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免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用 被引量:50
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作者 崔治中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期417-421,共5页
根据近几年各地大型鸡场不同类型病鸡的实验室鉴别诊断结果,结合国内外的研究进展,本文对不同免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用做了全面的分析和探索。现有资料表明,不同的免疫抑制性病毒的亚临床感染在规模化畜禽... 根据近几年各地大型鸡场不同类型病鸡的实验室鉴别诊断结果,结合国内外的研究进展,本文对不同免疫抑制性病毒多重感染在鸡群疫病发生和流行中的作用做了全面的分析和探索。现有资料表明,不同的免疫抑制性病毒的亚临床感染在规模化畜禽群体中是非常普遍的,但往往只有在同一个体发生二重或多重感染时,在它们的相互作用下对个体和群体造成的免疫抑制和其它病理反应才比较明显。在此基础上,本文提出了"条件致病性病毒"的概念,并对其含义和内涵作了讨论。这一观念的引入,可能有助于理解和解释高密度饲养鸡群中疫病的复杂性及其控制的艰难性。鸡群中的免疫抑制性病毒的多重感染造成一部分个体处于"不完全免疫状态",使许多已经多次强化免疫的鸡场中仍有部分个体成为A类病病毒侵袭的对象并成为新的传染源,也容易造成在"免疫选择压"作用下病毒的抗原变异。此外,同一个个体的多重病毒感染,为病毒间通过基因重组产生新病毒创造了条件。 展开更多
关键词 免疫 抑制性病毒 多重感染 鸡群 疫病发生 流行特点 临床感染 规模养殖 免疫抑制 病理反应
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B亚群禽白血病病毒SDAU09C2株的TCID_(50)与p27抗原之间的相关性研究 被引量:1
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作者 李薛 董宣 +2 位作者 赵鹏 牛星 崔治中 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期14-17,共4页
为了研究B亚群禽白血病病毒(ALV-B)的半数细胞培养物感染量(TCID50)与p27抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)的S/P值之间的相关性,本试验将ALV-B SDAU09C2株接种鸡胚成纤维细胞(CEF细胞),换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID50值与p27抗原... 为了研究B亚群禽白血病病毒(ALV-B)的半数细胞培养物感染量(TCID50)与p27抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)的S/P值之间的相关性,本试验将ALV-B SDAU09C2株接种鸡胚成纤维细胞(CEF细胞),换维持液后连续10d取样,检测10d的TCID50值与p27抗原的S/P值之间的相关性;同时,将该毒株在DF-1细胞系上传代至20代,取其中的第1、5、10、15和20代分别进行TCID50滴度的测定和p27抗原检测。结果表明,在CEF细胞上接种的ALV-B SDAU09C2株连续10d的TCID50值与p27抗原之间存在显著的正相关(r=0.94002;P<0.0001);在DF-1细胞系上传的不同代数之间也呈显著正相关(r=0.96449;P=0.0080)。由此可推测ALV-B的TCID50与p27抗原呈显著正相关,可以用ELISA法测得的p27抗原的S/P值来估测病毒的TCID50值。 展开更多
关键词 B亚群禽白血病病毒 TCID50 P27抗原 Pearson相关
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新农科背景下畜牧兽医人才培养融入思政元素的实践探究——以山东农业大学动物科技学院动物解剖学课程教学为例 被引量:1
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作者 邱建华 蔡玉梅 +3 位作者 黄丽波 侯衍猛 李宁 马兰婷 《黑龙江动物繁殖》 2022年第4期53-56,共4页
