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拮抗产气荚膜梭菌的芽孢杆菌的分离鉴定与益生特性研究
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作者 林显华 张甜甜 +1 位作者 吕文亮 王雨平 《现代畜牧兽医》 2025年第3期32-37,共6页
研究旨在为饲用芽孢杆菌的研发与应用提供参考。试验从肉鸡肠道内容物中分离筛选具有较强拮抗产气荚膜梭菌功能的芽孢杆菌,通过细菌形态学、生理生化鉴定和16S rDNA测序等方法确定其分类归属,并对其益生特性进行了研究。结果显示:菌株J... 研究旨在为饲用芽孢杆菌的研发与应用提供参考。试验从肉鸡肠道内容物中分离筛选具有较强拮抗产气荚膜梭菌功能的芽孢杆菌,通过细菌形态学、生理生化鉴定和16S rDNA测序等方法确定其分类归属,并对其益生特性进行了研究。结果显示:菌株J5-8为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),具有良好的耐热能力,经80、100、120℃处理10 min,芽孢存活率分别为94.6%、86.5%和81.1%。菌株J5-8在pH值低于3时仍有26%的菌体存活,在0.5%胆盐中存活率为82%,在模拟人工胃液、肠液等条件下均具有良好的耐受性。与同类菌株相比,菌株J5-8产酶种类及中性蛋白酶等活性均较高。研究表明,菌株J5-8具有良好的耐酸、胆盐以及耐温能力,而且能够产多种生物酶,可作为饲用芽孢杆菌进行防控产气荚膜梭菌的深入研究。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 产气荚膜梭菌 抑菌 分离 生物学特性
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1株表达新城疫病毒F蛋白重组乳酸菌的安全性评价
2
作者 张甜甜 翟延庆 《现代畜牧兽医》 2025年第7期22-27,共6页
研究旨在对1株表达新城疫病毒(NDV) F蛋白的重组乳酸菌LP3-2进行安全性评价。将菌株LP3-2接种于MRS平板培养后进行革兰氏染色、镜检,观察其菌落、菌体形态;之后通过血平板培养检测其溶血性,采用最低抑菌浓度测定法(MIC)评估菌株LP3-2对... 研究旨在对1株表达新城疫病毒(NDV) F蛋白的重组乳酸菌LP3-2进行安全性评价。将菌株LP3-2接种于MRS平板培养后进行革兰氏染色、镜检,观察其菌落、菌体形态;之后通过血平板培养检测其溶血性,采用最低抑菌浓度测定法(MIC)评估菌株LP3-2对7种常用抗生素的敏感性;通过经口灌胃(每日每只小鼠5.0×10^(7)~5.0×10^(9) CFU/0.2 mL,持续28 d)的方式感染小鼠,分析菌株LP3-2的动物致病性。结果显示,LP3-2在血平板上无溶血现象,对测试抗生素均表示敏感。经口灌胃悬菌液的小鼠均未出现明显的临床症状,小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均无肉眼可见病变,各试验组小鼠血清肌酐(CREA)含量均显著低于对照组(P<0.05)。研究表明,该株表达NDV F蛋白的重组乳酸菌具有较好的安全性,试验结果为其在新型疫苗研发等领域的进一步应用提供了安全基础,但仍需进一步深入研究其长期安全性及潜在风险。 展开更多
关键词 重组乳酸菌 新城疫病毒 致病性 溶血性 药物敏感性
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饲喂乳酸菌对母猪和哺乳仔猪生长性能、血清生化指标及粪便微生物数量的影响 被引量:47
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作者 楚青惠 汪官保 +5 位作者 曾勇庆 张哲 赵勇 张建梅 武慕达 谢伟仕 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期3362-3370,共9页
本试验旨在研究饮水中添加乳酸菌对母猪和哺乳仔猪生长性能、血清生化指标及粪便微生物数量的影响。试验选择相同胎次、妊娠后期(81-85 d)的母猪40头,随机分为4组,每组10头。对照组及3个试验组母猪通过饮水每天每头分别饲喂0、200、25... 本试验旨在研究饮水中添加乳酸菌对母猪和哺乳仔猪生长性能、血清生化指标及粪便微生物数量的影响。试验选择相同胎次、妊娠后期(81-85 d)的母猪40头,随机分为4组,每组10头。对照组及3个试验组母猪通过饮水每天每头分别饲喂0、200、250和300 m L乳酸菌液(活菌浓度≥1×10^9CFU/m L),试验期80 d;对照组及3个试验组哺乳仔猪通过饮水每天每头分别饲喂0、5、10和15 m L乳酸菌液,试验期7 d。结果表明:1)与对照组相比,250 m L乳酸菌液可极显著提高母猪断奶体况评分(P〈0.01),试验组母猪断奶后正常发情率和情期受胎率均为100.00%。2)试验组仔猪断奶重、平均日增重、仔猪皮毛发育状况评分较对照组均极显著提高(P〈0.01),其腹泻率均有降低趋势。3)与对照组相比,饲喂乳酸菌液显著增加母猪初乳免疫球蛋白G含量(P〈0.05),对乳蛋白、乳脂含量以及血清抗氧化指标也有提高趋势;300 m L乳酸菌液使母猪粪便中大肠杆菌、沙门氏菌数量显著减少(P〈0.05),而乳酸菌数量显著增多(P〈0.05)。试验证明,饲喂乳酸菌能够改善猪肠道微生态和健康状况,提高母猪的繁殖性能和哺乳仔猪的生长性能。 展开更多
