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鸡传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达及其免疫学原性分析
被引量：
1
1
作者
亓丽红
艾武
+3 位作者
黄兵
刘涛
秦卓明
宋敏训
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2010年第5期585-589,共5页
根据对山东IBV流行株的遗传变异分析,选取流行代表株LC2,扩增其S1基因,将其S1基因克隆到pPIC9K载体中,构建了真核表达质粒pPIC9K-S1,经SacⅠ线性化后,通过电转化到毕赤酵母GS115中,经MD/MM及G418筛选,PCR鉴定,获得多拷贝阳性重组菌pPIC9...
根据对山东IBV流行株的遗传变异分析,选取流行代表株LC2,扩增其S1基因,将其S1基因克隆到pPIC9K载体中,构建了真核表达质粒pPIC9K-S1,经SacⅠ线性化后,通过电转化到毕赤酵母GS115中,经MD/MM及G418筛选,PCR鉴定,获得多拷贝阳性重组菌pPIC9K-S1-GS115。将重组菌在0.5%甲醇中进行诱导分泌表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western blot分析。结果显示,在酵母培养基上清中检测到分子量为90 ku为目的蛋白,与鸡IBV阳性血清发生特异性反应。将表达上清及其重组菌菌体饲喂SPF鸡,40 d后采血,可检测到IBV保护性抗体。结果表明:表达的IBV的S1蛋白具有很好的免疫原性,为ELISA诊断试剂盒的研制及IBV疫苗的研制奠定基础。
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关键词
鸡传染性支气管炎病毒
S1基因
毕赤酵母
表达
免疫原性
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职称材料
7株鸭肝炎病毒分离株及疫苗株的全基因组序列测定与变异分析
被引量：
10
2
作者
马秀丽
于可响
+3 位作者
吴静
宋敏训
廖明
辛朝安
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期1209-1214,共6页
为了分析中国鸭肝炎病毒(DHV)的遗传变异和进化关系,作者测定了中国不同地区分离的7株DHV及1株疫苗株的全基因组序列,并与公布的40株DHV序列进行比较分析。结果发现VP1变异程度较大,高变区主要集中在180-194位和213-219位;不同毒株的潜...
为了分析中国鸭肝炎病毒(DHV)的遗传变异和进化关系,作者测定了中国不同地区分离的7株DHV及1株疫苗株的全基因组序列,并与公布的40株DHV序列进行比较分析。结果发现VP1变异程度较大,高变区主要集中在180-194位和213-219位;不同毒株的潜在N-糖基化位点存在较大差异。多数基因的进化分析均表现出一致的结果,测序的8个毒株均分布在同一个遗传谱系,属基因A型,与基因B型和基因C型遗传距离较远,不在同一分支上。而JYZ02株与R85952株的遗传距离最近,属同一个亚支,提示JYZ02株可能由毒株R85952演化而来。结合氨基酸序列相似性分析和代表毒株的血清交叉中和试验结果,表明近年分离并测序的上述7个毒株未发生抗原变异。从多毒株进化分析结果可以看出,血清1型DHV仍是我国流行的优势血清型。
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关键词
鸭肝炎病毒
遗传变异
进化分析
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职称材料
鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定
3
作者
姜亦飞
亓丽红
+3 位作者
黄兵
李玉峰
于可响
宋敏训
《山东农业科学》
2011年第1期100-102,共3页
用纯化的鸡传染性支气管炎病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Ag8.653融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F4F7D9、3E9G3D4、4...
