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山东省肉鸭鸭疫里默氏杆菌流行病学调查及耐药性分析 被引量:12
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作者 骆延波 李兰波 +5 位作者 贾纪美 刘晓东 齐静 李璐璐 胡明 刘玉庆 《中国家禽》 北大核心 2015年第21期79-82,共4页
针对目前肉鸭养殖中细菌传染病发病率高、防治困难的现状,分离鸭疫里默氏杆菌,检测其抗药性程度,筛选合适的抗生素适宜剂量。从山东省内12个地区/市、河北省4个地区及河南省4个市区养殖场或养殖小区采集到447份疑似鸭疫里默氏杆菌病病... 针对目前肉鸭养殖中细菌传染病发病率高、防治困难的现状,分离鸭疫里默氏杆菌,检测其抗药性程度,筛选合适的抗生素适宜剂量。从山东省内12个地区/市、河北省4个地区及河南省4个市区养殖场或养殖小区采集到447份疑似鸭疫里默氏杆菌病病鸭肝脏及脑部组织病料中分离菌株。利用鸭疫里默氏杆菌的omp A基因为目的基因,建立PCR快速检测方法。结果:PCR快速鉴定该菌的方法,共分离到65株鸭疫里默氏杆菌,分离率为13.62%,其抗药性程度均较高。根据CLSI琼脂稀释法药敏试验原理,建立了96点阵接种药敏检测盒,检测分离菌株的MIC,筛选适用于临床的敏感药物和剂量。试验表明:鸭里默氏杆菌抗药性较高,可根据药敏检测结果筛选抗生素,并轮换使用。 展开更多
关键词 肉鸭 鸭疫里默氏杆菌 药敏试验 多重耐药
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山东省及周边地区肉鸭源大肠杆菌流行病学调查及耐药性分析 被引量:3
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作者 骆延波 李兰波 +5 位作者 贾纪美 齐静 李璐璐 胡明 刘玉庆 邓旭明 《山东农业科学》 2018年第2期119-123,共5页
为建立鸭大肠杆菌快速鉴定及药敏检测方法,筛选合适的抗生素,本试验从山东省12个、河北4个及河南4个地区养殖场或养殖小区采集到447份疑似感染鸭大肠杆菌的肉鸭肝脏和脑部组织病料,共分离到300株大肠杆菌,分离率为67.11%。利用大肠杆菌p... 为建立鸭大肠杆菌快速鉴定及药敏检测方法,筛选合适的抗生素,本试验从山东省12个、河北4个及河南4个地区养殖场或养殖小区采集到447份疑似感染鸭大肠杆菌的肉鸭肝脏和脑部组织病料,共分离到300株大肠杆菌,分离率为67.11%。利用大肠杆菌phoA基因为目的基因,建立了PCR快速鉴定鸭源大肠杆菌的方法。该PCR检测方法可快速鉴定鸭源大肠杆菌,鉴定效率显著提高。根据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)标准及琼脂稀释法药敏试验原理,建立了96点接种药敏检测盒快速检测方法,结果表明:硫酸多粘菌素、甲磺酸培氟沙星抑菌率相对较高;卡那霉素、氨苄西林、氟苯尼考抑菌率相对较低。根据药敏检测结果可快速筛选适用的敏感药物和剂量,并交替轮流使用抗生素。 展开更多
关键词 大肠杆菌 药敏试验 多重耐药
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新型吸管式药敏检测盒的应用及山东省禽源病原菌抗药性监测网络的构建 被引量:2
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作者 白华 骆延波 +9 位作者 齐静 胡明 朱小玲 王永军 苏红 李靖冉 李颢 张秀美 吴聪明 刘玉庆 《家禽科学》 2012年第5期7-11,共5页
为了适应兽医临床的简陋条件和在分散的养殖场进行联合抗药性监测,按照药敏试验中试管稀释法原理研制灵敏、准确、稳定、操作简单、无需专门仪器设备的原位吸管式药敏检测盒,4-7h快速判断11种药物对目标病原菌敏感性,指导临床用药,... 为了适应兽医临床的简陋条件和在分散的养殖场进行联合抗药性监测,按照药敏试验中试管稀释法原理研制灵敏、准确、稳定、操作简单、无需专门仪器设备的原位吸管式药敏检测盒,4-7h快速判断11种药物对目标病原菌敏感性,指导临床用药,并在肉鸡养殖中进行了应用;同时联合六和、中慧、正大、九联、民和、春雪、益生等省内大型养殖企业,借助企业的技术体系建立山东省动物源病原菌抗药性监测网络、数据库、菌种库,利用网络技术对抗药性数据进行收集、汇总,并实现网上查询,对了解跟踪山东省动物源病原茵抗药性发展规律具有重要参考价值。 展开更多
关键词 吸管式药敏检测盒 原位药敏检测 病原菌 兽医临床 监测网
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恩诺沙星对大肠杆菌全基因组表达谱的影响 被引量:7
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作者 白华 齐静 +3 位作者 朱小玲 王庆艳 杜加法 刘玉庆 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1537-1544,共8页