关键词 母猪 哺乳仔猪 乳酸菌 生长性能 粪便微生物
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霉菌毒素生物脱毒剂对肉仔鸡生产性能、免疫功能及肝脏中毒素残留的影响 被引量:10
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作者 陈静 郭建慧 +5 位作者 刘乃芝 徐辉 任甜甜 曾佳佳 谷巍 王春凤 《中国饲料》 北大核心 2016年第22期16-20,36,共6页
试验旨在研究霉菌毒素降解菌复配水合钠钙铝酸盐使用对饲喂霉变饲料肉鸡的生长性能、免疫功能、血清生化指标及肝脏中毒素残留的影响。选取体重均匀、健康状况基本相近的300只白羽肉鸡随机分为3组,每组5个重复,每个重复20只。对照组(Ⅰ... 试验旨在研究霉菌毒素降解菌复配水合钠钙铝酸盐使用对饲喂霉变饲料肉鸡的生长性能、免疫功能、血清生化指标及肝脏中毒素残留的影响。选取体重均匀、健康状况基本相近的300只白羽肉鸡随机分为3组,每组5个重复,每个重复20只。对照组(Ⅰ组)饲喂正常玉米日粮;发霉饲料组(Ⅱ组)用50%霉变玉米替代正常玉米;霉菌毒素脱毒剂组(Ⅲ组)用50%霉变玉米替代正常玉米+2.0‰霉菌毒素脱毒剂。结果表明:(1)与对照组相比,发霉饲料组各生长阶段的平均日增重均显著降低(P<0.05),料重比显著升高(P<0.05);与发霉饲料组相比,霉菌毒素脱毒剂组显著提高了各生长阶段肉鸡的平均日增重(P<0.05),显著降低了各生长阶段肉鸡的料重比(P<0.05)。(2)24 d和38 d时均以试验Ⅲ组脾脏指数最高,分别高出发霉饲料组28.93%和11.36%,差异均显著(P<0.05);与发霉饲料组相比,霉菌毒素脱毒剂组显著提高了24 d和38 d肉鸡法氏囊指数。(3)38 d时试验Ⅱ组肉鸡血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶均最高,显著高于试验Ⅰ组和Ⅲ组(P<0.05);饲喂毒素饲料的试验Ⅱ组总蛋白和白蛋白含量均最低,均显著低于试验Ⅲ组(P<0.05)。(4)与试验Ⅱ组相比,试验Ⅲ组黄曲霉菌毒素B1和玉米赤霉稀酮含量分别降低53.53%和58.09%,差异均显著(P<0.05)。 展开更多
关键词 水合钠钙铝酸盐 益生菌 霉菌毒素 白羽肉鸡 生长性能 免疫性能 血清生化指标 肝脏毒素残留
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复合微生物的筛选及其发酵秸秆的应用效果 被引量:5
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作者 曾佳佳 陈静 +4 位作者 陈振 党士坤 徐海燕 谷巍 曹斌 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第3期124-128,共5页
为提高秸秆的发酵效果,通过筛选纤维素酶活力和木聚糖酶活力高的一定比例的复合菌株,并进行秸秆复合菌株发酵应用研究。结果表明,最佳复合菌株为:白腐菌+黑曲霉+米曲霉+芽孢杆菌+放线菌(1∶1∶1∶1∶1),其纤维素酶活最高值为203.64 U/g... 为提高秸秆的发酵效果,通过筛选纤维素酶活力和木聚糖酶活力高的一定比例的复合菌株,并进行秸秆复合菌株发酵应用研究。结果表明,最佳复合菌株为:白腐菌+黑曲霉+米曲霉+芽孢杆菌+放线菌(1∶1∶1∶1∶1),其纤维素酶活最高值为203.64 U/g,木聚糖酶活最高值为10017.41 U/g。发酵田间大堆小麦秸秆时,试验组发酵38 d的秸秆,中性洗涤纤维、粗纤维比发酵前显著降低(P<0.05),粗蛋白显著升高(P<0.05)。与对照组发酵38 d的秸秆相比,中性洗涤纤维显著降低(P<0.05),粗蛋白显著升高(P<0.05)。发酵过程中温度有高温期、中温期和低温期,发酵结束时秸秆pH值(7.73)为微碱性,符合发酵堆肥标准。发酵结束后试验组的秸秆比对照组的秸秆腐化程度高。因此,混菌发酵有助于提高秸秆的发酵效果。 展开更多
关键词 复合微生物 筛选 发酵 秸秆
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1株宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析 被引量:8
