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4种不同广玉兰基因组DNA提取方法的比较
被引量：
12
1
作者
陈永华
相阳
+4 位作者
张冬林
李志辉
陈亮明
彭婧
马倩
《中南林业科技大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期45-48,共4页
采用常规CTAB法、常规SDS法、改良CTAB法、改良SDS法4种方法对广玉兰(Magnolia grandiflora)叶片基因组DNA的提取进行比较,并进行ISSR-PCR检测,结果表明:改良的CTAB法提取的基因组DNA效果比常规CTAB法、常规和改良SDS法都好,提取DNA的...
采用常规CTAB法、常规SDS法、改良CTAB法、改良SDS法4种方法对广玉兰(Magnolia grandiflora)叶片基因组DNA的提取进行比较,并进行ISSR-PCR检测,结果表明:改良的CTAB法提取的基因组DNA效果比常规CTAB法、常规和改良SDS法都好,提取DNA的浓度和纯度高,无蛋白质和RNA等杂质影响,并且可以很好的应用于ISSR分子标记分析,ISSR-PCR反应体系中模板DNA的最佳浓度是30 ng/20μL.
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关键词
生物工程与技术
广玉兰
基因组DNA提取
方法
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职称材料
两种方法对广玉兰ISSR-PCR反应体系的优化比较
被引量：
8
2
作者
陈亮明
相阳
+4 位作者
张冬林
李志辉
陈永华
马倩
彭婧
《种子》
CSCD
北大核心
2008年第6期10-14,共5页
采用单因子和正交设计2种方法,对影响广玉兰ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引模板DNA)进行优化。结果表明:正交设计采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平与单因子试验找出影响因素最佳反应水平有一定差异,通过综合...
采用单因子和正交设计2种方法,对影响广玉兰ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引模板DNA)进行优化。结果表明:正交设计采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平与单因子试验找出影响因素最佳反应水平有一定差异,通过综合比较分析,最终建立了广玉兰ISSR-PCR的最佳反应体系:在20μl的反应体系中,TaqDNA聚合酶1.0U、Mg2+1.2～1.5mmol/L、dNTP1.80mmol/L、引物0.5～0.6μmol/L、30ng模板DNA、10×PCRbuffer。同时,通过PCR比较,确定延伸时间为2min,循环次数为35个较为合适,确定了引物最佳退火温度,得到了广玉兰ISSR-PCR反应的最佳扩增程序。
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关键词
广玉兰
ISSR—PCR
单因子试验
正交设计
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职称材料
题名
4种不同广玉兰基因组DNA提取方法的比较
被引量：
12
1
作者
陈永华
相阳
张冬林
李志辉
陈亮明
彭婧
马倩
机构
中南林业科技大学资源与环境学院
山东省济宁市园林管理局科研所
美国缅因大学
出处
《中南林业科技大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第3期45-48,共4页
基金
湖南省“芙蓉学者”专项基金(0595)
中南林业科技大学引进人才基金项目(06Y035)
文摘
采用常规CTAB法、常规SDS法、改良CTAB法、改良SDS法4种方法对广玉兰(Magnolia grandiflora)叶片基因组DNA的提取进行比较,并进行ISSR-PCR检测,结果表明:改良的CTAB法提取的基因组DNA效果比常规CTAB法、常规和改良SDS法都好,提取DNA的浓度和纯度高,无蛋白质和RNA等杂质影响,并且可以很好的应用于ISSR分子标记分析,ISSR-PCR反应体系中模板DNA的最佳浓度是30 ng/20μL.
关键词
生物工程与技术
广玉兰
基因组DNA提取
方法
Keywords
bioengineering, Magnolia grandiflora
genomic DNA extraction, methods
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S792 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
两种方法对广玉兰ISSR-PCR反应体系的优化比较
被引量：
8
2
作者
陈亮明
相阳
张冬林
李志辉
陈永华
马倩
彭婧
机构
中南林业科技大学资源与环境学院
山东省济宁市园林管理局科研所
出处
《种子》
CSCD
北大核心
2008年第6期10-14,共5页
基金
湖南省“芙蓉学者”专项基金(0595)
中南林业科技大学引进人才基金项目(06Y035)
文摘
采用单因子和正交设计2种方法,对影响广玉兰ISSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引模板DNA)进行优化。结果表明:正交设计采用直观分析法获得影响因素最佳反应水平与单因子试验找出影响因素最佳反应水平有一定差异,通过综合比较分析,最终建立了广玉兰ISSR-PCR的最佳反应体系:在20μl的反应体系中,TaqDNA聚合酶1.0U、Mg2+1.2～1.5mmol/L、dNTP1.80mmol/L、引物0.5～0.6μmol/L、30ng模板DNA、10×PCRbuffer。同时,通过PCR比较,确定延伸时间为2min,循环次数为35个较为合适,确定了引物最佳退火温度,得到了广玉兰ISSR-PCR反应的最佳扩增程序。
关键词
广玉兰
ISSR—PCR
单因子试验
正交设计
Keywords
Magnolia grandiflora
ISSR-PCR
single factor tests
orthogonal design.
分类号
S685.15 [农业科学—观赏园艺]
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被引量
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1
4种不同广玉兰基因组DNA提取方法的比较
陈永华
相阳
张冬林
李志辉
陈亮明
彭婧
马倩
《中南林业科技大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
12
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职称材料
2
两种方法对广玉兰ISSR-PCR反应体系的优化比较
陈亮明
相阳
张冬林
李志辉
陈永华
马倩
彭婧
《种子》
CSCD
北大核心
2008
8
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