为探索恩诺沙星(Enrofloxacin)压力下大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)生理状态的变化,从而为进一步研究细菌对药物压力的应答机制提供参考,作者将E.coli接种于加入恩诺沙星(浓度为1/2 MIC)的液体LB中,绘制生长曲线,分别以光镜和电镜... 为探索恩诺沙星(Enrofloxacin)压力下大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)生理状态的变化,从而为进一步研究细菌对药物压力的应答机制提供参考,作者将E.coli接种于加入恩诺沙星(浓度为1/2 MIC)的液体LB中,绘制生长曲线,分别以光镜和电镜进行形态学观察,取5 h培养菌,进行表达谱差异分析。结果显示,加入恩诺沙星后细菌生长速度明显降低(P<0.01),菌体形态呈长丝状,基因芯片检测发现519个差异点,其中239个上调,而280个下调,表达变化3倍以上的基因66个,其中34个上调,32个下调,主要涉及SOS应答、细胞分裂、压力应答、物质合成、新陈代谢、转录调控等生物学功能。上述结果表明,在恩诺沙星压力下,细菌启动SOS应答,细胞分裂被抑制,细菌生理机制发生了复杂的变化。 展开更多
关键词 恩诺沙星 表达谱基因芯片 大肠杆菌 细菌形态 转录分析
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中药雪胆及其制剂研究进展 被引量:11
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作者 苏红 白华 +4 位作者 齐静 胡明 朱小玲 刘玉庆 骆延波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期202-205,共4页
雪胆具有广泛的药用及经济价值,为综合开发利用雪胆资源,文章对雪胆的化学成分、药理作用、临床应用、制剂研制及质量控制等进行了综述,并对雪胆的研究及实际应用提出了某些建议。
关键词 雪胆 药理作用 制剂 研究进展
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我国鸡源H9N2亚型禽流感病毒NS基因的分子进化分析 被引量:5
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作者 黄艳艳 曹三杰 +3 位作者 胡北侠 都启晶 张秀美 文心田 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期154-157,共4页
目的为了明确国内鸡群中H9N2亚型AIV中非结构蛋白(NS)基因系统进化情况,对1998-2008年间分离自发病鸡群中的14株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)进行了非结构蛋白(NS)基因的克隆和序列测定,得到了NS1和NS2蛋白的完整编码序列。将NS核甘酸序列... 目的为了明确国内鸡群中H9N2亚型AIV中非结构蛋白(NS)基因系统进化情况,对1998-2008年间分离自发病鸡群中的14株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)进行了非结构蛋白(NS)基因的克隆和序列测定,得到了NS1和NS2蛋白的完整编码序列。将NS核甘酸序列及推定的氨基酸序列与GenBank中已有的参考序列作比对,结果14株AIV的NS基因同源性在92.9%~99.9%,在系统进化上均属于NS基因A等位基因群中的A/Chicken/Beijing/1/1994分支。综合已有的研究结果,表明尽管A/Quail/Hongkong/G1/1997分支和A/Duck/Hongkong/Y439/1997分支的NS基因曾偶尔传入鸡群,但并未在我国鸡群中建立稳定的亚系。国内的H9亚型AIV的NS基因仅稳定存在着A/Chicken/Beijing/1/1994分支。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型非结构蛋白 进化分析
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10株H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因的序列分析 被引量:3
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作者 徐栋 张秀美 +3 位作者 黄艳艳 胡北侠 李建亮 崔言顺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期602-608,共7页
