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TNF-α增加骨髓间充质干细胞在肝缺血组织黏附的实验研究 被引量：2
1
作者 张肇林 梁艳红 +5 位作者 田铧 肖琼 王世坤 李鑫 王雪颖 田广平 《中国现代普通外科进展》 CAS 2010年第2期97-101,共5页
目的:研究炎性因子TNF-α对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)黏附分子表达及其干细胞特异性标志物的影响,探讨运用较少剂量的TNF-α诱导骨髓MSCs黏附分子的表达,促进其向肝缺血组织迁移。方法:用不同浓度的TNF-α刺激MSCs,检测其黏附分子的... 目的:研究炎性因子TNF-α对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)黏附分子表达及其干细胞特异性标志物的影响,探讨运用较少剂量的TNF-α诱导骨髓MSCs黏附分子的表达,促进其向肝缺血组织迁移。方法:用不同浓度的TNF-α刺激MSCs,检测其黏附分子的表达及干细胞标志物变化;取最佳浓度(10ng/mL)的TNF-α刺激MSCs,DiI标记后移植到肝脏缺血损伤的大鼠,检测大鼠肝功能,并取肝组织,荧光显微镜下计数组织中的MSCs。结果:1)MSCs受TNF-α刺激后,黏附分子VCAM-1表达升高,其表面干细胞标志物没有明显改变;2)10ng/mLTNF-α预刺激后,植到大鼠损伤肝组织内的MSCs数目明显多于对照组。结论:小浓度的TNF-α能够增强MSCs黏附分子VCAM-1的表达,且不影响大鼠骨髓MSCs干细胞的特性。大鼠体内实验证明TNF-α能促进MSCs的黏附,为治疗肝脏疾病提供理论基础。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 肿瘤坏死因子-Α 黏附分子 肝脏 大鼠 Wistar
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小鼠胚胎干细胞饲养层培养体系的优化筛选 被引量：7
2
作者 郭雨霁 高英茂 邴鲁军 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期437-441,共5页
目的 :建立小鼠胚胎干细胞饲养层培养体系。方法 :用 5种不同鼠胚成纤维细胞为饲养层 ,进行小鼠胚胎干细胞的分离培养 ,观察 5种饲养层培养体系对小鼠胚泡发育、内细胞团增殖及胚胎干细胞分离培养的作用。结果 :原代或冻存复苏后的原代... 目的 :建立小鼠胚胎干细胞饲养层培养体系。方法 :用 5种不同鼠胚成纤维细胞为饲养层 ,进行小鼠胚胎干细胞的分离培养 ,观察 5种饲养层培养体系对小鼠胚泡发育、内细胞团增殖及胚胎干细胞分离培养的作用。结果 :原代或冻存复苏后的原代培养鼠胚成纤维细胞用于制备饲养层 ,有利于胚泡的贴壁、孵化 ,内细胞团增殖形成巢式生长集落 ,离散后培养 ,可以观察到胚胎干细胞集落的出现 ,并可在短期内维持胚胎干细胞的正常形态 ,不发生分化 ,与其他三组有明显差异。结论 展开更多
关键词 小鼠 胚胎干细胞 饲养层 培养体系 优化筛选
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ECV304细胞用于三维血管新生的研究 被引量：14
3
作者 李明焕 田铧 +3 位作者 刘执玉 宋涛 李贵宝 田广平 《中国现代普通外科进展》 CAS 2004年第3期165-167,共3页
