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人肾癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学特性的研究
被引量：
7
1
作者
张斌
阮喜云
+5 位作者
陈杰
张士宝
刘双庆
王全颖
杨广笑
刘庆勇
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期68-70,共3页
目的建立人肾癌鸡胚模型,探讨其形态及生物学特性。方法将肾癌细胞系RLC-310接种于鸡胚绒毛尿囊膜,观察影响肾癌鸡胚移植瘤成活的因素、移植瘤生长特性、形态学特征和生物学性状。结果成功建立了人肾癌鸡胚移植瘤模型;移植瘤易于生长并...
目的建立人肾癌鸡胚模型,探讨其形态及生物学特性。方法将肾癌细胞系RLC-310接种于鸡胚绒毛尿囊膜,观察影响肾癌鸡胚移植瘤成活的因素、移植瘤生长特性、形态学特征和生物学性状。结果成功建立了人肾癌鸡胚移植瘤模型;移植瘤易于生长并具有较强的血管诱导作用;光镜下移植瘤具有与人肾癌类似的组织结构。结论该模型容易建立,能动态观察肾癌诱导血管生成的全过程,可用于肾癌的实验研究。
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关键词
肾癌
鸡胚绒毛尿囊膜
动物模型
血管生成
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职称材料
G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析
被引量：
1
2
作者
刘波
孙泽强
+4 位作者
刘庆勇
陈杰
王司军
杨广笑
王全颖
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期6-11,共6页
目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化,分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法 PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段,将G250肽插入去除主要免疫...
目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化,分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法 PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段,将G250肽插入去除主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/C-G250肽-C,为更换酶切位点,以pGEMEX/C-G250肽-C为模板,PCR扩增C-G250肽-C基因片段,最终将目的基因亚克隆入原核表达质粒pET28a(+)中,IPTG诱导融合蛋白表达,利用Ni 2+-NTA亲和层析法纯化重组融合蛋白,SDSPAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化后融合蛋白经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗体的滴度。结果酶切及基因测序鉴定证实融合基因正确重组于表达质粒pET28a(+)中,原核表达并纯化后,该分离纯化融合蛋白纯度达95%以上,其相对分子质量约为22.35。BALB/c小鼠经4次免疫后,所有小鼠血清中均可检测到抗体,免疫第6周其血清中抗体滴度可达到1∶5.12×105,抗G250肽抗体滴度达到1∶6.4×104,抗HBcAg抗体滴度不超过1∶4×103。结论成功构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,在大肠杆菌中可高效表达,纯化后融合蛋白具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体。
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关键词
融合蛋白
G250
HBCAG
免疫原性
肾癌
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职称材料
题名
人肾癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学特性的研究
被引量：
7
1
作者
张斌
阮喜云
陈杰
张士宝
刘双庆
王全颖
杨广笑
刘庆勇
机构
山东大学附属济南市中心医院泌尿外科
山东
省立
医院
神经内科
西安华广生物工程有限公司
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期68-70,共3页
基金
山东省自然科学基金资助课题(No.Y2006C04)~~
文摘
目的建立人肾癌鸡胚模型,探讨其形态及生物学特性。方法将肾癌细胞系RLC-310接种于鸡胚绒毛尿囊膜,观察影响肾癌鸡胚移植瘤成活的因素、移植瘤生长特性、形态学特征和生物学性状。结果成功建立了人肾癌鸡胚移植瘤模型;移植瘤易于生长并具有较强的血管诱导作用;光镜下移植瘤具有与人肾癌类似的组织结构。结论该模型容易建立,能动态观察肾癌诱导血管生成的全过程,可用于肾癌的实验研究。
关键词
肾癌
鸡胚绒毛尿囊膜
动物模型
血管生成
Keywords
renal cell carcinoma
chick embryo chorioallantoic membrane
animal model
angiogenesis
分类号
R737.11 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析
被引量：
1
2
作者
刘波
孙泽强
刘庆勇
陈杰
王司军
杨广笑
王全颖
机构
山东大学
医学院
山东大学附属济南市中心医院泌尿外科
西安华广生物工程公司
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期6-11,共6页
基金
山东省自然科学基金资助项目(No.Y2006C04)~~
文摘
目的构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因的原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,并通过大肠杆菌进行原核表达并纯化,分析表达融合蛋白的免疫原性及抗原性。方法 PCR扩增编码G250抗原中249～268氨基酸的基因片段,将G250肽插入去除主要免疫优势区的重组质粒pGEMEX/HBcAg中,获得重组质粒pGEMEX/C-G250肽-C,为更换酶切位点,以pGEMEX/C-G250肽-C为模板,PCR扩增C-G250肽-C基因片段,最终将目的基因亚克隆入原核表达质粒pET28a(+)中,IPTG诱导融合蛋白表达,利用Ni 2+-NTA亲和层析法纯化重组融合蛋白,SDSPAGE鉴定融合蛋白的表达,纯化后融合蛋白经腹腔注射免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗体的滴度。结果酶切及基因测序鉴定证实融合基因正确重组于表达质粒pET28a(+)中,原核表达并纯化后,该分离纯化融合蛋白纯度达95%以上,其相对分子质量约为22.35。BALB/c小鼠经4次免疫后,所有小鼠血清中均可检测到抗体,免疫第6周其血清中抗体滴度可达到1∶5.12×105,抗G250肽抗体滴度达到1∶6.4×104,抗HBcAg抗体滴度不超过1∶4×103。结论成功构建肾癌G250抗原肽与HBcAg重组基因原核表达质粒pET28a(+)/C-G250肽-C,在大肠杆菌中可高效表达,纯化后融合蛋白具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生高滴度和高特异性的抗体。
关键词
融合蛋白
G250
HBCAG
免疫原性
肾癌
Keywords
fusion protein
G250
HBcAg
immunogenicity
renal carcinoma
分类号
R737.11 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人肾癌鸡胚模型的建立及其肿瘤生物学特性的研究
张斌
阮喜云
陈杰
张士宝
刘双庆
王全颖
杨广笑
刘庆勇
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
G250抗原肽与HBcAg融合基因原核表达载体的构建及表达蛋白的免疫分析
刘波
孙泽强
刘庆勇
陈杰
王司军
杨广笑
王全颖
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2014
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