为了从分子水平上掌握我国H9亚型禽流感的变异情况和流行规律,本研究汇集近年来从我国部分省市养殖场分离的10株禽流感H9N2亚型毒株,采用RT-PCR技术对其HA和NA基因进行扩增、克隆和测序,并对所得全序列进行同源性和遗传进化分析。结果显... 为了从分子水平上掌握我国H9亚型禽流感的变异情况和流行规律,本研究汇集近年来从我国部分省市养殖场分离的10株禽流感H9N2亚型毒株,采用RT-PCR技术对其HA和NA基因进行扩增、克隆和测序,并对所得全序列进行同源性和遗传进化分析。结果显示,本试验分离到的10株病毒的HA和NA基因变异程度不大,变异概率大;在遗传进化树中均属于欧亚分支中的类CBJ194亚分支,与CBJ194的HA基因核苷酸同源性在88.8%~95.8%,NA基因核苷酸同源性在93.4%~97.6%,可能与CBJ194由同一毒株进化而来。由于基因突变使ACHB101毒株的HA基因出现了新的糖基化位点,ACHN102毒株的保守受体结合位点发生变异。NA基因推导氨基酸序列中第63、64、65位有T、EI、3个氨基酸的缺失,导致61位糖基化位点的丢失。唾液酸吸附位点上有明显的突变。HA和NA基因的变异可能与频繁的疫苗免疫选择压力有关。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 HA基因 NA基因 序列分析
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大型肉鸡养殖场中死淘鸡病原菌分析 被引量:5
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作者 蔡亚娜 白华 +4 位作者 齐静 魏甜甜 单虎 刘玉庆 胡明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期213-217,共5页
本试验通过对山东某地区8个大型集约化肉鸡养殖场的27只死淘鸡进行剖检、电镜观察、病原菌分离鉴定,明确了细菌混合感染为其显著特征,此地区优势致病菌依次为粪肠球菌、浅绿气球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌。用专利产品(专利... 本试验通过对山东某地区8个大型集约化肉鸡养殖场的27只死淘鸡进行剖检、电镜观察、病原菌分离鉴定,明确了细菌混合感染为其显著特征,此地区优势致病菌依次为粪肠球菌、浅绿气球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌。用专利产品(专利号:ZL 2009 2 0253251.5)吸管药敏检测盒对死淘鸡病变组织的细菌混合感染进行药敏检测,对照传统的药敏检测结果,表明吸管药敏检测盒具有准确的原位药敏检测的特点和优势,有助于了解肉鸡养殖场潜在的致病因素、提供可行的预防方案。 展开更多
关键词 死淘鸡 病原菌 混合感染 吸管药敏检测盒
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四株H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与分子特征分析 被引量:2
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作者 黄艳艳 徐栋 +2 位作者 胡北侠 文心田 张秀美 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期25-29,共5页
对分离自北方地区发病鸡群中的四株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)进行了血凝素(HA)基因的全长扩增和序列测定。将其核苷酸序列及推定的氨基酸序列与GenBank中已有的参考序列进行比较并绘制了系统进化树。结果表明基于HA基因多个不同的核... 对分离自北方地区发病鸡群中的四株H9N2亚型禽流感病毒(AIV)进行了血凝素(HA)基因的全长扩增和序列测定。将其核苷酸序列及推定的氨基酸序列与GenBank中已有的参考序列进行比较并绘制了系统进化树。结果表明基于HA基因多个不同的核苷酸区段所做的系统发育分析结果基本一致。尽管分离时间不同,但这四株AIV的HA基因同源性很高,均属于A/DK/HK/Y280/97-like病毒。四株病毒在HA裂解位点、受体结合位点以及推测的糖基化位点的氨基酸序列均与上述亚系相似,但是其中的两株病毒由于一个核苷酸的变异,缺失了HA上298—300位的一个潜在的糖基化位点。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 血凝素基因 进化分析
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牛粗饲料品质评价指标研究进展 被引量:14
10
作者 窦文洁 谭秀文 +3 位作者 杨在宾 宋恩亮 刘桂芬 万发春 《中国草食动物》 2011年第1期61-64,共4页
