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人多能干细胞诱导类肾的实验研究
1
作者
俞欣
李开霖
+2 位作者
孔峰
赵升田
张登禄
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期11-15,53,共6页
目的:体外诱导人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)来源的类肾体,探讨类肾的结构成熟度、血管化和非肾系分化现象。方法:通过肾上皮分化试剂盒诱导hPSC成类肾,用免疫荧光观察类肾元结构中特异性标志物CDH1、LTL和PODX的表达...
目的:体外诱导人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)来源的类肾体,探讨类肾的结构成熟度、血管化和非肾系分化现象。方法:通过肾上皮分化试剂盒诱导hPSC成类肾,用免疫荧光观察类肾元结构中特异性标志物CDH1、LTL和PODX的表达,透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察肾小球和肾小管微观结构;第15天类肾移植到SCID小鼠肾包膜下,4周后处死动物,取移植物行组织形态学观察,免疫荧光法观察移植物中人抗核抗原(human nuclear antigen,HNA)、CDH1、PODX和MECA-32的表达。结果:肾脏特异性标志物CDH1、LTL和PODX呈阳性表达,电镜观察到不成熟的足细胞和肾小管结构;移植后的类肾体积增大,观察到肉眼可见的血管,HE染色移植物内可见红细胞和类软骨组织,HNA、CDH1、PODX和MECA-32呈阳性表达。结论:hPSC可体外诱导结构不成熟的类肾,在体内环境下,类肾可完成血管化并持续生长,但存在大量非肾系结构。
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关键词
人多能干细胞
类肾
血管化
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职称材料
间介中胚层样细胞在肾脏再生中的应用
被引量：
1
2
作者
张建烨
管勇
+1 位作者
孔峰
赵升田
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期291-299,共9页
目的体外诱导脂肪干细胞分化为间介中胚层样细胞,对肾脏脱细胞支架进行再细胞化,经共培养构建有部分肾脏结构的组织工程肾脏。方法手术获取Wistar大鼠腹股沟脂肪垫,从中分离、培养原代脂肪干细胞后对其进行干细胞特性鉴定。经过在不同...
目的体外诱导脂肪干细胞分化为间介中胚层样细胞,对肾脏脱细胞支架进行再细胞化,经共培养构建有部分肾脏结构的组织工程肾脏。方法手术获取Wistar大鼠腹股沟脂肪垫,从中分离、培养原代脂肪干细胞后对其进行干细胞特性鉴定。经过在不同阶段添加糖原合成酶激酶3抑制剂(CHIR99021)和成纤维生长因子9(FGF9),诱导脂肪干细胞分化为间介中胚层样细胞,并于诱导7 d后进行间介中胚层相关蛋白鉴定。将诱导成功的间介中胚层样细胞结合制备好的肾脏脱细胞支架进行共培养,10 d后获取再细胞化的组织工程肾脏,并对其进行肾脏分化的鉴定。结果获取的脂肪干细胞具有成骨成脂及成软骨分化的能力,能表达脂肪干细胞表面标志物。体外诱导7 d后得到的间介中胚层样细胞经过免疫荧光鉴定可以观察到锌指蛋白转录因子和配对盒基因- 2的阳性表达,Western blot验证可得到同样的阳性结果。结合肾脏脱细胞支架后培养10 d,通过免疫荧光鉴定可以观察到Wilms肿瘤基因1、 GATA连接蛋白- 3和E-钙黏素的阳性表达。结论脂肪干细胞可被诱导分化为间介中胚层样细胞,诱导后的间介中胚层样细胞结合肾脏脱细胞支架可以观察到肾系分化的现象。
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关键词
脂肪干细胞
间介中胚层样细胞
脱细胞支架
诱导分化
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职称材料
Caveolae在高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成中的作用
3
作者
卢圣霞
刘元涛
+3 位作者
孔峰
杜月娟
刘晔
傅余芹
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期626-631,共6页
目的:探讨胞膜小凹(caveolae)在高糖(HG)诱导大鼠肾小球系膜细胞(MCs)细胞外基质(extra-cellular matrix,ECM)表达过程中的作用。方法:传代培养的大鼠MCs同步化后分为:(1)正常糖组;(2)HG组;(3)HG+甲基-β-环糊精(β-MCD)组;(4)HG+β-MCD...