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作者 汪祥燕 辛国芹 +2 位作者 董佩佩 刘元香 徐海燕 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期2575-2581,共7页
本研究采用双层琼脂平板法从现代化肉鸡养殖场采集的粪便、污水和垫料样品中分离宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,并通过透射电子显微镜观察、噬菌谱分析、热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数及一步生长曲线等对分离纯化的噬菌体进行... 本研究采用双层琼脂平板法从现代化肉鸡养殖场采集的粪便、污水和垫料样品中分离宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,并通过透射电子显微镜观察、噬菌谱分析、热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数及一步生长曲线等对分离纯化的噬菌体进行生物学特性分析。结果显示,试验成功分离纯化出一株鸡白痢沙门氏菌噬菌体,命名STP98-a。该噬菌体噬菌斑直径4~5mm,圆形透明,无晕圈,其头部偏椭圆形,长径约61nm,横径约67nm,尾长约112nm,直径约10nm,属于长尾噬菌体科;能裂解不同血清型鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌肠亚种,噬菌谱宽;在30~60℃保持高活性;在pH 3.0~12.0稳定;最佳感染复数为0.001;一步生长曲线结果显示,其感染宿主菌潜伏期为5min,裂解期为135min,裂解量为93。综上所述,STP98-a为一株宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,可用于鸡白痢沙门氏菌噬菌体制剂的研发。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门氏菌噬菌体 宽噬菌谱 分离 生物学特性
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基因工程重组乳酸菌防控动物疫病的研究进展 被引量:12
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作者 刘乃芝 亓秀晔 +5 位作者 郭杨丽 程福亮 徐海燕 谷巍 单宝龙 王春凤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第4期1199-1208,共10页
大多数传染性病原体通过黏膜表面进入宿主,因此除了传统诱导系统免疫的注射疫苗外,还应该开发能诱导黏膜免疫的疫苗,从而在黏膜侵入点建立第一道防线,阻止病原体侵入机体。乳酸菌是人和大多数动物肠道内常见的益生菌,具有营养、免疫、... 大多数传染性病原体通过黏膜表面进入宿主,因此除了传统诱导系统免疫的注射疫苗外,还应该开发能诱导黏膜免疫的疫苗,从而在黏膜侵入点建立第一道防线,阻止病原体侵入机体。乳酸菌是人和大多数动物肠道内常见的益生菌,具有营养、免疫、抗感染等作用。自20世纪90年代以来,乳酸菌便作为食品级载体用作外源基因的表达,其可刺激机体产生针对其表达的外源蛋白的免疫反应,因而基因工程重组乳酸菌可作为潜在的黏膜免疫候选疫苗。乳酸菌作为疫苗载体具有许多有吸引力的优势:使用方式简单、非侵入性(通过口腔或鼻内)、能接受基因修饰且遗传稳定、表达蛋白不需纯化、成本相对较低、安全性能最高、在体内长期存活并不断表达外源蛋白、单次接种即可产生持久的免疫应答等。目前,选择正常菌群的乳酸菌为载体,构建重组乳酸菌已在预防细菌、病毒、寄生虫等病原感染宿主方面迅速开展起来,将它们用于预防相应疫病模型中均已取得了较好的防治效果。作者就近5年来基因工程重组乳酸菌的制备及其在防控动物疫病方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 乳酸菌 基因工程 重组
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重组鸡α-干扰素的表达及其生物活性的初步研究 被引量:6
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作者 程福亮 聂兆晶 +5 位作者 陈甜甜 刘洋庆 房栋 崔兆连 谷巍 王春凤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期35-39,共5页