课程思政是高校人才培养和教育教学的重要内容,目标就是要培养德才兼备的社会主义建设者和接班人。作为高等农业院校动物科学、动物医学等专业的首门主干专业基础课程,动物解剖学与专业其他课程有着密切的联系,是学好其他专业课程必不... 课程思政是高校人才培养和教育教学的重要内容,目标就是要培养德才兼备的社会主义建设者和接班人。作为高等农业院校动物科学、动物医学等专业的首门主干专业基础课程,动物解剖学与专业其他课程有着密切的联系,是学好其他专业课程必不可少的基础。文章旨在开展思政教育融入动物解剖学课程教学研究,积极发挥教师教书育人的主体责任,牢记“为党育人,为国育才”使命,引导教师捕捉解剖学知识与思政内容的结合点,提升高校教师课程思政意识和能力,促进课程与思政同向同行,厚植学生“兴农报国”情怀,不断提高教学水平和学生的思想道德水平,以适应新农科建设背景下高水平畜牧兽医人才培养的需要。 展开更多
关键词 动物解剖学 教学 思政元素 融合 教书育人 实践探究
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兔干扰素研究进展
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作者 孙弘宇 栾元金 +5 位作者 宋丹丹 王莹 成子强 郭慧君 黄兵 李宏梅 《中国草食动物科学》 CAS 2022年第1期52-55,共4页
干扰素因其抗病毒、抗肿瘤、抗寄生虫活性及免疫调节作用被广泛关注和研究。兔干扰素的研究与其他动物干扰素的研究相比较为落后。文章综述了兔干扰素的分类、原核表达、真核表达、抗病毒活性的研究进展,并结合兔干扰素的相关研究进展... 干扰素因其抗病毒、抗肿瘤、抗寄生虫活性及免疫调节作用被广泛关注和研究。兔干扰素的研究与其他动物干扰素的研究相比较为落后。文章综述了兔干扰素的分类、原核表达、真核表达、抗病毒活性的研究进展,并结合兔干扰素的相关研究进展进行了展望。 展开更多
关键词 兔干扰素 原核表达 真核表达 抗病毒活性
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鸭坦布苏病毒山东流行株的分离鉴定及其基因组序列分析 被引量:2
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作者 赵君 姜胜男 +3 位作者 李刚 杨玉栋 李宁 刘思当 《中国动物检疫》 CAS 2021年第1期35-42,共8页
为了解山东省鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的流行与变异情况,对2018年下半年至2019年上半年泰安、济宁和淄博等地送检的临床病鸭样品进行了DTMUV病原学检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分离株的全基因组序列分析。结果显... 为了解山东省鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)的流行与变异情况,对2018年下半年至2019年上半年泰安、济宁和淄博等地送检的临床病鸭样品进行了DTMUV病原学检测,并对阳性病料进行病毒分离鉴定及分离株的全基因组序列分析。结果显示:从102份样品中,共检测到8份DTMUV阳性,阳性率检出率为7.8%,从阳性病料中分离到3株DTMUV分离株;3个分离株基因全长均为10993 bp,彼此间的氨基酸同源性为99.2%~99.3%,与24个参考毒株的同源性为95.8%~99.9%,均属于中国株I型;与参考毒株相比,分离株的核衣壳蛋白C、囊膜蛋白E和非结构蛋白NS1的同源性相对较低,分别为86.1%~99.2%,95.0%~99.4%和92.3%~99.7%,同时存在数量不等的氨基酸突变位点,但关键的蛋白结构和潜在的糖基化位点无差异。结果表明,DTMUV在山东部分地区仍有流行,但流行毒株基因结构及致病特性与经典毒株相比无明显变化,但应持续关注和深入研究。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 分离鉴定 序列分析 遗传进化
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鸡IL-18cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达 被引量:9
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作者 胡敬东 崔治中 赵宏坤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期264-268,共5页