目的:探讨胞膜小凹(caveolae)在高糖(HG)诱导大鼠肾小球系膜细胞(MCs)细胞外基质(extra-cellular matrix,ECM)表达过程中的作用。方法:传代培养的大鼠MCs同步化后分为:(1)正常糖组;(2)HG组;(3)HG+甲基-β-环糊精(β-MCD)组;(4)HG+β-MCD+胆固醇组。用Western blotting检测小凹蛋白1(Cav-1)、磷酸化小凹蛋白1(p-Cav-1-Y14)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白的表达水平,用实时定量PCR检测细胞中Cav-1 mRNA表达变化,用ELISA方法检测上清中纤维连接蛋白(FN)的蛋白含量。结果:(1)高糖状态下,系膜细胞FN和ColⅠ蛋白表达水平均显著增加(均P<0.05)。(2)高糖培养显著增加p-Cav-1-Y14水平(P<0.01),而对Cav-1 mRNA及蛋白表达无明显影响(P>0.05)。(3)β-MCD预处理抑制了高糖诱导的p-Cav-1-Y14升高(P<0.01)及FN表达(P<0.05),但对高糖诱导的Col I表达无影响;β-MCD的作用可被胆固醇抑制。结论:高糖可显著增加系膜细胞1型胶原及纤维连接蛋白的合成。高糖诱导的纤维连接蛋白合成与Cav-1磷酸化水平增加有关。
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关键词
小凹蛋白1
纤维连接蛋白
Ⅰ型胶原
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职称材料
题名
人多能干细胞诱导类肾的实验研究
1
作者
俞欣
李开霖
孔峰
赵升田
张登禄
机构
中国科学技术
大学
附属第一
医院
(安徽省立
医院
)急诊外科
山东大学第二医院中心实验室
山东
省立
医院
山东
省泌尿器官与功能重建工程
实验室
山东
中医药
大学
附属
医院
实验
中心
出处
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期11-15,53,共6页
基金
国家自然科学基金(81700592)。
文摘
目的:体外诱导人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC)来源的类肾体,探讨类肾的结构成熟度、血管化和非肾系分化现象。方法:通过肾上皮分化试剂盒诱导hPSC成类肾,用免疫荧光观察类肾元结构中特异性标志物CDH1、LTL和PODX的表达,透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)观察肾小球和肾小管微观结构;第15天类肾移植到SCID小鼠肾包膜下,4周后处死动物,取移植物行组织形态学观察,免疫荧光法观察移植物中人抗核抗原(human nuclear antigen,HNA)、CDH1、PODX和MECA-32的表达。结果:肾脏特异性标志物CDH1、LTL和PODX呈阳性表达,电镜观察到不成熟的足细胞和肾小管结构;移植后的类肾体积增大,观察到肉眼可见的血管,HE染色移植物内可见红细胞和类软骨组织,HNA、CDH1、PODX和MECA-32呈阳性表达。结论:hPSC可体外诱导结构不成熟的类肾,在体内环境下,类肾可完成血管化并持续生长,但存在大量非肾系结构。
关键词
人多能干细胞
类肾
血管化
Keywords
human pluripotent stem cell
renal organoid
vascularization
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
间介中胚层样细胞在肾脏再生中的应用
被引量：
1
2
作者
张建烨
管勇
孔峰
赵升田
机构
山东大学
第二
医院
泌尿外科
山东大学第二医院中心实验室
山东大学
附属
山东
省立
医院
泌尿外科
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期291-299,共9页
基金
国家自然科学基金面上项目(81670625)~~
文摘