为获得重组鸡α-干扰素并对其进行生物活性研究,本试验对重组大肠杆菌进行诱导表达,收集重组鸡α-干扰素包涵体后进行复性纯化及免疫印迹试验,并通过测定病毒EID50,在接种H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的鸡胚中进... 为获得重组鸡α-干扰素并对其进行生物活性研究,本试验对重组大肠杆菌进行诱导表达,收集重组鸡α-干扰素包涵体后进行复性纯化及免疫印迹试验,并通过测定病毒EID50,在接种H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的鸡胚中进行干扰素抗病毒活性试验,运用微变量细胞病变抑制法进行重组鸡α-干扰素抗病毒效价的测定。结果显示复性后重组鸡α-干扰素的免疫印迹试验成功获得了预期条带,在鸡胚中重组鸡α-干扰素具有显著的抗H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒等活性作用。在CEF/VSV细胞系上测定重组鸡α-干扰素的抗病毒效价为1.5×210 U/mg左右,高浓度重组鸡α-干扰素具有一定的细胞毒性。结果表明重组鸡α-干扰素蛋白具有免疫原性和抗原性,在鸡胚内具有较好的抑制或杀灭H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果,呈广谱性,抗病毒效价较高,为下一步抗病毒制品的创制奠定基础。 展开更多
关键词 鸡α-干扰素 表达 生物活性
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复合微生态制剂与饲用抗生素对肉雏鸡免疫性能和肠道微生物菌群的影响 被引量:8
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作者 谢全喜 张建梅 +1 位作者 李晓颖 谷巍 《家畜生态学报》 2011年第5期77-80,90,共5页
试验选取240只1日龄的黄羽肉雏鸡,随机分为II、II、III、V 4个组,其中I组为对照组,III、III、V组分别添加复合微生态制剂、头孢类药物和氟苯尼考药物,研究添加复合微生态制剂和饲用抗生素对肉雏鸡免疫性能和肠道菌群的影响。结果表明:... 试验选取240只1日龄的黄羽肉雏鸡,随机分为II、II、III、V 4个组,其中I组为对照组,III、III、V组分别添加复合微生态制剂、头孢类药物和氟苯尼考药物,研究添加复合微生态制剂和饲用抗生素对肉雏鸡免疫性能和肠道菌群的影响。结果表明:复合微生态制剂对肉雏鸡法氏囊的发育有明显促进作用,9日龄时复合微生态制剂组法氏囊指数分别高出对照组、头孢组和氟苯尼考组14.4%、31.8%、26.75%(P<0.05);但对脾脏的促进效果不明显。复合微生态制剂的添加可以在一定程度上增加肉雏鸡肠道内的有益菌群数量,头孢类抗生素对小肠内的乳杆菌抑制作用不明显,但能显著降低直肠内的乳杆菌数量。氟苯尼考则对乳杆菌类益生素没有明显副作用。 展开更多
关键词 复合微生态制剂 饲用抗生素 肉雏鸡 免疫性能
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不同微生物青贮剂对全株玉米青贮饲料的影响 被引量:4
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作者 侯楠楠 谢全喜 +5 位作者 雷春红 王梅 杨枭 鹿晓慧 周红 谷巍 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第11期63-66,共4页
选用两种不同的青贮发酵剂对全株玉米进行发酵,观察发酵8 d、10 d、20 d、40 d两种青贮发酵剂对全株玉米微生物消长及营养品质的影响。结果表明,经两种青贮发酵剂处理后,全株玉米青贮饲料均有酒香味;发酵前期(8 d、10 d)乳酸菌生长迅速... 选用两种不同的青贮发酵剂对全株玉米进行发酵,观察发酵8 d、10 d、20 d、40 d两种青贮发酵剂对全株玉米微生物消长及营养品质的影响。结果表明,经两种青贮发酵剂处理后,全株玉米青贮饲料均有酒香味;发酵前期(8 d、10 d)乳酸菌生长迅速,酵母菌生长相对缓慢。两种发酵剂对全株玉米青贮饲料的pH值、水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和粗纤维含量的影响差异不大,但对总酸、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量影响差异较大,青贮发酵剂B适合短期发酵使用,而青贮发酵剂A适合长期发酵保藏使用。两种青贮发酵剂处理的全株玉米青贮饲料中的限制因子(挥发性盐基氮、霉菌、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素)均符合相关标准要求。 展开更多
关键词 青贮剂 全株玉米青贮饲料 微生物消长 营养品质
