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风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化
被引量：
9
1
作者
岳盈盈
李鹏
+4 位作者
李志会
宋楠楠
赵元昊
纪璇
孟红
《山东医药》
CAS
北大核心
2010年第3期18-19,共2页
目的 为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（...
目的 为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性；并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度和诱导时间对目的蛋白表达产量的影响。结果获得相对分子质量约为16．6kD的融合蛋白，Western Blot证明其具有良好的抗原性，并确定该蛋白在30℃、0．6mmol／L IPTG的条件下诱导表达4h可获得最佳表达量。结论本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础，亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据。
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关键词
风疹病毒
包膜糖蛋白E1
大肠杆菌
表达条件
优化
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职称材料
题名
风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化
被引量：
9
1
作者
岳盈盈
李鹏
李志会
宋楠楠
赵元昊
纪璇
孟红
机构
山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2010年第3期18-19,共2页
基金
山东省卫生厅青年基金资助项目(2007QZ024)
文摘
目的 为风疹病毒（RV）感染提供特异性及敏感性高的检测手段。方法采用PCR扩增RV包膜糖蛋白E1基因202—353aa片段，并将其插入表达载体pET30a（＋），构建pET30a（＋）-E1，转化BL21（plysS）菌株，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western Blot初步分析蛋白表达及抗原性；并探讨温度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度和诱导时间对目的蛋白表达产量的影响。结果获得相对分子质量约为16．6kD的融合蛋白，Western Blot证明其具有良好的抗原性，并确定该蛋白在30℃、0．6mmol／L IPTG的条件下诱导表达4h可获得最佳表达量。结论本研究为RV包膜糖蛋白E1抗原纯化及应用奠定了基础，亦为研制生产高特异性和敏感性的RV检测试剂盒提供了实验依据。
关键词
风疹病毒
包膜糖蛋白E1
大肠杆菌
表达条件
优化
Keywords
rubella virus
glycoprotein E1
E. coli
expression condition
optimization
分类号
R371.1 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
风疹病毒包膜糖蛋白E1的原核表达及条件优化
岳盈盈
李鹏
李志会
宋楠楠
赵元昊
纪璇
孟红
《山东医药》
CAS
北大核心
2010
9
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