运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的Ch... 运用RT PCR方法,从经脂多糖(LPS)诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系 MDCC MSB1 总 RNA中扩增得到了鸡白细胞介素18(Chicken interleukin 18,ChIL 18)成熟蛋白基因的 cDNA,并将其克隆到 pMD18 T载体上。DNA序列测定表明,克隆得到的ChIL 18 cDNA与国外报道的完全一致,包括终止密码子在内其编码区的长度为510bp,编码169个氨基酸残基的蛋白质。将ChIL 18 成熟肽段编码区定向克隆到原核表达载体 pGEX 6P 1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,构建成原核表达质粒 pGEX ChIL18。该质粒的 BL21(DE3)LysS转化菌在 IPTG的诱导下可高效表达GST ChIL18基因融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的32%。 展开更多
关键词 IL-18 克隆 DNA GST 诱导 编码区 白细胞介素18 高效表达 原核表达质粒 IPTG
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禽白血病/肉瘤病毒肿瘤基因及其与致肿瘤机制的关系 被引量:5
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作者 陈浩 王一新 +3 位作者 赵鹏 李建亮 李德庆 崔治中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期336-342,共7页
根据致瘤机制的差异,禽白血病/肉瘤病毒可以分为两大类,其差异主要在于所表达肿瘤基因的不同。慢性转化型病毒通过插入启动机制间接激活细胞原癌基因,肿瘤形成速度缓慢;急性转化型病毒则是直接转录表达病毒自身基因组中的病毒肿瘤基因,... 根据致瘤机制的差异,禽白血病/肉瘤病毒可以分为两大类,其差异主要在于所表达肿瘤基因的不同。慢性转化型病毒通过插入启动机制间接激活细胞原癌基因,肿瘤形成速度缓慢;急性转化型病毒则是直接转录表达病毒自身基因组中的病毒肿瘤基因,从而诱导肿瘤的快速形成。作者拟对禽白血病/肉瘤病毒肿瘤基因及其与致肿瘤机制的关系进行综述。 展开更多
关键词 细胞原癌基因 病毒肿瘤基因 插入启动 急性转化型病毒
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猪瘟和猪蓝耳病混合感染的诊断与防控 被引量:4
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作者 牛绪东 冯学俊 +3 位作者 任禾 马洪超 张元瑞 刘建柱 《猪业科学》 2018年第3期82-85,共4页
猪瘟(CSF)是由黄病毒科瘟病毒属猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性、热性、高度传染性疾病[1],是世界动物卫生组织(OIE)规定通报的疫病;猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又名猪蓝耳病,是动脉炎病毒科动脉炎病毒属猪繁殖与呼吸综合征病毒... 猪瘟(CSF)是由黄病毒科瘟病毒属猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性、热性、高度传染性疾病[1],是世界动物卫生组织(OIE)规定通报的疫病;猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又名猪蓝耳病,是动脉炎病毒科动脉炎病毒属猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种繁殖障碍和呼吸道症状的疾病,是OIE规定通报的疫病,我国规定为二类动物疫病[2]。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪蓝耳病 猪繁殖与呼吸综合征病毒 混合感染 世界动物卫生组织 传染性疾病 PRRSV 动脉炎病毒
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在新农科建设背景下动物解剖学教学改革实践与专业人才培养的探索 被引量:1
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作者 邱建华 蔡玉梅 +2 位作者 杨萍萍 李宁 马兰婷 《黑龙江动物繁殖》 2022年第5期51-55,共5页
为适应新农科建设对人才培养的要求,笔者针对当前动物解剖学课程教学中存在的问题,诸如抽象难学、学时缩减、素材资源稀缺、学习兴趣不高、专业思想不稳固等开展了教学改革与实践。基于SRT项目和教学科研基地构建“产教融合、科教协同... 为适应新农科建设对人才培养的要求,笔者针对当前动物解剖学课程教学中存在的问题,诸如抽象难学、学时缩减、素材资源稀缺、学习兴趣不高、专业思想不稳固等开展了教学改革与实践。基于SRT项目和教学科研基地构建“产教融合、科教协同”人才培养模式的契机,课程组利用标本技术和数字技术丰富标本资源,利用“互联网+”技术构建“线上线下混合教学模式”,利用课程思政引导学生学农爱农。结果表明:改革后的教学模式激发了学生的想象力、创造力和学习兴趣,改善了教学效果;厚植了学生的专业思想,激发了学生的专业兴趣和使命担当,彰显了动物解剖学作为畜牧兽医专业首门专业基础课课程的重要性,为实现新农科建设对畜牧兽医人才培养的目标奠定了专业基础。 展开更多