粗饲料是牛日粮的重要组成部分,其品质对牛生产性能和健康有极大影响,而实际生产中往往做不到对其品质准确评价甚至忽略,进而影响养殖的经济效益。现有粗饲料品质评价指标有单项指标和综合指标,单项指标主要包括常规营养成分、干物质随... 粗饲料是牛日粮的重要组成部分,其品质对牛生产性能和健康有极大影响,而实际生产中往往做不到对其品质准确评价甚至忽略,进而影响养殖的经济效益。现有粗饲料品质评价指标有单项指标和综合指标,单项指标主要包括常规营养成分、干物质随意采食量、消化率等,综合指标则包括粗饲料相对值、品质指数、粗饲料相对品质指数、粗饲料分级指数等。现综述国内外现有评价粗饲料品质指标的研究进展,以期为研究人员进行牛粗饲料评价提供参考。 展开更多
关键词 粗饲料 品质评价
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新型吸管式药敏检测盒的制备及在奶牛乳房炎诊治中的初步应用 被引量:4
11
作者 白华 齐静 +5 位作者 胡明 胡欣欣 朱义梅 朱小玲 刘玉庆 吴聪明 《中国奶牛》 2012年第2期26-29,共4页
为探索适于在兽医临床使用的药敏检测方法,本研究根据试管稀释法原理,研制组装新型吸管式药敏检测盒,并对该药敏检测盒的准确性、稳定性进行验证,然后对引起奶牛乳房炎的临床分离病原菌进行药敏检测。结果表明,新型吸管式药敏检测盒准... 为探索适于在兽医临床使用的药敏检测方法,本研究根据试管稀释法原理,研制组装新型吸管式药敏检测盒,并对该药敏检测盒的准确性、稳定性进行验证,然后对引起奶牛乳房炎的临床分离病原菌进行药敏检测。结果表明,新型吸管式药敏检测盒准确性高、稳定性好、便于保存,对临床分离病原菌的药敏检测结果与临床治疗情况基本相符,说明新型吸管式药敏检测盒适于在兽医临床使用。 展开更多
关键词 吸管式药敏检测盒 药敏检测 病原菌 兽医临床 乳房炎
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中药对病原体杀灭及对肉鸡生产性能影响研究 被引量:2
12
作者 白华 杜加法 +3 位作者 朱小玲 孙作为 胡明 刘玉庆 《中兽医医药杂志》 2009年第6期10-12,共3页
用中药复方提取液对H9N2亚型禽流感病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌4种病原体进行体外杀灭试验,并进行肉鸡饲养试验,结果显示,该中药提取液按1∶640稀释后对病毒的杀灭率仍然达到99%,提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门... 用中药复方提取液对H9N2亚型禽流感病毒、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌4种病原体进行体外杀灭试验,并进行肉鸡饲养试验,结果显示,该中药提取液按1∶640稀释后对病毒的杀灭率仍然达到99%,提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌3种病原菌的MBC为2%~5%(稀释度,V/V),动物试验结果显示,该中药提取液能够显著提高肉鸡出栏均重(P<0.05),与对照组相比,试验组单栋鸡舍利润平均增加1.585万元。结果表明,该中药提取液对预防疾病、提高肉鸡生产性能具有一定作用,值得推广应用。 展开更多
关键词 中药 病原体 肉鸡 生产性能
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斑点杂交法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒
13
作者 白华 张金强 +2 位作者 于美芳 刘玉庆 吴家强 《中国动物检疫》 CAS 2009年第3期51-53,共3页
斑点杂交技术是一种快速、稳定、高通量的检测方法,在动物疫病的诊断和流行病学调查中发挥着重要作用。在本研究中,通过RT-PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD1株ORF7基因,并以其为模板,制备地高辛标记cDNA探针,并进行了特异性... 斑点杂交技术是一种快速、稳定、高通量的检测方法,在动物疫病的诊断和流行病学调查中发挥着重要作用。在本研究中,通过RT-PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD1株ORF7基因,并以其为模板,制备地高辛标记cDNA探针,并进行了特异性和敏感性检测。利用该探针对50份临床病料进行PRRSV检测,并与RT-PCR进行了比较,结果显示,斑点杂交结果与RT-PCR结果完全一致,探针敏感性和特异性亦较高,说明本研究建立的斑点杂交方法可用于PRRSV临床检测与免疫监测。 展开更多
关键词 地高辛标记探针 斑点杂交 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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基于高通量测序分析青贮玉米微生物多样性 被引量:8