目的 :采用ECV30 4细胞 (人脐静脉内皮细胞株 )构建体外血管新生的三维模型 ,为ECV30 4细胞应用于体外血管新生的研究提供依据。方法 :制作鼠尾胶原三维凝胶 ,在凝胶表面种植ECV30 4细胞 ,培养至接近汇合状态 ,换用含碱性成纤维细胞生... 目的 :采用ECV30 4细胞 (人脐静脉内皮细胞株 )构建体外血管新生的三维模型 ,为ECV30 4细胞应用于体外血管新生的研究提供依据。方法 :制作鼠尾胶原三维凝胶 ,在凝胶表面种植ECV30 4细胞 ,培养至接近汇合状态 ,换用含碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的培养液继续培养 3～ 12d ,用倒置相差显微镜观察内皮细胞株向凝胶内迁移、生长状况。结果 :bFGF组ECV30 4细胞迁移到凝胶内不同层次 ,形成细胞条索并吻合成网 ;垂直切面上可见ECV30 4细胞从凝胶表面的单细胞层向凝胶内发芽生长 ,形成树枝状毛细血管样结构。结论 :ECV30 4细胞在三维胶原凝胶基质培养模型中 ,在适当的因子诱导下 ,能够表现出血管新生中的增殖、迁移、发芽等步骤 ,可以作为内皮工具来研究体外血管新生。 展开更多
关键词 ECV304细胞·鼠尾胶原·三维模型·新生血管化 生理性
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3种染料示踪剂对鼠肢体淋巴结示踪显色时间和淋巴管走行途径的比较研究 被引量：5
4
作者 吕顺增 李超 +3 位作者 赵婧 唐振宇 杨春林 田铧 《中国现代普通外科进展》 CAS 2012年第10期767-770,共4页
目的:探究亚甲蓝、伊文思蓝、中华墨汁在示踪鼠肢体淋巴结中的准确时间及淋巴管走行途径。方法:用浓度为1.0%的亚甲蓝、伊文思蓝及中华墨汁分别对活体和尸体大鼠或小鼠的足掌面进行皮下注射。观察其肢体淋巴结显色时间、被染淋巴结数目... 目的:探究亚甲蓝、伊文思蓝、中华墨汁在示踪鼠肢体淋巴结中的准确时间及淋巴管走行途径。方法:用浓度为1.0%的亚甲蓝、伊文思蓝及中华墨汁分别对活体和尸体大鼠或小鼠的足掌面进行皮下注射。观察其肢体淋巴结显色时间、被染淋巴结数目及四肢淋巴管走行。结果:1)亚甲蓝、伊文思蓝、中华墨汁对活体大鼠和小鼠前肢腋淋巴结的显色时间分别为10-12 s,4-5 s;对活体大鼠后肢和小鼠髂淋巴结显色时间分别为11-13 s,5-6 s;尸体大鼠或小鼠四肢淋巴结显色时间与活体相近。2)亚甲蓝、伊文思蓝、中华墨汁组大鼠前肢被染淋巴结数均为2个,小鼠均为2个;大鼠后肢被染淋巴结数均为2个,小鼠均为3个。结论:亚甲蓝、伊文思蓝、中华墨汁三种染料对大鼠和小鼠分别在11 s和5 s左右对活体与尸体四肢淋巴结进行有效的示踪。 展开更多
关键词 亚甲蓝 伊文思蓝 中华墨汁 淋巴结 示踪
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内皮微粒促进单核细胞介导的内皮细胞增殖作用的研究 被引量：1
5
作者 王世坤 张立平 +5 位作者 马凤英 田铧 张华 张向红 王立言 李鑫 《中国现代普通外科进展》 CAS 2011年第4期253-256,共4页
目的:研究内皮微粒对单核细胞介导的血管生成的影响。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,超速离心法获取上清中的微粒;将内皮微粒与THP-1细胞株共培养,运用PCR和ELISA检测THP-1细胞株中VEGF-A的表达情况;将内皮细胞和原始单核细胞或者经内皮... 目的:研究内皮微粒对单核细胞介导的血管生成的影响。方法:体外培养脐静脉内皮细胞,超速离心法获取上清中的微粒;将内皮微粒与THP-1细胞株共培养,运用PCR和ELISA检测THP-1细胞株中VEGF-A的表达情况;将内皮细胞和原始单核细胞或者经内皮微粒激活的单核细胞放入Transwell小室内分隔培养,用WST-1试剂盒检测内皮细胞增殖状况。结果:与对照组相比,内皮微粒刺激的THP-1细胞株表达VEGF-A mRNA的量升高,VEGF-A蛋白水平升高有统计学意义;增殖实验显示,与原始单核细胞共培养或者与内皮微粒激活的单核细胞共培养,内皮细胞与对照组相比,均有显著增殖;与内皮微粒激活的单核细胞共培养的HUVECs比与原始单核细胞共培养的HUVECs增生明显。结论:内皮微粒能促使单核细胞分泌VEGF-A,并促进单核细胞介导的内皮细胞增生,参与新生血管形成。 展开更多
关键词 微粒 单核细胞 VEGF-A 血管新生
