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玄丹清金颗粒通过Hh-Ptch/Smo-Gli调节轴抑制肿瘤干细胞特性逆转奥希替尼耐药
1
作者
李洋
刘磊
林家茂
《华中科技大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第1期52-59,共8页
目的探讨玄丹清金颗粒对奥希替尼耐药的人肺腺癌PC9/OR细胞的逆转作用及机制。方法构建奥希替尼耐药的人肺腺癌细胞PC9/OR,CCK-8检测不同浓度奥希替尼对PC9和PC9/OR的增殖能力的影响及不同梯度浓度玄丹清金颗粒含药血清对PC9/OR增殖的影...
目的探讨玄丹清金颗粒对奥希替尼耐药的人肺腺癌PC9/OR细胞的逆转作用及机制。方法构建奥希替尼耐药的人肺腺癌细胞PC9/OR,CCK-8检测不同浓度奥希替尼对PC9和PC9/OR的增殖能力的影响及不同梯度浓度玄丹清金颗粒含药血清对PC9/OR增殖的影响,Western blot和qRT-PCR鉴定PC9/OR耐药性及肿瘤干细胞特性,软琼脂克隆形成实验检测细胞成球能力,侧群分选测定肿瘤干细胞比例,应用转录组测序筛选肿瘤干细胞相关调控通路并利用Western blot反向验证。结果与PC9相比,PC9/OR的奥希替尼IC_(50)值显著升高,奥希替尼对p-EGFR、p-ERK和p-RPS6的抑制被明显削弱,与干细胞特性相关的调控分子亦呈不同程度上调。CCK-8检测提示以培养液稀释的40%及以下浓度含药血清可排除大鼠血清的细胞毒性干扰。CCK-8及克隆形成实验提示奥希替尼与玄丹清金颗粒含药血清的联合组PC9/OR细胞存活率及成球能力显著下降。侧群分选证实联合组干细胞比例显著下调。RNA-seq发现与肿瘤干细胞调节相关的PTCH2、SMO、GLI1、GLI2、GLI3发生显著变化。反证实验发现联合组加入激活剂(purmorphamine,PM)后,克隆形成及细胞存活率升高,OCT4、NANOG、SOX2、SHH、SMO、GLI1、GLI2上调,PTCH2下调。结论玄丹清金颗粒能够通过抑制肿瘤干细胞特性逆转PC9/OR耐药,具体机制与调控Hh-Ptch/Smo-Gli调节轴相关。
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关键词
肿瘤干细胞
奥希替尼
耐药
玄丹清金颗粒
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职称材料
岗稔根正丁醇提取物对CCl4诱导小鼠肝纤维化中ERK/MAPK通路的影响
被引量：
2
2
作者
毕研蒙
胡正进
+1 位作者
王荣
刘媛
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期187-194,共8页
目的探讨岗稔根正丁醇提取物(N-butanol extraction of Rhodomyrtus tomentosa root,N-RHT)对肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及机制。方法采用血小板衍生生长因子(PDGF)诱导活化的肝星状细胞(HSC)模型,并以四氯化碳橄榄油溶液[25%,CCl_(4)...
目的探讨岗稔根正丁醇提取物(N-butanol extraction of Rhodomyrtus tomentosa root,N-RHT)对肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及机制。方法采用血小板衍生生长因子(PDGF)诱导活化的肝星状细胞(HSC)模型,并以四氯化碳橄榄油溶液[25%,CCl_(4)∶橄榄油=1∶3,2 mL/(kg·d)]腹腔注射建立小鼠肝纤维化模型。将C57BL/6小鼠分为5组:对照组、模型组、秋水仙碱(Colchicine)组、N-RHT低剂量和高剂量组(0.5 g/kg和1 g/kg)。对照组小鼠予以1.5 mL/(kg·d)纯橄榄油腹腔注射,余下各组小鼠均给予四氯化碳腹腔注射,3次/周,持续5周。苏木精-伊红、Masson和天狼星红染色观察肝脏病理变化情况;检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、羟脯胺酸(HYP)及PDGF的含量;Western blot法检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及STAT3、Akt、P44/42、P38及相应磷酸化蛋白的表达。结果细胞实验中,N-RHT可以抑制活化的肝星状细胞的增殖,减少肝星状细胞中α-SMA的表达(均P<0.01),下调肝星状细胞中磷酸化P44/42蛋白(p-P44/42)的表达(P<0.01)。动物实验中,与模型组比较,N-RHT可以改善CCl_(4)导致的肝纤维化病理损伤,减少肝组织中α-SMA的表达(P<0.05),增加血清中SOD、GSH-Px的含量(均P<0.05),降低血清中ALT、AST、PDGF、HYP以及MDA的含量(均P<0.05)。结论N-RHT具有改善CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制ERK/MAPK信号通路的激活有关。
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关键词
岗稔根提取物
肝星状细胞
肝纤维化
ERK/MAPK信号通路
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职称材料
题名
玄丹清金颗粒通过Hh-Ptch/Smo-Gli调节轴抑制肿瘤干细胞特性逆转奥希替尼耐药
1
作者
李洋
刘磊
林家茂
机构
山东
第一医科大学附属肿瘤医院
山东省
精准肿瘤学重点实验室
山东省济宁医学院中西医结合学院
山东
第一医科大学附属肿瘤医院肿瘤内科
出处
《华中科技大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第1期52-59,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81904186)