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一株枯草芽孢杆菌噬菌体的生物学特性分析及抗性菌株的诱变筛选 被引量:2
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作者 刘秀侠 徐海燕 +3 位作者 辛国芹 穆熙军 孙学森 谷巍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期143-148,共6页
枯草芽孢杆菌工业生产发酵过程中经常出现噬菌体污染的问题,分离筛选以枯草芽孢杆菌为宿主菌的噬菌体,分析其生物学特性并采用自发突变方法筛选噬菌体抗性菌株。以枯草芽孢杆菌KC-260为宿主菌,从车间异常发酵液中分离纯化得到一株噬菌体... 枯草芽孢杆菌工业生产发酵过程中经常出现噬菌体污染的问题,分离筛选以枯草芽孢杆菌为宿主菌的噬菌体,分析其生物学特性并采用自发突变方法筛选噬菌体抗性菌株。以枯草芽孢杆菌KC-260为宿主菌,从车间异常发酵液中分离纯化得到一株噬菌体,将其命名为P260,富集培养后测定效价,对其热稳定性、最佳感染复数、宿主范围、抑制剂和消毒剂耐受性等生物学特性进行了研究。为防治噬菌体P260的污染,利用自发突变的方法筛选对噬菌体P260有抗性的枯草芽孢杆菌突变菌。结果显示,分离纯化得到一株效价为3.45×1010 PFU/m L的噬菌体P260,该噬菌体具有一定的宿主专一性,对凝结芽孢杆菌和短小芽孢杆菌不敏感。噬菌体P260在高温条件下很容易失活,不耐热,70℃处理15 min存活率下降极为明显;25 mg/L的Cl O2对P260有极强的杀灭作用;0.5%的草酸铵和柠檬酸铵对该噬菌体有一定的抑制作用。P260感染宿主菌的最佳感染复数为0.01,增殖的潜伏期为15 min,45 min进入裂解期。通过自发突变的方法获得了抗噬菌体菌株ZF-260,发酵过程中添加噬菌体后ZF-260的生长不受影响,说明ZF-260是一株可以抗噬菌体P260的优良菌株。研究了噬菌体P260的生物学特性,获得了遗传稳定且活菌数高的抗性菌株ZF-260。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 噬菌体 抑制剂 消毒剂 自发突变
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大肠杆菌噬菌体的分离及生物学特性研究 被引量:4
12
作者 李杨 王静 +3 位作者 霍恺 李晓颖 孔健 谷巍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期7-10,共4页
试验从鸡场周围环境中采集土样,在伊红美蓝培养基平板上分离纯化大肠杆菌,然后以其为宿主,分离相应的噬菌体,并研究其生物学特性。结果表明,共分离到大肠杆菌4株,经16S rDNA鉴定为埃希氏大肠杆菌。其中,以大肠杆菌LY4为宿主分离... 试验从鸡场周围环境中采集土样,在伊红美蓝培养基平板上分离纯化大肠杆菌,然后以其为宿主,分离相应的噬菌体,并研究其生物学特性。结果表明,共分离到大肠杆菌4株,经16S rDNA鉴定为埃希氏大肠杆菌。其中,以大肠杆菌LY4为宿主分离纯化到1株烈性噬菌体,负染经电镜观察该噬菌体由多面体头部及尾部组成,噬菌斑直径为2.5~3.8 mm,效价2.0×1010 PFU/mL,最佳感染复数为0.0001;在温度-20~37 ℃、pH 5.0~10.0范围内该噬菌体表现出良好的稳定性,但在人工胃液(pH 1.2)条件下,即可导致死亡;测定其一步生长曲线,该噬菌体潜伏期为20 min,裂解能力强,以上特性表明该噬菌体在鸡舍环境治理中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 大肠杆菌 噬菌体 生物学特性
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红曲霉的生物学特性、酯酶培养技术及质量鉴定 被引量:2
13
作者 施安辉 杨军方 +3 位作者 徐海燕 吕明霞 张志焱 程秀芳 《中国调味品》 CAS 北大核心 2006年第7期25-28,共4页
扼要地介绍了红曲霉的生物学特性,红曲霉固体酯酶的培养技术,红曲质量的鉴定及酯酶的酯化力和酯分解率的测定方法。
关键词 红曲霉 酯酶 培养技术 酯化力 酯分解率
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一株适于生产饲用复合酶制剂菌株的生物学特性及酶系分析 被引量:5
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作者 施安辉 单宝龙 +5 位作者 贾朋辉 杨军方 徐海燕 吕明霞 张志焱 程秀芳 《饲料工业》 2005年第24期12-16,共5页