目的体外诱导脂肪干细胞分化为间介中胚层样细胞,对肾脏脱细胞支架进行再细胞化,经共培养构建有部分肾脏结构的组织工程肾脏。方法手术获取Wistar大鼠腹股沟脂肪垫,从中分离、培养原代脂肪干细胞后对其进行干细胞特性鉴定。经过在不同阶段添加糖原合成酶激酶3抑制剂(CHIR99021)和成纤维生长因子9(FGF9),诱导脂肪干细胞分化为间介中胚层样细胞,并于诱导7 d后进行间介中胚层相关蛋白鉴定。将诱导成功的间介中胚层样细胞结合制备好的肾脏脱细胞支架进行共培养,10 d后获取再细胞化的组织工程肾脏,并对其进行肾脏分化的鉴定。结果获取的脂肪干细胞具有成骨成脂及成软骨分化的能力,能表达脂肪干细胞表面标志物。体外诱导7 d后得到的间介中胚层样细胞经过免疫荧光鉴定可以观察到锌指蛋白转录因子和配对盒基因- 2的阳性表达,Western blot验证可得到同样的阳性结果。结合肾脏脱细胞支架后培养10 d,通过免疫荧光鉴定可以观察到Wilms肿瘤基因1、 GATA连接蛋白- 3和E-钙黏素的阳性表达。结论脂肪干细胞可被诱导分化为间介中胚层样细胞,诱导后的间介中胚层样细胞结合肾脏脱细胞支架可以观察到肾系分化的现象。
关键词
脂肪干细胞
间介中胚层样细胞
脱细胞支架
诱导分化
Keywords
adipose-drived stem cells
intermidate mesoderm-like cells
decellularized scaffold
differentiation
分类号
R692.5 [医药卫生—泌尿科学]
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职称材料
题名
Caveolae在高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成中的作用
3
作者
卢圣霞
刘元涛
孔峰
杜月娟
刘晔
傅余芹
机构
山东大学
第二
医院
肾脏内科
山东大学
第二
医院
内分泌科
山东大学第二医院中心实验室
济南市
中心
医院
肾脏内科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期626-631,共6页
基金
山东省自然科学基金资助项目(No.Y2006C36)
文摘
目的:探讨胞膜小凹(caveolae)在高糖(HG)诱导大鼠肾小球系膜细胞(MCs)细胞外基质(extra-cellular matrix,ECM)表达过程中的作用。方法:传代培养的大鼠MCs同步化后分为:(1)正常糖组;(2)HG组;(3)HG+甲基-β-环糊精(β-MCD)组;(4)HG+β-MCD+胆固醇组。用Western blotting检测小凹蛋白1(Cav-1)、磷酸化小凹蛋白1(p-Cav-1-Y14)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白的表达水平,用实时定量PCR检测细胞中Cav-1 mRNA表达变化,用ELISA方法检测上清中纤维连接蛋白(FN)的蛋白含量。结果:(1)高糖状态下,系膜细胞FN和ColⅠ蛋白表达水平均显著增加(均P<0.05)。(2)高糖培养显著增加p-Cav-1-Y14水平(P<0.01),而对Cav-1 mRNA及蛋白表达无明显影响(P>0.05)。(3)β-MCD预处理抑制了高糖诱导的p-Cav-1-Y14升高(P<0.01)及FN表达(P<0.05),但对高糖诱导的Col I表达无影响;β-MCD的作用可被胆固醇抑制。结论:高糖可显著增加系膜细胞1型胶原及纤维连接蛋白的合成。高糖诱导的纤维连接蛋白合成与Cav-1磷酸化水平增加有关。
关键词
小凹蛋白1
纤维连接蛋白
Ⅰ型胶原
Keywords
Caveolin-1
Fibronectin
Collagen type I
分类号
R587.1 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人多能干细胞诱导类肾的实验研究
俞欣
李开霖
孔峰
赵升田
张登禄
《南京医科大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2021
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
间介中胚层样细胞在肾脏再生中的应用
张建烨
管勇
孔峰
赵升田
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
Caveolae在高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质合成中的作用
卢圣霞
刘元涛
孔峰
杜月娟
刘晔
傅余芹
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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