用纯化的鸡传染性支气管炎病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Ag8.653融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F4F7D9、3E9G3D4、4B8B3F8。通过间接ELISA、血凝抑制以及琼脂糖扩散等方法检测,3株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达106以上并且具有良好的特异性。
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关键词
鸡传染性支气管炎病毒
单克隆抗体
制备
鉴定
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职称材料
题名
鸡传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达及其免疫学原性分析
被引量：
1
1
作者
亓丽红
艾武
黄兵
刘涛
秦卓明
宋敏训
机构
山东省
农业
科学院
家禽
研究所
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2010年第5期585-589,共5页
基金
国家科技支撑计划(2006BAD06A11)
文摘
根据对山东IBV流行株的遗传变异分析,选取流行代表株LC2,扩增其S1基因,将其S1基因克隆到pPIC9K载体中,构建了真核表达质粒pPIC9K-S1,经SacⅠ线性化后,通过电转化到毕赤酵母GS115中,经MD/MM及G418筛选,PCR鉴定,获得多拷贝阳性重组菌pPIC9K-S1-GS115。将重组菌在0.5%甲醇中进行诱导分泌表达,对表达产物进行SDS-PAGE,Western blot分析。结果显示,在酵母培养基上清中检测到分子量为90 ku为目的蛋白,与鸡IBV阳性血清发生特异性反应。将表达上清及其重组菌菌体饲喂SPF鸡,40 d后采血,可检测到IBV保护性抗体。结果表明:表达的IBV的S1蛋白具有很好的免疫原性,为ELISA诊断试剂盒的研制及IBV疫苗的研制奠定基础。
关键词
鸡传染性支气管炎病毒
S1基因
毕赤酵母
表达
免疫原性
Keywords
IBV
S1 gene
Pichia pastoris
expression
immunogenicity
分类号
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
7株鸭肝炎病毒分离株及疫苗株的全基因组序列测定与变异分析
被引量：
10
2
作者
马秀丽
于可响
吴静
宋敏训
廖明
辛朝安
机构
山东省农业科学院家禽研究所山东省禽病诊断与免疫重点实验室
华南
农业
大学兽医
学院
农业
部养
禽
与
禽
病
防治
重点
实验室
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第8期1209-1214,共6页
基金
山东省自然基金项目(Z2006D06)
家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放课题
文摘
为了分析中国鸭肝炎病毒(DHV)的遗传变异和进化关系,作者测定了中国不同地区分离的7株DHV及1株疫苗株的全基因组序列,并与公布的40株DHV序列进行比较分析。结果发现VP1变异程度较大,高变区主要集中在180-194位和213-219位;不同毒株的潜在N-糖基化位点存在较大差异。多数基因的进化分析均表现出一致的结果,测序的8个毒株均分布在同一个遗传谱系,属基因A型,与基因B型和基因C型遗传距离较远,不在同一分支上。而JYZ02株与R85952株的遗传距离最近,属同一个亚支,提示JYZ02株可能由毒株R85952演化而来。结合氨基酸序列相似性分析和代表毒株的血清交叉中和试验结果,表明近年分离并测序的上述7个毒株未发生抗原变异。从多毒株进化分析结果可以看出,血清1型DHV仍是我国流行的优势血清型。
关键词
鸭肝炎病毒
遗传变异
进化分析
Keywords
duck hepatitis virus
genetic variations
phylogenetic analysis
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定
3
作者
姜亦飞
亓丽红
黄兵
李玉峰
于可响
宋敏训
机构
山东省
农业
科学院
家禽
研究所
/
山东省
禽
病
诊断与
免疫
重点
实验室
出处
《山东农业科学》
2011年第1期100-102,共3页
基金
国家科技支撑计划(2006BAD06A11)
山东省农业科学院青年基金(2007YQN025)
文摘
用纯化的鸡传染性支气管炎病毒免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Ag8.653融合。对杂交瘤细胞及时筛选,阳性孔经3次有限稀释法克隆,成功获得3株能稳定传代并分泌抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株1F4F7D9、3E9G3D4、4B8B3F8。通过间接ELISA、血凝抑制以及琼脂糖扩散等方法检测,3株单克隆抗体的腹水间接ELISA效价达106以上并且具有良好的特异性。
关键词
鸡传染性支气管炎病毒
单克隆抗体
制备
鉴定
Keywords
Avian infectious bronchitis virus （IBV）
Monoclonal antibody
Preparation
Identification
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的表达及其免疫学原性分析
亓丽红
艾武
黄兵
刘涛
秦卓明
宋敏训
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2010
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
7株鸭肝炎病毒分离株及疫苗株的全基因组序列测定与变异分析
马秀丽
于可响
吴静
宋敏训
廖明
辛朝安
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定
姜亦飞
亓丽红
黄兵
李玉峰
于可响
宋敏训
《山东农业科学》
2011
0
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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