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核仁素在结节性甲状腺肿与甲状腺乳头状癌中表达及意义的研究 被引量：3
6
作者 赵婧 吕顺增 +6 位作者 田铧 张华 房云海 杨春林 汪戈顿 杨馨妍 田广平 《中国现代普通外科进展》 CAS 2013年第4期265-269,共5页
目的:研究核仁素在结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌中的表达,探讨核仁素在二者疾病发生中的作用及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测36例结节性甲状腺肿及60例甲状腺乳头状癌中核仁素的表达,分析核仁素的表达与性别、年龄、有无转移... 目的:研究核仁素在结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌中的表达,探讨核仁素在二者疾病发生中的作用及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测36例结节性甲状腺肿及60例甲状腺乳头状癌中核仁素的表达,分析核仁素的表达与性别、年龄、有无转移及病理过程的关系。结果:核仁素在正常甲状腺、结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌中的总阳性率分别为0、44.4%、100%,差异有统计学意义(P<0.01)。结节性甲状腺肿中核仁素表达于结节期的滤泡上皮细胞核,而胶质贮存期滤泡上皮与结节期的纤维组织不表达。核仁素在伴有转移的乳头状癌组织中表达于细胞核、细胞质与细胞膜,而核仁素在无转移的癌组织中仅表达于细胞核,差异均有统计学意义(P<0.01)。核仁素表达与患者年龄、性别无关(P>0.05)。结论:核仁素参与了结节性甲状腺肿及甲状腺乳头状癌的病理过程,表达随疾病恶化而向核外转移。核仁素可作为判断甲状腺乳头状癌有无转移的客观指标,对指导临床治疗有重要意义。 展开更多
关键词 核仁素·结节性甲状腺肿·甲状腺乳头状癌
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ECV304细胞株用于体外血管新生的实验研究
7
作者 李明焕 田铧 +2 位作者 梁翠宏 李贵宝 刘执玉 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期702-703,共2页
血管新生与肿瘤的生长、组织损伤修复等病理生理过程密切相关而备受关注.体外血管新生模型有助于研究某种因素对血管形成的影响而成为常用的研究手段.体外血管新生研究中,由于原代培养的人脐静脉内皮细胞增殖活性低、传代次数少,因而多... 血管新生与肿瘤的生长、组织损伤修复等病理生理过程密切相关而备受关注.体外血管新生模型有助于研究某种因素对血管形成的影响而成为常用的研究手段.体外血管新生研究中,由于原代培养的人脐静脉内皮细胞增殖活性低、传代次数少,因而多采用细胞株作为内皮材料.ECV304细胞是自发转化的人脐静脉内皮细胞株,但是Ⅷ因子相关抗原为阴性,因此部分学者对ECV304的应用产生质疑[1,2].本研究采用ECV304细胞构建体外血管新生二维、三维模型,对其可行性进行探讨. 展开更多
关键词 ECV304细胞 静脉内皮细胞株 血管新生 内皮细胞增殖活性 Ⅷ因子相关抗原 病理生理过程 人脐静脉 三维模型
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选择式和追踪式教学法在断层解剖学教学中的运用 被引量：4
8
作者 赵鹏 刘树伟 +3 位作者 李振平 陈彦文 孟海伟 高晓兰 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期143-144,共2页