关键词 新农科 畜牧兽医 动物解剖学 教学改革 人才培养
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B亚群禽白血病病毒灭活疫苗的免疫效力分析
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作者 李薛 李卫华 +3 位作者 赵鹏 崔治中 王鑫 董宣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1788-1794,共7页
本研究旨在制备B亚群禽白血病的灭活疫苗,探索能否通过种鸡群疫苗免疫减少带毒率,从而加快禽白血病净化。将B亚群禽白血病病毒SDAU09C2株在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续培养复制大量病毒,制备灭活疫苗,用该疫苗免疫9只产蛋祖代鸡,同时设... 本研究旨在制备B亚群禽白血病的灭活疫苗,探索能否通过种鸡群疫苗免疫减少带毒率,从而加快禽白血病净化。将B亚群禽白血病病毒SDAU09C2株在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续培养复制大量病毒,制备灭活疫苗,用该疫苗免疫9只产蛋祖代鸡,同时设未免疫种鸡对照。收取种蛋孵化,对孵出雏鸡接种SDAU09C2,检测和比较有和无母源抗体鸡的病毒血症、泄殖腔p27、抗体动态。该疫苗在所有经免疫的成年鸡(9/9)诱发抗体反应,在三免后第3周产生的抗体水平最高,ELISA检测S/P值在1.69~1.89(阳性临界值为0.4),且维持4周以上后仍未下降。经过疫苗免疫过的母鸡在其抗体水平最高的前后1周内收集种蛋进行孵化,其雏鸡含母源抗体阳性率的在70%(12/17)左右。雏鸡1日龄攻毒,含母源抗体的12只雏鸡中只有4只检出病毒血症,且持续时间都很短。所有9只不含母源抗体的雏鸡在攻毒后4~8周内全部出现病毒血症,而且在观察期内呈现持续性病毒血症。该疫苗能使全部产蛋祖代鸡产生较高水平的特异性抗体,为雏鸡提供母源抗体,有效预防或减缓ALV-B的早期感染。 展开更多
关键词 B亚群禽白血病病毒 细胞灭活疫苗 免疫保护
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六十二株水貂源大肠杆菌分离株耐药表型与耐药基因及克隆菌群分析 被引量:5
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作者 蒋智宇 王凡 +6 位作者 杨溢 衣首静 杨杰 鞠孜敬 宋艳 朱国强 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2498-2508,共11页
为了调查诸城地区某水貂养殖场粪便源大肠杆菌的表观及其分子特征,采集某个水貂养殖场的水貂粪便进行大肠杆菌分离鉴定,对分离鉴定的大肠杆菌进行血清型鉴定和对14种常见抗菌药物的耐药表型鉴定;使用PCR检测耐药基因以及Ⅰ整合子基因盒... 为了调查诸城地区某水貂养殖场粪便源大肠杆菌的表观及其分子特征,采集某个水貂养殖场的水貂粪便进行大肠杆菌分离鉴定,对分离鉴定的大肠杆菌进行血清型鉴定和对14种常见抗菌药物的耐药表型鉴定;使用PCR检测耐药基因以及Ⅰ整合子基因盒的携带情况,利用多位点序列分型(MLST)来分析菌株的克隆关系并构建系统发育树来分析相同克隆群菌株的遗传相似性。结果显示,自82份水貂粪便样品分离到62株大肠杆菌,分离率75.61%;大肠杆菌分离株对AMP和TET的耐药率超过90%,多重耐药菌株(MDR)占比为85.48%。PCR检测到5类耐药基因的存在,qnrS检出率最高,为61.29%(38/62);aaC2、aaC4、sul1和aac(6′)-Ib-cr耐药基因与菌株产生相应的耐药抗性存在一致性(P<0.01)。分离菌株中Ⅰ类整合子可变区域的优势结构为dfrA27-aadA2-qnrA。鉴定出致病性血清型的存在,且对应菌株都具有多重耐药性,优势血清型为O104:H4。分离株中存在33个STs,ST46为优势STs(16.13%),具有3个主要克隆群,依次为CC10、CC46和CC176;与致病性相关菌株的STs和人源大肠杆菌具有共同的遗传背景。本研究表明,养殖场的水貂受到致病性和多重耐药性大肠杆菌的污染,相同克隆群菌株的耐药基因分布具有多态性,表观特征差异明显。 展开更多
关键词 水貂源大肠杆菌 致病性血清型 耐药基因 克隆群 系统发育树
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表达禽网状内皮组织增生病病毒env基因的重组马立克病毒的生物学特性 被引量:2
