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马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用
被引量:
5
1
作者
宋志成
费新敏
+4 位作者
杨煜
乔利仙
王晶珊
李广存
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2017年第1期41-46,共6页
利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯...
利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。
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关键词
马铃薯A病毒
重组CP
多克隆抗体
酶标记抗体
DAS-ELISA检测
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职称材料
坛紫菜TPS基因的克隆及其原核表达
被引量:
3
2
作者
邓淑贞
王斌
+4 位作者
高磊
牛倩雅
刘涛
翁曼丽
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2013年第5期66-73,共8页
以叶状体总DNA为模板,用3对DNA引物进行PCR扩增,获得了坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PhTPS)3个重叠的片段,大小分别为1.3,1.1,0.7 kb。用pMD18-T载体克隆这些片段,经测序与序列拼接获得了该基因完整的ORF序列,其长度为2 727 bp。在已...
以叶状体总DNA为模板,用3对DNA引物进行PCR扩增,获得了坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PhTPS)3个重叠的片段,大小分别为1.3,1.1,0.7 kb。用pMD18-T载体克隆这些片段,经测序与序列拼接获得了该基因完整的ORF序列,其长度为2 727 bp。在已经构建条斑紫菜TPS基因原核表达载体pET22b-PyTPS的基础上,用PhTPS基因替代该表达载体中的PyTPS基因,获得了PhTPS基因的原核表达载体pET22b-PhTPS。重组菌BL21(pET22b-PhTPS)经IPTG诱导,SDS-PAGE显示获得了约100 kDa的特异性蛋白条带;目测及OD600的测定结果表明重组菌的耐盐性明显高于对照菌,即PhTPS基因的表达提高了重组菌的耐盐性。为利用PhTPS基因进行作物耐盐等抗逆转基因改良提供了依据。
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关键词
坛紫菜
TPS基因
原核表达
重组菌
耐盐性
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职称材料
葛枣猕猴桃果实形态及营养成分含量分析
被引量:
5
3
作者
刘春涵
刘汉柱
辛华
《植物资源与环境学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期117-118,共2页
猕猴桃属(Actinidia Lindl.)植物大多具有较高的经济价值,该属植物的果实以富含维生素、酸甜可口且风味特异而著称。葛枣猕猴桃也Actinidia polygama (Sieb. et Zucc.) Maxim.页俗称葛枣子、木天蓼,为猕猴桃属多年生落叶藤本植物...
猕猴桃属(Actinidia Lindl.)植物大多具有较高的经济价值,该属植物的果实以富含维生素、酸甜可口且风味特异而著称。葛枣猕猴桃也Actinidia polygama (Sieb. et Zucc.) Maxim.页俗称葛枣子、木天蓼,为猕猴桃属多年生落叶藤本植物,分布范围较广。其果实既可直接食用,也可酿酒、榨汁或制作干果;叶和芽则可制茶饮用;果实、茎和叶还具有较高的药用价值。此外,葛枣猕猴桃果实具有降血压及抗氧化等功能,果实提取物还能致某些癌细胞死亡。目前,关于其果实营养成分及矿质元素含量方面的研究甚少。
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关键词
葛枣猕猴桃
果实
形态
营养成分
矿质元素
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职称材料
题名
马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用
被引量:
5
1
作者
宋志成
费新敏
杨煜
乔利仙
王晶珊
李广存
郭宝太
机构
青岛农业大学生命科学学院
山东省
农业科学院蔬菜花卉研究所
中国农业科学院蔬菜花卉研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2017年第1期41-46,共6页
基金
山东省农业产业体系薯类创新团队遗传育种岗位基金项目(SDAIT-10-022-03)
济南市国际科技合作计划项目(2014003054)
文摘
利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。
关键词
马铃薯A病毒
重组CP
多克隆抗体
酶标记抗体
DAS-ELISA检测
Keywords
Potato virus A
Recombinant CP
Polyclonal antibody
Enzyme-conjugated antibody
DAS- ELISA detection
分类号
S432.41 [农业科学—植物病理学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
坛紫菜TPS基因的克隆及其原核表达
被引量:
3
2
作者
邓淑贞
王斌
高磊
牛倩雅
刘涛
翁曼丽
郭宝太
机构
青岛农业大学生命科学学院
中国海洋大学海洋生命学院
中国科学院遗传与发育学研究所
出处
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2013年第5期66-73,共8页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-100B)
文摘
以叶状体总DNA为模板,用3对DNA引物进行PCR扩增,获得了坛紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因(PhTPS)3个重叠的片段,大小分别为1.3,1.1,0.7 kb。用pMD18-T载体克隆这些片段,经测序与序列拼接获得了该基因完整的ORF序列,其长度为2 727 bp。在已经构建条斑紫菜TPS基因原核表达载体pET22b-PyTPS的基础上,用PhTPS基因替代该表达载体中的PyTPS基因,获得了PhTPS基因的原核表达载体pET22b-PhTPS。重组菌BL21(pET22b-PhTPS)经IPTG诱导,SDS-PAGE显示获得了约100 kDa的特异性蛋白条带;目测及OD600的测定结果表明重组菌的耐盐性明显高于对照菌,即PhTPS基因的表达提高了重组菌的耐盐性。为利用PhTPS基因进行作物耐盐等抗逆转基因改良提供了依据。
关键词
坛紫菜
TPS基因
原核表达
重组菌
耐盐性
Keywords
Porphyra haitanensis
TPS gene
Prokaryotic expression
Recombinant E. coli
Salt tolerance
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
P735 [天文地球—海洋生物学]
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职称材料
题名
葛枣猕猴桃果实形态及营养成分含量分析
被引量:
5
3
作者
刘春涵
刘汉柱
辛华
机构
青岛农业大学生命科学学院
山东省植物生物技术高校重点实验室
出处
《植物资源与环境学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期117-118,共2页
文摘
猕猴桃属(Actinidia Lindl.)植物大多具有较高的经济价值,该属植物的果实以富含维生素、酸甜可口且风味特异而著称。葛枣猕猴桃也Actinidia polygama (Sieb. et Zucc.) Maxim.页俗称葛枣子、木天蓼,为猕猴桃属多年生落叶藤本植物,分布范围较广。其果实既可直接食用,也可酿酒、榨汁或制作干果;叶和芽则可制茶饮用;果实、茎和叶还具有较高的药用价值。此外,葛枣猕猴桃果实具有降血压及抗氧化等功能,果实提取物还能致某些癌细胞死亡。目前,关于其果实营养成分及矿质元素含量方面的研究甚少。
关键词
葛枣猕猴桃
果实
形态
营养成分
矿质元素
Keywords
Actinidia polygama (Sieb. et Zucc.) Maxim.
fruit
morphology
nutrient component
mineral element
分类号
Q949.91 [生物学—植物学]
Q946.91 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用
宋志成
费新敏
杨煜
乔利仙
王晶珊
李广存
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2017
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
坛紫菜TPS基因的克隆及其原核表达
邓淑贞
王斌
高磊
牛倩雅
刘涛
翁曼丽
郭宝太
《华北农学报》
CSCD
北大核心
2013
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
葛枣猕猴桃果实形态及营养成分含量分析
刘春涵
刘汉柱
辛华
《植物资源与环境学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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