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鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及初步应用
1
作者
周鲁阳
陈学圣
+9 位作者
宋法慧
吴际坤
俞长旭
王傲菲
魏书琦
杨硕
汪建华
张瑞华
姜世金
朱岩丽
《中国家禽》
北大核心
2025年第6期162-168,共7页
为建立一种快速实用的检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的方法,试验根据MG黏附蛋白的mgc2基因序列,选择其保守区域的基因片段,设计两对特异性引物,通过对反应条件和试剂浓度进行优化,建立鸡毒支原体套式PCR检测方法,并应用...
为建立一种快速实用的检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的方法,试验根据MG黏附蛋白的mgc2基因序列,选择其保守区域的基因片段,设计两对特异性引物,通过对反应条件和试剂浓度进行优化,建立鸡毒支原体套式PCR检测方法,并应用该方法检测鸭的临床样品。结果显示,建立的检测方法与其他病原体无交叉反应,特异性良好,MG DNA模板检测限为5×10^(-6) ng/μL,其敏感性是常规PCR的1000倍以上,且批内和批间试验重复性良好;利用该方法对临床病死鸭胚与咽、肛拭子混合样本的检出率分别为10%(5/50)和33%(21/63)。研究表明,建立的MG套式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高等优点,适用于鸭群中MG早期感染的检测,为MG的检测和防控及分子流行病学调查提供有力的检测手段。
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关键词
鸭
鸡毒支原体
套式PCR
mgc2
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职称材料
我国鸡群禽戊型肝炎病毒RT-PCR检测及部分ORF2基因序列分析
被引量：
2
2
作者
赵钦
周恩民
+4 位作者
孙培明
董施伟
张璐
孙亚妮
姜世金
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第9期721-723,共3页
为从核酸水平证实我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(HEV)的存在,本实验从山东省某鸡场患有肝脾肿大综合征的病鸡中采集10份粪便和8份胆汁样品,利用RT-PCR方法检测其中禽HEV ORF2基因片段,并将阳性PCR产物克隆测序。结果显示:18份粪便和胆汁样品...
为从核酸水平证实我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(HEV)的存在,本实验从山东省某鸡场患有肝脾肿大综合征的病鸡中采集10份粪便和8份胆汁样品,利用RT-PCR方法检测其中禽HEV ORF2基因片段,并将阳性PCR产物克隆测序。结果显示:18份粪便和胆汁样品中,13份为禽HEV RNA阳性;其序列间的同源性为97%～99%,与GenBank中登录的参考序列同源性为76.6%～98.1%;进化树显示与欧洲地区的禽HEV在同一分支,属于禽HEV基因3型。禽HEV ORF2基因的检出为进一步了解禽HEV对我国家禽养殖业的危害以及在我国的流行情况奠定了基础。
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关键词
禽戊型肝炎病毒
ORF2基因
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职称材料
题名
鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及初步应用
1
作者
周鲁阳
陈学圣
宋法慧
吴际坤
俞长旭
王傲菲
魏书琦
杨硕
汪建华
张瑞华
姜世金
朱岩丽
机构
山东
农业大学
动物
医学院
山东
农业大学
动物
医学院
山东
农业大学
动物
医学院
山东
和康源
生物
育种股份有限公司
出处
《中国家禽》
北大核心
2025年第6期162-168,共7页
基金
山东省重点研发计划(重大科技创新工程)项目(2022CXGC010606-02-04)。
文摘
为建立一种快速实用的检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的方法,试验根据MG黏附蛋白的mgc2基因序列,选择其保守区域的基因片段,设计两对特异性引物,通过对反应条件和试剂浓度进行优化,建立鸡毒支原体套式PCR检测方法,并应用该方法检测鸭的临床样品。结果显示,建立的检测方法与其他病原体无交叉反应,特异性良好,MG DNA模板检测限为5×10^(-6) ng/μL,其敏感性是常规PCR的1000倍以上,且批内和批间试验重复性良好;利用该方法对临床病死鸭胚与咽、肛拭子混合样本的检出率分别为10%(5/50)和33%(21/63)。研究表明,建立的MG套式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高等优点,适用于鸭群中MG早期感染的检测,为MG的检测和防控及分子流行病学调查提供有力的检测手段。
关键词
鸭
鸡毒支原体
套式PCR
mgc2
Keywords
duck
Mycoplasma gallisepticum
nested PCR
mgc2
分类号
S852.62 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
我国鸡群禽戊型肝炎病毒RT-PCR检测及部分ORF2基因序列分析
被引量：
2
2
作者
赵钦
周恩民
孙培明
董施伟
张璐
孙亚妮
姜世金
机构
山东
农业大学
动物
医学院"泰山学者"免疫
生物
学
实验室
山东
农业大学
动物
医学院预防兽医系
山东省动物生物技术与疫病防控重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第9期721-723,共3页
基金
山东省"泰山学者"建设工程项目(040-72010)
文摘
为从核酸水平证实我国鸡群中禽戊型肝炎病毒(HEV)的存在,本实验从山东省某鸡场患有肝脾肿大综合征的病鸡中采集10份粪便和8份胆汁样品,利用RT-PCR方法检测其中禽HEV ORF2基因片段,并将阳性PCR产物克隆测序。结果显示:18份粪便和胆汁样品中,13份为禽HEV RNA阳性;其序列间的同源性为97%～99%,与GenBank中登录的参考序列同源性为76.6%～98.1%;进化树显示与欧洲地区的禽HEV在同一分支,属于禽HEV基因3型。禽HEV ORF2基因的检出为进一步了解禽HEV对我国家禽养殖业的危害以及在我国的流行情况奠定了基础。
关键词
禽戊型肝炎病毒
ORF2基因
Keywords
avian hepatitis E virus
ORF2 gene
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及初步应用
周鲁阳
陈学圣
宋法慧
吴际坤
俞长旭
王傲菲
魏书琦
杨硕
汪建华
张瑞华
姜世金
朱岩丽
《中国家禽》
北大核心
2025
0
在线阅读
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职称材料
2
我国鸡群禽戊型肝炎病毒RT-PCR检测及部分ORF2基因序列分析
赵钦
周恩民
孙培明
董施伟
张璐
孙亚妮
姜世金
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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