断层解剖学是用断层方法研究和表达人体正常形态结构及其基本功能的科学，属于解剖学的一个分支。众所周知，教学法是决定教学效果的重要因素。断层解剖学教学的一个误区是让学生一个断层一个断层，一个结构一个结构的逐一“死记硬背”... 断层解剖学是用断层方法研究和表达人体正常形态结构及其基本功能的科学，属于解剖学的一个分支。众所周知，教学法是决定教学效果的重要因素。断层解剖学教学的一个误区是让学生一个断层一个断层，一个结构一个结构的逐一“死记硬背”。合理运用多种教学方法即可抓住重点又可举一反三，而且对于拓展学生分析和解决临床问题的能力具有重要意义。现将选择式和追踪式教学法介绍如下。 展开更多
关键词 断层解剖学教学 教学法 追踪 形态结构 教学效果 教学方法 临床问题 学生
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简便有效分离培养大鼠主动脉内皮细胞的一种新方法 被引量：7
9
作者 肖琼 房云海 +3 位作者 徐蕴 田铧 张立平 田兴松 《中国现代普通外科进展》 CAS 2008年第2期111-113,共3页
目的:探索分离、培养鼠主动脉内皮细胞的有效方法。方法:将鼠主动脉内膜翻向外,结扎两端,置于50mL培养瓶中培养、传代,Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色。结果:培养6～8d时有少量细胞自主动脉迁移出并贴壁生长;12～14d时贴壁细胞覆盖大... 目的:探索分离、培养鼠主动脉内皮细胞的有效方法。方法:将鼠主动脉内膜翻向外,结扎两端,置于50mL培养瓶中培养、传代,Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色。结果:培养6～8d时有少量细胞自主动脉迁移出并贴壁生长;12～14d时贴壁细胞覆盖大部分培养瓶面,约80%的细胞汇合成单层;传代细胞生长旺盛;细胞汇合后呈现典型的"鹅卵石"样内皮细胞特征,内皮细胞标志物Ⅷ因子相关抗原表达阳性;未见杂细胞。结论:此方法无损伤、不需要酶消化,能比较容易的获得高纯度大鼠原代主动脉内皮细胞,适用于细小血管内皮细胞的分离与培养。 展开更多
关键词 主动脉 体外培养 内皮细胞 大鼠
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体外诱导外周血单核细胞表达淋巴管内皮细胞表型
10
作者 王长明 田铧 +5 位作者 张立平 扈燕来 徐蕴 邰浩清 丁海玲 王雪颖 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期593-595,679,共4页
目的：探讨单核细胞在体外转分化为淋巴管内皮细胞的可能性。方法：取成人新鲜外周血，分离单核细胞，分别在层粘连蛋白 （FN）铺板或血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、白介素-3（IL-3）、白介素-7（IL-7）刺激下诱导培养24h，通过形态学... 目的：探讨单核细胞在体外转分化为淋巴管内皮细胞的可能性。方法：取成人新鲜外周血，分离单核细胞，分别在层粘连蛋白 （FN）铺板或血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、白介素-3（IL-3）、白介素-7（IL-7）刺激下诱导培养24h，通过形态学分析、RT-PCR和免疫荧光细胞化学分析方法检测单核细胞中淋巴管内皮特异性标志物LYVE1、 podoplanin、 Prox1及内皮细胞共同抗原vWF、 eNOS的表达。在此基础上，进一步用内皮细胞培养基-2（EGM-2） 、 VEGF-C和FN铺板联合诱导单核细胞向淋巴管内皮细胞转分化。结果：单核细胞经FN、 VEGF-C、 IL-3、 IL-7短暂诱导即能表达LYVE-1、 podoplanin、 Prox1，而不表达vWF、 eNOS。结论：单核细胞在炎症或者内皮细胞生长环境中可以表达淋巴管内皮细胞标志物，但尚不能证实转化为真正的淋巴管内皮细胞。 展开更多
关键词 单核细胞 转分化 淋巴管内皮细胞 体外培养
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