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RT-PCR克隆人IL-6、IL-10、IL-13和SCF等四种细胞因子膜外区cDNA 被引量:1
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作者 田志刚 孙汭 +5 位作者 刘杰 张捷 张建华 田彤 明雨 刘钟滨 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期73-75,共3页
应用RT—PCR方法,体外扩增获得人IL—6、IL—10、IL—13和SCF膜外区蛋白质编码序列.又运用基因重组手段,将这些基因序列分别插入到表达性载体PBV220中,转化大肠肝菌DH5α,经过筛选和鉴定,获得了上述细胞因子膜外区cDNA克隆.SDS—PAGE和... 应用RT—PCR方法,体外扩增获得人IL—6、IL—10、IL—13和SCF膜外区蛋白质编码序列.又运用基因重组手段,将这些基因序列分别插入到表达性载体PBV220中,转化大肠肝菌DH5α,经过筛选和鉴定,获得了上述细胞因子膜外区cDNA克隆.SDS—PAGE和生物学活性测定证实:IL—6、IL—10和IL—13已在大肠肝菌中得到表达,尤其是IL—6获得了高效表达,其表达量约占菌体总蛋白质含量的30%左右. 展开更多
关键词 IL-6 IL-13 IL-10 细胞因子 高效表达 大肠肝菌 RT-PCR 克隆人 DNA 表达量
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hIL-13融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 王文 田志刚 +3 位作者 刘钟滨 王郡甫 刘杰 张建华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期322-325,共4页
通过RTPCR技术直接从激活的健康人外周血单个核细胞(HPBMC)中扩增出约03kb的hIL13基因片段,经DNA重组技术,插入到融合蛋白表达载体pGEX4T2中,转化入感受态的大肠杆菌TG1中,成功地构建... 通过RTPCR技术直接从激活的健康人外周血单个核细胞(HPBMC)中扩增出约03kb的hIL13基因片段,经DNA重组技术,插入到融合蛋白表达载体pGEX4T2中,转化入感受态的大肠杆菌TG1中,成功地构建了hIL13的基因工程表达菌株hIL13pGEX4T2/TG1。经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达的GSTIL13融合蛋白经SDSPAGE证明分子量约36kD,表达量约占菌体蛋白总量的10%~30%。复性后IL13融合蛋白的生物学活性可达80~120U/ml。复性后的融合蛋白经凝血酶作用后,可被切割成26kD的GST与10kD的hIL13。 展开更多
关键词 hIL-13 RT-PCR 融合蛋白 大肠杆菌 基因表达
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rIL-6抗癌机理初探—rIL-6对小鼠Mφ、LAK、NK、CTL细胞体内外调节效应
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作者 田志刚 孙涓 +2 位作者 张建华 张捷 孙汭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期361-362,共2页
随着IL-6研究的日益深入,IL-6的抗癌效应研究越来越受到重视。为了进一步探讨IL-6对MΦ、LAK、NK、CTL细胞的调节效应,我们进行了rIL-6对小鼠MΦ、LAK、NK、CTL细胞调节效应的体内外实验研究,实验采用6~7周龄,体重为18—22g,雌性C... 随着IL-6研究的日益深入,IL-6的抗癌效应研究越来越受到重视。为了进一步探讨IL-6对MΦ、LAK、NK、CTL细胞的调节效应,我们进行了rIL-6对小鼠MΦ、LAK、NK、CTL细胞调节效应的体内外实验研究,实验采用6~7周龄,体重为18—22g,雌性C57BL/6荷瘤(EL6)或正常小鼠, 展开更多
关键词 IL-6 CTL NK 体内 正常小鼠 抗癌机理 细胞调节 雌性 体重
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