期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
应用多重实时荧光PCR方法对8种动物毛纤维种类鉴别的研究 被引量:6
1
作者 刘艳艳 范阳阳 +4 位作者 步迅 胡悦 东野升金 谭晴晴 张全芳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1540-1549,共10页
本研究旨在利用多重实时荧光PCR方法对水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维进行物种鉴定研究。利用碱裂解法加入二硫苏糖醇,并结合硅珠吸附核酸法来优化动物毛纤维DNA的提取;根据8种动物16S rDNA基因特异核苷酸序列... 本研究旨在利用多重实时荧光PCR方法对水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维进行物种鉴定研究。利用碱裂解法加入二硫苏糖醇,并结合硅珠吸附核酸法来优化动物毛纤维DNA的提取;根据8种动物16S rDNA基因特异核苷酸序列设计通用PCR引物和特异性TaqMan荧光探针;通过优化引物和探针浓度及退火温度等PCR反应体系和条件,建立了多重实时荧光PCR检测体系;并对多重PCR体系的特异性、灵敏度、重复性和适用性进行评估。结果表明,使用SDS-二硫苏糖醇DTT-蛋白酶K结合Chelex-100法,并利用硅珠纯化提取动物毛纤维DNA效果最佳,满足实时荧光PCR检测要求。本方法 DNA灵敏度为0.01ng,混合样本方法检出限为1.0%。因此本方法能够从动物毛纤维提取高质量DNA,建立的多重实时荧光PCR检测体系具有特异性强、重复性好和灵敏度高等优势。本方法可用于水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物及其混合物毛纤维的鉴定,为拓展动物毛纤维在物种识别、分子进化研究、分子标记辅助育种和遗传资源评价等领域中的应用奠定基础。 展开更多
关键词 动物毛纤维 多重实时荧光PCR 鉴定
在线阅读 下载PDF
多重实时荧光PCR鉴别金钱白花蛇源性方法研究 被引量:5
2
作者 李燕 刘艳艳 +3 位作者 卞如如 张旭童 张全芳 步迅 《食品与药品》 CAS 2016年第4期246-251,共6页
目的用多重实时荧光聚合酶链式反应(多重实时荧光PCR)快速鉴别金钱白花蛇源性。方法以线粒体细胞色素C基因为目标靶基因,根据其特异性核酸序列设计引物和探针,通过优化引物及探针浓度、退火温度等PCR体系和条件,建立从活体材料和粉末制... 目的用多重实时荧光聚合酶链式反应(多重实时荧光PCR)快速鉴别金钱白花蛇源性。方法以线粒体细胞色素C基因为目标靶基因,根据其特异性核酸序列设计引物和探针,通过优化引物及探针浓度、退火温度等PCR体系和条件,建立从活体材料和粉末制剂等中药材中检测金钱白花蛇源性的二重二色实时荧光PCR检测体系。结果通过检测市售15块金钱白花蛇药材,发现其中5块不含金钱白花蛇源性成分;10份金钱白花蛇粉末制剂中3份未检出金钱白花蛇成分;5份活体样本均为金钱白花蛇。检测结果与DNA测序结果一致。结论本研究建立的方法可用于金钱白花蛇源性的检测,能有效保障金钱白花蛇相关名贵中药及制品的安全性。 展开更多
关键词 金钱白花蛇 多重实时荧光PCR 线粒体细胞色素C基因
在线阅读 下载PDF
一种从动物源性化妆品中快速提取DNA的方法研究
3
作者 梁水美 范阳阳 +4 位作者 刘艳艳 卞如如 朱天翼 张全芳 步迅 《山东农业科学》 2016年第9期131-135,共5页
为了达到从分子水平上检测化妆品动物源性成分的目的,本研究建立了一种从化妆品中提取动物源性基因组DNA的方法。该方法使用Chelex-100结合玻璃奶提取化妆品中的基因组DNA,具有污染小、操作简单、快速、高效等优点。分别利用紫外分光光... 为了达到从分子水平上检测化妆品动物源性成分的目的,本研究建立了一种从化妆品中提取动物源性基因组DNA的方法。该方法使用Chelex-100结合玻璃奶提取化妆品中的基因组DNA,具有污染小、操作简单、快速、高效等优点。分别利用紫外分光光度计、普通PCR和DNA测序等方法对提取DNA的质量进行检测,结果表明DNA浓度和纯度均能达到后期分子检测要求。说明本方法提取的DNA适用于在分子水平上检测化妆品的动物源性成分。 展开更多
关键词 化妆品 动物源性 基因组DNA 提取方法
在线阅读 下载PDF
利用环介导等温扩增技术快速检测饮用水中的大肠杆菌 被引量:12
4
作者 谷晓红 谭晴晴 +5 位作者 刘艳艳 王文博 范阳阳 朱天翼 张全芳 步迅 《山东农业科学》 2017年第1期130-135,共6页
本研究以饮用水为研究对象,利用大肠杆菌mal B保守基因设计LAMP特异引物,通过优化反应条件,建立了适用于快速检测饮用水中大肠杆菌的LAMP方法,可在60℃条件下反应60 min完成检测,检测灵敏度达到1.35 CFU/m L。利用SYBR GreenⅠ染料剂可... 本研究以饮用水为研究对象,利用大肠杆菌mal B保守基因设计LAMP特异引物,通过优化反应条件,建立了适用于快速检测饮用水中大肠杆菌的LAMP方法,可在60℃条件下反应60 min完成检测,检测灵敏度达到1.35 CFU/m L。利用SYBR GreenⅠ染料剂可在紫外灯下直接观察检测结果。通过检测掺入已知大肠杆菌的纯净水样品,结果表明,本研究所建立的LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便的特点,可用于饮用水中大肠杆菌致病菌的快速检测,对预防和控制大肠杆菌的传染具有重要意义。 展开更多
关键词 饮用水 环介导恒温扩增 大肠杆菌 快速检测
在线阅读 下载PDF
一种从阿胶及制品中提取DNA的新方法 被引量:6
5
作者 张全芳 刘艳艳 +4 位作者 卞如如 陈杰 杨雪 范阳阳 步迅 《食品与药品》 CAS 2015年第6期396-399,共4页
目的建立一种从阿胶及制品中提取微量DNA的方法,为从分子水平鉴别阿胶中动物源性奠定基础。方法选取市场常见的阿胶补血口服液、复方阿胶浆、阿胶膏和即食阿胶块等4种不同的阿胶制品,使用SDS-蛋白酶K结合Chelex-100法提取DNA,利用玻璃... 目的建立一种从阿胶及制品中提取微量DNA的方法,为从分子水平鉴别阿胶中动物源性奠定基础。方法选取市场常见的阿胶补血口服液、复方阿胶浆、阿胶膏和即食阿胶块等4种不同的阿胶制品,使用SDS-蛋白酶K结合Chelex-100法提取DNA,利用玻璃奶纯化DNA。结果此法可从不同阿胶产品中提取微量DNA,其中阿胶膏中获得DNA浓度最高,即食阿胶块次之,复方阿胶浆和阿胶补血口服液中最少。PCR扩增获得片段利用琼脂糖凝胶电泳和DNA测序验证与目的片段一致。结论建立了从阿胶及其制品中提取高质量DNA的新方法。 展开更多
关键词 阿胶 DNA提取 玻璃奶
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部