乾氏曲霉又名流球曲霉,是属于黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉6号是实验室工作人员诱变乾氏曲霉得到的一株纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶等酶活较高的菌株。该实验室对黑曲霉6号的一般生物学特性及培养特征进行了研究,并对其主... 乾氏曲霉又名流球曲霉,是属于黑曲霉群中具有重要应用前景的菌株。而黑曲霉6号是实验室工作人员诱变乾氏曲霉得到的一株纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶等酶活较高的菌株。该实验室对黑曲霉6号的一般生物学特性及培养特征进行了研究,并对其主要酶系——纤维素酶、蛋白酶、淀粉糖化酶和果胶酶进行了酶系分析、活性测定和最佳产酶条件的分析,为应用试验打下基础。 展开更多
关键词 黑曲霉 酶系分析 产酶条件
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一株嗜水气单胞菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性 被引量:3
15
作者 高绪娜 李金敏 +2 位作者 桑瑞新 丁庆华 徐海燕 《中国饲料》 北大核心 2021年第13期18-23,共6页
本试验以嗜水气单胞菌CVCC-4002为宿主从鲤鱼内脏中分离得到一株噬菌体,命名为BLCC16-001,用PEG8000浓缩、超速离心获得高纯度的噬菌体进行电镜观察。测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性及噬菌体... 本试验以嗜水气单胞菌CVCC-4002为宿主从鲤鱼内脏中分离得到一株噬菌体,命名为BLCC16-001,用PEG8000浓缩、超速离心获得高纯度的噬菌体进行电镜观察。测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性及噬菌体体外杀菌效果。结果表明:电镜下,噬菌体BLCC16-001头部直径约60 nm,尾部长约140 nm,还能够裂解4株嗜水气单胞菌,其最佳感染复数为0.0001。噬菌体BLCC16-001潜伏期为20 min,随后进入平台期,爆发量约为1000 PFU/cell;能够耐受60℃以下的温度,超过70℃会急剧失活;对酸碱均具有一定的抵抗力,在pH为4.0~10.0时稳定;在感染复数为0.1时,3 h对宿主菌杀菌率超过90%,感染复数为1时,3 h对宿主菌杀菌率超99%。噬菌体BLCC16-001是一株宽宿主谱的能够耐受一定温度和酸碱环境的肌尾科新型烈性噬菌体,对其研究可为嗜水气单胞菌噬菌体的研究提供理论基础。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 噬菌体 生物学特性
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新型微生物肥料发展现状与前景 被引量:15
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作者 黄启亮 韩广泉 +3 位作者 侯红艳 王珂 乔蓬蕾 张建梅 《现代农业科技》 2015年第3期218-220,共3页
结合我国当前发展和应用微生物肥料的迫切需求,从根瘤菌类新型微生物肥料、解磷钾类新型微生态肥料、复合微生物类新型微生态肥料等方面介绍了我国对于微生物肥料的研究与应用现状,并分析了新型微生物肥料的发展前景。
关键词 微生物肥料 研究 应用 现状 发展前景
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基于RT-RAA-CRISPR/Cas13a的猪流行性腹泻病毒检测方法的建立与初步应用
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作者 郑江涛 刘哲言 +2 位作者 王永富 青易 朱玲 《四川农业大学学报》 北大核心 2025年第4期1034-1042,共9页
【目的】开发一种针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高特异性、高灵敏度且便捷的检测方法。【方法】结合重组酶辅助扩增(RAA)技术与CRISPR-Cas13a系统,针对PEDV的M基因设计RT-RAA引物、CRISPR RNA及报告探针。通过优化反应条件,构建具备双... 【目的】开发一种针对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的高特异性、高灵敏度且便捷的检测方法。【方法】结合重组酶辅助扩增(RAA)技术与CRISPR-Cas13a系统,针对PEDV的M基因设计RT-RAA引物、CRISPR RNA及报告探针。