山东省自然科学基金创新发展联合基金项目(No.ZR2023LZY007)
山东省中医药重点学科建设项目(No.鲁卫中医药科教字[2022]4号)。
文摘
目的探讨玄丹清金颗粒对奥希替尼耐药的人肺腺癌PC9/OR细胞的逆转作用及机制。方法构建奥希替尼耐药的人肺腺癌细胞PC9/OR,CCK-8检测不同浓度奥希替尼对PC9和PC9/OR的增殖能力的影响及不同梯度浓度玄丹清金颗粒含药血清对PC9/OR增殖的影响,Western blot和qRT-PCR鉴定PC9/OR耐药性及肿瘤干细胞特性,软琼脂克隆形成实验检测细胞成球能力,侧群分选测定肿瘤干细胞比例,应用转录组测序筛选肿瘤干细胞相关调控通路并利用Western blot反向验证。结果与PC9相比,PC9/OR的奥希替尼IC_(50)值显著升高,奥希替尼对p-EGFR、p-ERK和p-RPS6的抑制被明显削弱,与干细胞特性相关的调控分子亦呈不同程度上调。CCK-8检测提示以培养液稀释的40%及以下浓度含药血清可排除大鼠血清的细胞毒性干扰。CCK-8及克隆形成实验提示奥希替尼与玄丹清金颗粒含药血清的联合组PC9/OR细胞存活率及成球能力显著下降。侧群分选证实联合组干细胞比例显著下调。RNA-seq发现与肿瘤干细胞调节相关的PTCH2、SMO、GLI1、GLI2、GLI3发生显著变化。反证实验发现联合组加入激活剂(purmorphamine,PM)后,克隆形成及细胞存活率升高,OCT4、NANOG、SOX2、SHH、SMO、GLI1、GLI2上调,PTCH2下调。结论玄丹清金颗粒能够通过抑制肿瘤干细胞特性逆转PC9/OR耐药,具体机制与调控Hh-Ptch/Smo-Gli调节轴相关。
关键词
肿瘤干细胞
奥希替尼
耐药
玄丹清金颗粒
Keywords
cancer stem cell
osimertinib
drug resistance
Xuandan Qingjin granule
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
岗稔根正丁醇提取物对CCl4诱导小鼠肝纤维化中ERK/MAPK通路的影响
被引量：
2
2
作者
毕研蒙
胡正进
王荣
刘媛
机构
山东省济宁医学院中西医结合学院
昆明市中医医院脾胃肝病科
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期187-194,共8页
基金
国家教育部产学合作协同育人项目(No.202102242041)
山东省医药卫生科技发展计划项目(No.202103030820)
+1 种基金
济宁医学院教师科研扶持基金项目(No.JYFC2019KJ022)
济宁医学院中西医结合治疗脾胃病重点学科项目(No.济医院字[2019]18号)。
文摘
目的探讨岗稔根正丁醇提取物(N-butanol extraction of Rhodomyrtus tomentosa root,N-RHT)对肝纤维化小鼠肝脏炎症的影响及机制。方法采用血小板衍生生长因子(PDGF)诱导活化的肝星状细胞(HSC)模型,并以四氯化碳橄榄油溶液[25%,CCl_(4)∶橄榄油=1∶3,2 mL/(kg·d)]腹腔注射建立小鼠肝纤维化模型。将C57BL/6小鼠分为5组:对照组、模型组、秋水仙碱(Colchicine)组、N-RHT低剂量和高剂量组(0.5 g/kg和1 g/kg)。对照组小鼠予以1.5 mL/(kg·d)纯橄榄油腹腔注射,余下各组小鼠均给予四氯化碳腹腔注射,3次/周,持续5周。苏木精-伊红、Masson和天狼星红染色观察肝脏病理变化情况;检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、羟脯胺酸(HYP)及PDGF的含量;Western blot法检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及STAT3、Akt、P44/42、P38及相应磷酸化蛋白的表达。结果细胞实验中,N-RHT可以抑制活化的肝星状细胞的增殖,减少肝星状细胞中α-SMA的表达(均P<0.01),下调肝星状细胞中磷酸化P44/42蛋白(p-P44/42)的表达(P<0.01)。动物实验中,与模型组比较,N-RHT可以改善CCl_(4)导致的肝纤维化病理损伤,减少肝组织中α-SMA的表达(P<0.05),增加血清中SOD、GSH-Px的含量(均P<0.05),降低血清中ALT、AST、PDGF、HYP以及MDA的含量(均P<0.05)。结论N-RHT具有改善CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化的作用,其机制可能与抑制ERK/MAPK信号通路的激活有关。
关键词
岗稔根提取物
肝星状细胞
肝纤维化
ERK/MAPK信号通路
Keywords
extraction of Rhodomyrtus tomentosa root
hepatic stellate cell
hepatic fibrosis
ERK/MAPK signaling pathway
分类号
R575 [医药卫生—消化系统]
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题名
作者
出处
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被引量
操作
1
玄丹清金颗粒通过Hh-Ptch/Smo-Gli调节轴抑制肿瘤干细胞特性逆转奥希替尼耐药
李洋
刘磊
林家茂
《华中科技大学学报(医学版)》
北大核心
2025
0
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职称材料
2
岗稔根正丁醇提取物对CCl4诱导小鼠肝纤维化中ERK/MAPK通路的影响
毕研蒙
胡正进
王荣
刘媛
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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