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作者 周忠文 林桂芳 +3 位作者 王好好 苏帅 崔治中 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1482-1491,共10页
旨在构建能够表达禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)env基因的重组马立克病毒(Marek′s disease virus,MDV),并对其生物学特性进行初步研究。以REV SNV株DNA为模板,PCR扩增其env基因,克隆进真核表达载体pcDNA3... 旨在构建能够表达禽网状内皮组织增生病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)env基因的重组马立克病毒(Marek′s disease virus,MDV),并对其生物学特性进行初步研究。以REV SNV株DNA为模板,PCR扩增其env基因,克隆进真核表达载体pcDNA3.1(+);以其为模板,PCR扩增整个REVenv基因真核表达盒并与卡那霉素抗性基因分别克隆进pUC18载体;以其为模板,利用含有MDV SC9-1株meq基因位点两侧同源臂的引物经PCR扩增REVenv真核表达盒以及卡那霉素抗性基因,利用Red E/T同源重组技术插入SC9-1的meq位点,最终利用阿拉伯糖诱导表达flp重组酶,敲除卡那霉素抗性基因,阳性重组质粒命名为SC9-env BAC。提取SC9-env BAC质粒转染CEF细胞,拯救重组MDV,利用MDV单抗H19以及REV单抗11B118经间接免疫荧光试验鉴定阳性病毒,命名为SC9-env。分析比较SC9-env在CEF细胞上的复制水平,利用动物试验初步评价SC9-env对SPF鸡的致病性以及SC9-env对SPF鸡感染MDV、REV的免疫保护效果。结果表明,利用同源重组技术构建的重组MDV SC9-env能够稳定表达REV env蛋白,且复制水平与亲本病毒SC9-1相似;该重组毒接种SPF鸡没有明显的致病性,且对rMd5的强毒攻击提供92%的免疫保护,与SC9-1差异不显著;SC9-env显著降低REV感染SPF鸡所引起的体重减轻以及灭活苗抗体下降。构建的表达REVenv的重组MDV对感染MDV、REV的SPF鸡具有良好的免疫保护效果。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生病病毒 ENV基因 同源重组 马立克病毒 生物学特性
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植物性神经对围着床期大鼠子宫中肥大细胞和组织胺含量的影响
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作者 黄丽波 张秀霞 +4 位作者 范晓杰 侯衍猛 姜淑贞 鲁璇 袁学军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2409-2415,共7页
本研究旨在以肥大细胞和组织胺为指标探讨大鼠围着床期植物性神经与子宫局部细胞免疫的关系。选择180日龄,体重为300~350g的性成熟Wistar雌性大鼠90只,随机分为对照、假手术处理和手术处理(n=30)3组,手术处理为孕前切除支配子宫的植物... 本研究旨在以肥大细胞和组织胺为指标探讨大鼠围着床期植物性神经与子宫局部细胞免疫的关系。选择180日龄,体重为300~350g的性成熟Wistar雌性大鼠90只,随机分为对照、假手术处理和手术处理(n=30)3组,手术处理为孕前切除支配子宫的植物性神经(肠系膜后神经节节后纤维和盆神经丛节前纤维),伤口愈合,开始合笼试验。在妊娠4~6d,无菌条件下,取出大鼠子宫和卵巢,观察排卵、胚胎着床情况变化,通过细胞染色和ELISA方法测定肥大细胞数量和组织胺释放量。结果表明:正常大鼠子宫中组织胺自发释放量和总含量在着床(d5)时最低。肥大细胞数量也呈现相似的变化。神经切除后,自发释放组织胺量在妊娠4~6d数值明显下降,且在妊娠4、6d与对照组相比较差异显著(P<0.05);可释放组织胺总含量在着床前(d4)极显著降低(P<0.01),且胚胎着床数量明显减少或延迟;肥大细胞数量在着床前后与组织胺总含量有相似的变化。这些结果说明,切除神经降低了着床前肥大细胞数量和组织胺水平,改变了子宫局部免疫水平,进而引起了胚胎着床减少或延迟。综上表明,支配子宫的植物性神经可在着床前上调子宫肥大细胞数量和组织胺水平,控制子宫局部免疫水平,在胚胎着床中起重要调控作用。 展开更多
关键词 大鼠 子宫 植物性神经 肥大细胞 组织胺
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对鸡群A/B亚群禽白血病病毒抗体ELISA检测阳性率的可靠性评估 被引量:7