通过优化反应条件,构建具备双读数功能的RT-RAA-CRISPR/Cas13a可视化平台,并对其检测能力进行了评估。【结果】该方法可特异性检测PEDV,与猪德尔塔冠状病毒、猪瘟病毒、猪轮状病毒、猪圆环病毒2型、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应,且检测灵敏度达到1 copy/µL;与行业标准RT-qPCR方法的检测结果相比,其符合率达到100%。【结论】建立的RT-RAA-CRISPR/Cas13a可视化检测方法可在1 h内完成对PEDV的检测,为快速现场诊断和防控提供了有力的技术保障。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 反转录-重组酶介导等温核酸扩增技术 规律间隔成簇短回文重复序列-关联蛋白13a 可视化检测
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猪塞内卡病毒荧光素酶免疫吸附试验方法的建立
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作者 王宇欣 王永富 +3 位作者 青易 王宗洪 漆启文 朱玲 《西南农业学报》 北大核心 2025年第8期1749-1756,共8页
【目的】为提升猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体检测效率,满足规模化养殖场血清学监测需求,建立一种灵敏、快速、特异且适于大规模应用的荧光素酶免疫吸附试验(LISA)方法。【方法】基于哺乳动物表达系统,构建并表达SVA VP1与海肾... 【目的】为提升猪塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)抗体检测效率,满足规模化养殖场血清学监测需求,建立一种灵敏、快速、特异且适于大规模应用的荧光素酶免疫吸附试验(LISA)方法。【方法】基于哺乳动物表达系统,构建并表达SVA VP1与海肾荧光素酶(Rluc)融合蛋白VP1-Rluc,获得可溶性抗原。以该融合蛋白为核心抗原,建立LISA检测体系,并系统优化包被浓度、血清稀释度、封闭条件及孵育时间等参数。进一步评估其特异性、灵敏度、重复性及与商品化ELISA方法的一致性。【结果】Western blot和IFA结果证实VP1-Rluc蛋白成功表达,具有良好抗原性。建立的LISA方法检测限达1∶6400,变异系数均小于10%,无交叉反应。ROC曲线分析确定阳性判定临界值为P/N=1.908,相对特异性和灵敏度分别为96.2%和95.7%。在554份临床样本检测中,与商品化ELISA一致性良好(Kappa=0.958)。该方法操作简便、成本低,且在早期感染样本中亦显示出良好性能。【结论】本研究建立的基于VP1-Rluc融合蛋白的LISA方法具有灵敏、特异、稳定及经济等优势,适用于SVA大规模血清监测,具备良好的推广应用前景。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 VP1蛋白 原核表达 LISA
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我国生物农药发展探讨 被引量:7
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作者 王珂 韩广泉 +3 位作者 侯红燕 黄启亮 乔蓬蕾 张建梅 《现代农业科技》 2015年第2期149-150,共2页
概述了生物农药的定义、种类、作用机理及应用,并针对我国生物农药的应用现状及存在的问题,对其发展前景进行了展望。
关键词 生物农药 种类 机理 发展现状 展望
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微生物发酵中草药在动物生产中的应用 被引量:17
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作者 张高娜 张建梅 谷巍 《广东饲料》 2012年第10期28-31,共4页
中草药饲料添加剂具有低毒性、无抗药性、多功能性等优点,且已在畜牧生产中得到广泛应用。而微生物在中草药发酵过程中发挥着强大的分解转化能力,并能产生丰富的次生代谢产物,可大幅提高中草药中活性成分的含量,提高疗效,降低毒副作用... 中草药饲料添加剂具有低毒性、无抗药性、多功能性等优点,且已在畜牧生产中得到广泛应用。而微生物在中草药发酵过程中发挥着强大的分解转化能力,并能产生丰富的次生代谢产物,可大幅提高中草药中活性成分的含量,提高疗效,降低毒副作用。本文对发酵中草药的特点及其在动物生产中的应用进行了综述,并对今后的研发方向提出了自己的观点。 展开更多
关键词 微生物 发酵 中草药 应用
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