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西格列汀通过阻断核因子-κB信号通路抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应
被引量：
7
1
作者
刘相
康文燕
+1 位作者
商玲玲
葛少华
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期153-163,共11页
目的明确西格列汀对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响,并探讨其发挥作用的分子学机制,为未来西格列汀在牙周炎治疗中的应用提供初步的实验依据。方法收集临床患者健康牙龈组织标本,利用酶消化法分...
目的明确西格列汀对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响,并探讨其发挥作用的分子学机制,为未来西格列汀在牙周炎治疗中的应用提供初步的实验依据。方法收集临床患者健康牙龈组织标本,利用酶消化法分离培养HGF并进行细胞来源鉴定;采用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测LPS和西格列汀与HGF共培养24、48 h细胞增殖变化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测炎性细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、趋化因子配体2(CCL2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)的基因表达水平;酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中IL-6、IL-8和CCL2的蛋白表达水平;应用蛋白免疫印迹法检测核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况,通过qRT-PCR验证NF-κB通路抑制剂BAY11-7082对LPS诱导的HGF炎症细胞因子基因表达水平的影响。结果低浓度的西格列汀(0.1、0.25、0.5μmol·L^(-1))作用24、48 h对HGF的生长无影响,而高浓度西格列汀(5~1000μmol·L^(-1))明显抑制了细胞增殖。西格列汀浓度依赖性抑制5μg·mL^(-1)LPS诱导的HGF中IL-6、IL-8、CCL2和SOD2的基因表达水平。此外,西格列汀显著抑制LPS诱导的IL-6、IL-8和CCL2蛋白表达水平。蛋白免疫印迹结果表明:0.5μmol·L^(-1)西格列汀显著性抑制了LPS诱导的NF-κB信号通路激活,qRT-PCR结果表明0.5μmol·L^(-1)西格列汀与5μmol·L^(-1)BAY11-7082均显著抑制了LPS诱导的IL-6、IL-8、CCL2和SOD2的基因表达水平。结论西格列汀通过阻断NF-κB信号通路的激活来抑制LPS诱导的HGF炎症反应。
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关键词
西格列汀
脂多糖
核因子-ΚB
炎症
人牙龈成纤维细胞
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题名
西格列汀通过阻断核因子-κB信号通路抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应
被引量：
7
1
作者
刘相
康文燕
商玲玲
葛少华
机构
山东大学齐鲁医学院·口腔医学院·口腔医院牙周科山东省口腔组织再生重点实验室山东省口腔生物材料与组织再生工程实验室
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期153-163,共11页
基金
国家自然科学基金(81670993,81873716)。
文摘
目的明确西格列汀对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)炎症反应的影响,并探讨其发挥作用的分子学机制,为未来西格列汀在牙周炎治疗中的应用提供初步的实验依据。方法收集临床患者健康牙龈组织标本,利用酶消化法分离培养HGF并进行细胞来源鉴定;采用细胞增殖-毒性检测试剂盒检测LPS和西格列汀与HGF共培养24、48 h细胞增殖变化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测炎性细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8、趋化因子配体2(CCL2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)的基因表达水平;酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中IL-6、IL-8和CCL2的蛋白表达水平;应用蛋白免疫印迹法检测核因子-κB(NF-κB)信号通路的激活情况,通过qRT-PCR验证NF-κB通路抑制剂BAY11-7082对LPS诱导的HGF炎症细胞因子基因表达水平的影响。结果低浓度的西格列汀(0.1、0.25、0.5μmol·L^(-1))作用24、48 h对HGF的生长无影响,而高浓度西格列汀(5~1000μmol·L^(-1))明显抑制了细胞增殖。西格列汀浓度依赖性抑制5μg·mL^(-1)LPS诱导的HGF中IL-6、IL-8、CCL2和SOD2的基因表达水平。此外,西格列汀显著抑制LPS诱导的IL-6、IL-8和CCL2蛋白表达水平。蛋白免疫印迹结果表明:0.5μmol·L^(-1)西格列汀显著性抑制了LPS诱导的NF-κB信号通路激活,qRT-PCR结果表明0.5μmol·L^(-1)西格列汀与5μmol·L^(-1)BAY11-7082均显著抑制了LPS诱导的IL-6、IL-8、CCL2和SOD2的基因表达水平。结论西格列汀通过阻断NF-κB信号通路的激活来抑制LPS诱导的HGF炎症反应。
关键词
西格列汀
脂多糖
核因子-ΚB
炎症
人牙龈成纤维细胞
Keywords
Sitagliptin
lipopolysaccharide
nuclear factor-κB
inflammation
human gingival fibroblasts
分类号
R781.42 [医药卫生—口腔医学]
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1
西格列汀通过阻断核因子-κB信号通路抑制脂多糖诱导的人牙龈成纤维细胞炎症反应
刘相
康文燕
商玲玲
葛少华
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
7
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