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吉林地区一株鸡传染性法氏囊病毒的分离与鉴定 被引量:2
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作者 刘存霞 费亦东 +5 位作者 王锐 吴静 田雪 赵巧雅 路晓 马秀丽 《家禽科学》 2018年第10期5-9,共5页
为确定引起吉林省某鸡场死亡的病原,剖检送检病死鸡,采集法氏囊、肝脏、脾脏等样品,经研磨无菌处理后接种SPF鸡胚传代,再经CEF细胞盲传进行病毒分离、PCR检测、动物回归、电镜观察、间接免疫荧光鉴定。研究结果表明鸡胚出现水肿出血、... 为确定引起吉林省某鸡场死亡的病原,剖检送检病死鸡,采集法氏囊、肝脏、脾脏等样品,经研磨无菌处理后接种SPF鸡胚传代,再经CEF细胞盲传进行病毒分离、PCR检测、动物回归、电镜观察、间接免疫荧光鉴定。研究结果表明鸡胚出现水肿出血、电镜可见病毒粒子,间接免疫荧光可见阳性绿色荧光,成功分离鉴定病原为鸡传染性法氏囊病毒(Infectious Bursa Disease Virus,IBDV),命名为JL-01/2007,为IBDV流行分布提供数据支持。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊 分离鉴定 动物回归试验
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鸭肠炎病毒SORF3基因的克隆及表达载体的构建
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作者 刘存霞 吴静 +5 位作者 田雪 赵巧雅 路晓 王林 李玉峰 宋敏训 《家禽科学》 2018年第11期34-37,共4页
克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,I... 克隆鸭病毒性肠炎病毒(Duck Enteritis Virus,DEV)SORF3基因并进行原核表达,为研究SORF3基因功能奠定基础。以DEV基因组为模板,PCR扩增SOFR3基因克隆至表达载体pET32a,构建重组表达质粒pET32a-SORF3,将重组质粒转化至感受态细胞BL21中,IPTG诱导表达并进行SDS-PAGE及Werstern-blot鉴定。结果构建的原核表达质粒pET32aSORF3转化BL21后经IPTG诱导4h,可表达分子量约50kDa融合蛋白,Western blot显示重组蛋白可以被Anti-His标签抗体识别,表明成功构建了pET32a-SORF3原核表达质粒,并能在大肠杆菌中表达具有免疫反应性的SORF3,为SORF3基因的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 SORF3 原核表达
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鸭肠炎病毒基因组末端的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 周丽媛 关飞 +3 位作者 于可响 黄兵 单虎 李玉峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期40-44,共5页
根据已知的鸭肠炎病毒基因组序列设计2对引物RTLT1、RTLT2,取基因组自连产物进行PCR反应,分别得到全长16071、978 bp的序列。将PCR产物克隆至pMD18-T载体,对重组质粒进行PCR和酶切鉴定,将阳性质粒测序,结果显示2对引物扩增的重叠序列部... 根据已知的鸭肠炎病毒基因组序列设计2对引物RTLT1、RTLT2,取基因组自连产物进行PCR反应,分别得到全长16071、978 bp的序列。将PCR产物克隆至pMD18-T载体,对重组质粒进行PCR和酶切鉴定,将阳性质粒测序,结果显示2对引物扩增的重叠序列部分完全一致。该段序列G+C含量高达75%,含有大量直接和反向重复序列,并发现4个末端特征序列,分别为具有回文结构的α序列、包含两测末端接合位点的β序列、高度保守序列的γ序列和AnTn序列。将该序列与马疱疹病毒Ⅰ型(EHV-1)、牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)、水痘带状疱疹病毒(VZV)、猪伪狂犬病毒(PRV)末端序列进行比较,证实所得到的序列为鸭肠炎病毒基因组末端序列,这些特征序列的发现对进一步了解DEV复制机制有很大帮助。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 基因组末端 克隆 序列分析
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北京鸭关节炎病例的细菌分离与鉴定 被引量:2
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作者 田雪 孙晓军 +3 位作者 刘存霞 黄兵 李玉峰 宋敏训 《家禽科学》 2018年第10期42-46,共5页
从表现为关节炎症状的北京鸭体内分离到23株细菌,通过16S rDNA测序鉴定,确定分离株分别属于葡萄球菌、棒状杆菌和大肠杆菌,另有一株球菌尚不明分类地位。药物敏感试验结果显示,阿莫西林、阿米卡星等对分离菌具有较好的抑菌作用,而氟苯... 从表现为关节炎症状的北京鸭体内分离到23株细菌,通过16S rDNA测序鉴定,确定分离株分别属于葡萄球菌、棒状杆菌和大肠杆菌,另有一株球菌尚不明分类地位。药物敏感试验结果显示,阿莫西林、阿米卡星等对分离菌具有较好的抑菌作用,而氟苯尼考、阿奇霉素等抑菌效果较差。选取12个代表菌株进行动物试验,结果表明分离菌单独对肉鸭没有明显致病作用,说明这些细菌可能仅作为条件性致病菌存在于鸭场环境中。 展开更多
关键词 北京鸭 关节炎 细菌 药物敏感试验 16S RDNA
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血清6型鸭疫里默氏杆菌发酵工艺与攻毒模型的建立 被引量:1
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作者 崔松奇 饶潇君 +13 位作者 赵海明 田春利 阎燊 张文芳 张丹丹 李娥 刘洋 余海涛 刘兴刚 孔敏 高月花 胡峰 黄兵 李玉峰 《家禽科学》 2022年第1期12-19,共8页
本试验对不同地区分离的3株血清6型鸭疫里默氏杆菌,通过摇瓶试验筛选出血清6型鸭疫里默氏杆菌适宜的增菌液体培养基和细菌计数培养基,通过5 L发酵罐各菌株生长曲线的对比,筛选出适合工业化发酵的菌株以及发酵工艺参数,通过鸭疫里默氏杆... 本试验对不同地区分离的3株血清6型鸭疫里默氏杆菌,通过摇瓶试验筛选出血清6型鸭疫里默氏杆菌适宜的增菌液体培养基和细菌计数培养基,通过5 L发酵罐各菌株生长曲线的对比,筛选出适合工业化发酵的菌株以及发酵工艺参数,通过鸭疫里默氏杆菌疾病模型条件筛选确立了攻毒模型。结果显示:WF201910株和TA201912株适宜的增菌液体培养基为商品化的RA培养基,LY202001株适宜的增菌液体培养基为商品化的TSB培养基,三个菌株适宜的细菌计数培养基均为TSA培养基;5L发酵罐发酵TA201912株在RA液体培养基最高菌数可以达到3.28×10;CFU/mL,通过500L发酵罐放大工艺验证,该工艺参数适合于规模化生产;4周龄雏鸭腿部肌肉注射鸭疫里默氏杆菌3 d后开始发病,发病与死亡高峰期为攻毒后3~6 d,临床症状与病原学鉴定均符合血清6型鸭疫里默氏杆菌疾病。本试验为血清6型鸭疫里默氏杆菌灭活疫苗的研制打下了基础。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 血清型 发酵工艺 攻毒模型
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