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siRNA可降低IL-1β刺激椎间盘细胞所致凋亡敏感性 被引量：3
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作者 韩敦富 尹荷珊 +4 位作者 王延 王鹏云 汪震 魏超 时明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期64-68,共5页
目的明确siRNA是否可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,并初步探讨其机制。方法用阴性对照siRNA转染原代大鼠腰椎间盘细胞后,用含10ng/ml IL-1β的1%胎牛血清(FBS)培养基和被转染椎间盘细胞共培养,分别在4、8、16、32 ... 目的明确siRNA是否可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,并初步探讨其机制。方法用阴性对照siRNA转染原代大鼠腰椎间盘细胞后,用含10ng/ml IL-1β的1%胎牛血清(FBS)培养基和被转染椎间盘细胞共培养,分别在4、8、16、32 h检测其对Fas受体(Fas)表达的影响。利用Fas-siRNA和阴性对照siRNA分别对原代大鼠椎间盘细胞进行转染48 h后,实验分组和处理:共分5组,N、N-20 ng、N-IL为阴性对照siRNA转染细胞,Si-20 ng、Si-IL为Fas-siRNA2转染的细胞。N为对照组,只加1%FBS培养基; N-20 ng和Si-20 ng在1%FBS培养基培养8 h后,更换为含20 ng/ml Fas配体(Fas L)的1%FBS培养基; NIL和Si-IL:与10 ng/ml IL-1β在1%FBS培养基中培养8 h后,更换为含20 ng/ml Fas L的1%FBS培养基;以上各组加入20 ng/ml Fas L后均继续培养24 h,观察细胞的凋亡情况,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot分别检测Fas mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)与10 ng/ml IL-1β共培养的阴性对照siRNA转染细胞的Fas mRNA在4 h时开始升高,但32 h时才出现统计学差异;而蛋白检测各时间点均未出现表达差异。(2)经IL-1β预处理的Si-IL、N-IL细胞组较相应的未经IL-1β预处理的Si-20 ng、N-20 ng细胞组,细胞凋亡率均升高; Fas-siRNA转染的Si-IL细胞组较阴性siRNA转染的N-IL细胞组的细胞凋亡率明显下降。(3)细胞凋亡率与Fas的表达具有相关性。结论 siRNA可降低大鼠椎间盘细胞对IL-1β预刺激导致的凋亡敏感性,但其确切机制尚需进一步研究。 展开更多
关键词 椎间盘细胞 凋亡 SIRNA IL-1Β RNA干扰
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甲状旁腺素基因rs1459015多态性与老年性骨质疏松性骨折患者骨代谢标志物的相关性 被引量：11
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作者 王其飞 郑繁荣 +1 位作者 孙哲 张光武 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 2017年第6期561-565,共5页
随着我国人口老龄化发展,老年性骨质疏松症（senile osteoporosis,SOP）的发病率逐年升高[1],预计到2050年老年人口将增加到2.1亿[2],其中将有25%-70%患有骨质疏松。轻微创伤即可导致SOP患者发生骨质疏松性骨折。骨质疏松性骨折后致残... 随着我国人口老龄化发展,老年性骨质疏松症（senile osteoporosis,SOP）的发病率逐年升高[1],预计到2050年老年人口将增加到2.1亿[2],其中将有25%-70%患有骨质疏松。轻微创伤即可导致SOP患者发生骨质疏松性骨折。骨质疏松性骨折后致残率和致死率较高,相关文献报道患者髋部骨折后1年内病死率高达20%[3]。 展开更多
关键词 骨质疏松性骨折 老年性骨质疏松症 骨折患者 甲状旁腺素基因 骨代谢标志物 相关性 多态性 人口老龄化
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Fas配体对椎间盘细胞经典凋亡通路中关键因子的影响 被引量：3
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作者 韩敦富 解立俊 +2 位作者 吴海燕 胡法梅 尹荷珊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第12期1441-1444,共4页
目的明确Fas配体(FasL)介导的大鼠椎间盘细胞的确切凋亡途径。方法分离、培养大鼠腰椎间盘髓核细胞,分别与含不同浓度FasL(0、5、10、20、50 ng/ml)的1%胎牛血清(FBS)培养基共培养24 h,分别检测Fas,Caspase-8、9、3及Bid mRNA的表达水平... 目的明确Fas配体(FasL)介导的大鼠椎间盘细胞的确切凋亡途径。方法分离、培养大鼠腰椎间盘髓核细胞,分别与含不同浓度FasL(0、5、10、20、50 ng/ml)的1%胎牛血清(FBS)培养基共培养24 h,分别检测Fas,Caspase-8、9、3及Bid mRNA的表达水平,Caspase-8、9、3的酶活性以及线粒体膜电势的变化。结果髓核细胞与不同浓度FasL共培养24 h后,经Hoechst 33258染色均可观察到细胞凋亡,Caspase-8、3及Bid mRNA的表达水平,Caspase-8、3的酶活性均随FasL浓度的升高而升高;50 ng/ml的FasL可明显增强Caspase-9 mRNA的表达、Caspase-9的酶活性和线粒体膜电势。结论 FasL所诱发的椎间盘细胞凋亡主要通过膜途径进行,大剂量时可以激活线粒体途径。 展开更多
关键词 椎间盘细胞 凋亡 凋亡途径 FAS配体
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