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作者 朱见深 胡明 +5 位作者 齐静 骆延波 张庆 李璐璐 张印 刘玉庆 《山东农业科学》 2020年第4期68-72,共5页
青贮饲料发酵质量好坏很大程度上由其微生物组成决定。为了解青贮玉米微生物的多样性,利用高通量测序技术结合传统的纯培养技术,对31个青贮饲料样本进行微生物多样性分析。结果表明,青贮玉米微生物群落组成的共享核心菌属41个,占总样本... 青贮饲料发酵质量好坏很大程度上由其微生物组成决定。为了解青贮玉米微生物的多样性,利用高通量测序技术结合传统的纯培养技术,对31个青贮饲料样本进行微生物多样性分析。结果表明,青贮玉米微生物群落组成的共享核心菌属41个,占总样本微生物组成的87. 7%,丰度较大的(≥1%)有10个菌属,其中乳杆菌属、克雷伯菌属及魏斯氏菌属分别占42. 9%、12. 1%、10. 3%;真菌主要有念珠菌属、黑粉菌属、半乳糖霉菌属等。比较乳熟期组与蜡熟期组青贮的微生物群落,发现玉米的成熟度不同,青贮发酵产品中某些属微生物在数量上存在差别,但微生物群落组成无明显差异。本研究可为青贮饲料微生物群落结构及功能的研究提供参考。 展开更多
关键词 青贮玉米 高通量测序 微生物多样性
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大肠埃希菌过表达lexA基因对恩诺沙星杀菌力和抗药性突变的影响 被引量:1
15
作者 牛卫卫 白华 +9 位作者 王进文 颜世敢 齐静 骆延波 李璐璐 贾纪美 李靖冉 黄娟 单虎 刘玉庆 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期942-946,共5页
目的构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台。方法构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组质粒菌株BL21-lexA,用IPTG... 目的构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台。方法构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组质粒菌株BL21-lexA,用IPTG诱导BL21-lexA过表达lexA,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定LexA蛋白,用荧光定量PCR测定SOS应答基因recA和umuC表达变化;然后用恩诺沙星梯度平板测定恩诺沙星对BL21-unmodified(空质粒菌株)和BL21-lexA的抑菌活性和抗药性突变率。结果重组质粒菌株BL21-lexA在IPTG诱导下过表达LexA,抑制recA和umuC表达,提高了大肠埃希菌对恩诺沙星的敏感性,降低了抗药性突变率。结论通过IPTG诱导BL21-lexA过表达LexA蛋白,能构建稳定的SOS应答抑制模型,用于筛选SOS抑制剂,提高恩诺沙星杀菌力和降低抗药性突变。 展开更多
关键词 LEXA SOS应答 大肠埃希菌 恩诺沙星 抗药性突变 质粒过表达
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复合核苷肽溶液促进肉鸡红细胞免疫应答的研究 被引量:2
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作者 林淑玲 李瑞芹 +1 位作者 邵文晶 骆延波 《山东农业科学》 2011年第12期88-90,共3页
将180只健康肉雏鸡随机分成3组,每组60只。7日龄将A、B组分别口服复合核苷肽溶液(0.05 ml/只)和盐酸左旋咪唑(15 mg/只),C组为空白对照。于试验后7、14天分别测定各组鸡的红细胞-C3b受体花环率和红细胞-IC受体花环率。结果表明,14、21... 将180只健康肉雏鸡随机分成3组,每组60只。7日龄将A、B组分别口服复合核苷肽溶液(0.05 ml/只)和盐酸左旋咪唑(15 mg/只),C组为空白对照。于试验后7、14天分别测定各组鸡的红细胞-C3b受体花环率和红细胞-IC受体花环率。结果表明,14、21日龄时A组红细胞-C3b受体花环率显著高于B组和对照组(P<0.05),14日龄时B组红细胞-C3b受体花环率也显著高于对照组,21日龄时二者差异不显著(P>0.05)。而14日龄时A、B组红细胞-IC受体花环率与对照组差异不显著(P>0.05),到21日龄时A、B组红细胞-IC受体花环率与对照组差异显著(P<0.05),表明复合核苷肽能够显著提高红细胞免疫功能。 展开更多
关键词 复合核苷肽溶液 红细胞-C3b受体花环率 红细胞-IC受体花环率
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