载体上。测序结果表明该序列与已报道序列同源性为94%,包含TATAbox、CAATbox启动子基本元件以及GCN4、skn-1、prolamin box、-300 element等参与调节玉米醇溶蛋白表达及活性的顺式元件。将克隆的ze19启动子取代质粒pBI121中的35 S启动子,成功构建了由ze19启动子驱动gus报告基因的植物表达载体pBIze19。利用土壤杆菌介导法将构建好的重组质粒pBIze19转入烟草中,为进一步研究该启动子组织特异性表达奠定了基础。 展开更多

关键词 ze19启动子 土壤杆菌介导法 植物表达载体

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