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作者 段伦涛 赵鹏 +2 位作者 董宣 王一新 崔治中 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第6期197-203,共7页
为了评估某些批次的禽白血病病毒(ALV)抗体商品化ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒(ALV-A/B)抗体阳性率的可靠性,使用同一批次试剂盒,对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标(<1%)的A类鸡场及往年ALV-A/B抗体检测阳性率不达... 为了评估某些批次的禽白血病病毒(ALV)抗体商品化ELISA检测试剂盒在检测鸡群中A/B亚群禽白血病病毒(ALV-A/B)抗体阳性率的可靠性,使用同一批次试剂盒,对往年ALV-A/B抗体检测阳性率达标(<1%)的A类鸡场及往年ALV-A/B抗体检测阳性率不达标(>1%)的B类鸡场所送检样品进行初检,在A类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的8份阳性样品,在B类鸡场初检阳性样品中挑选S/P值最高的40份样品,再使用相同批次的试剂盒将每个初检阳性样品做3个孔的重复检测,并以上述48份样品为一抗同时做间接免疫荧光试验(IFA),系统比较了IFA和ELISA 2种方法检测结果的一致性。结果发现,A类鸡场初检为阳性的8份样品经复检和IFA检测均变为阴性;B类鸡场4份样品(4/40)ELISA复检和IFA结果均变为阴性,36份样品(36/40)ELISA复检仍为阳性,但其中20份呈IFA阳性,16份呈IFA阴性,结果表明某些批次的试剂盒在特异性和稳定性方面存在一定问题。提示,相关企业在进行大批量样本检测时,ELISA阳性样品需结合IFA进行结果判定,以提高检测的准确性。 展开更多
关键词 A B亚群禽白血病毒 间接免疫荧光 ELISA 稳定性 特异性
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一例牙鲆淋巴囊肿病例的诊断及病毒MCP基因遗传进化分析 被引量:1
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作者 孟凡亮 曹龙龙 +5 位作者 焦秋林 李焱 王宏宇 刘照虎 马梓承 刘思当 《中国动物检疫》 CAS 2019年第10期98-103,共6页
2019年1月,山东省某牙鲆鱼场出现疑似淋巴囊肿病例。患病鱼体表长有灰白色菜花样瘤状物,死亡率超过30%,给养殖场造成了较为严重的经济损失。为确定发病原因,对该鱼场病死鱼进行了病理组织学诊断和病毒检测,并对病毒MCP基因进行了序列测... 2019年1月,山东省某牙鲆鱼场出现疑似淋巴囊肿病例。患病鱼体表长有灰白色菜花样瘤状物,死亡率超过30%,给养殖场造成了较为严重的经济损失。为确定发病原因,对该鱼场病死鱼进行了病理组织学诊断和病毒检测,并对病毒MCP基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果显示:眼观及组织学病变符合淋巴囊肿病的病变特征;所检测到的病毒与选定的参考毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为78.7%~99.9%和86.8%~100%。MCP基因遗传进化分析显示,检测到的病毒与LCDV-C、JF00Kuma、JF03Yoshi、JF03GunNeA、JF、LCDV-K1等毒株同属于淋巴囊肿病毒基因II型,且与我国分离株LCDV-C有较高的同源性。经综合诊断,确定该流行病由淋巴囊肿病毒基因II型所致。该研究为该病的综合诊断及流行病学调查提供了新资料,为下一步进行该病毒相关分子生物学研究以及疫苗制备等提供了理论依据。 展开更多
关键词 淋巴囊肿病毒 牙鲆 综合诊断 MCP基因 病理组织学 遗传进化分析
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检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法
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作者 禇颖 马文杰 +4 位作者 胡卫国 陈茹 邱建华 郭慧君 李宏梅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期865-870,共6页
为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免... 为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。 展开更多
关键词 TRIM25 多克隆抗体 免疫组化
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