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高三尖杉酯碱对HL6 0细胞凋亡的影响及机制的研究 被引量：6
1
作者 陈春燕 贾继辉 +3 位作者 潘祥林 张琦 王涓冬 周亚滨 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1183-1186,共4页
目的 :研究高三尖杉酯碱对HL6 0细胞凋亡的影响及其机制。方法 :运用高三尖杉酯碱作用HL6 0细胞后撤药实验筛选其诱导HL6 0细胞凋亡启动时相 ,流式细胞和免疫组化技术检测高三尖杉酯碱诱导HL6 0细胞凋亡启动时相凋亡信号分子Bcl - 2、Ba... 目的 :研究高三尖杉酯碱对HL6 0细胞凋亡的影响及其机制。方法 :运用高三尖杉酯碱作用HL6 0细胞后撤药实验筛选其诱导HL6 0细胞凋亡启动时相 ,流式细胞和免疫组化技术检测高三尖杉酯碱诱导HL6 0细胞凋亡启动时相凋亡信号分子Bcl - 2、Bax、Fas/FasL、caspase - 3、ERK2和p38的表达状况。结果 :在高三尖杉酯碱诱导HL6 0细胞凋亡启动时相 ,Bcl- 2表达降低 ,Bax表达增高 ,Bcl - 2 /Bax比值降低 ,ERK2表达减低 ,p38表达增加 ,cas pase- 3表达增加 ,Fas/FasL分子的表达无显著变化。结论 :Bcl- 2、Bax、MAPK途径和caspase - 3参与高三尖杉酯碱启动HL6 展开更多
关键词 白血病 HL60细胞 细胞凋亡 信号转导 高三尖杉酯碱
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侵袭性牙周炎与慢性牙周炎病变位点中人巨细胞病毒的定量检测 被引量：10
2
作者 李潇 孙钦峰 +2 位作者 孙允东 葛少华 杨丕山 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期242-245,共4页
目的应用实时荧光定量PCR方法检测侵袭性牙周炎(AgP)及慢性牙周炎(CP)患者龈下样本中人巨细胞病毒(HCMV)的DNA载量,探讨HCMV感染与牙周炎之间的关系。方法选择18例AgP患者、24例CP患者及15例牙周健康对照者,收集龈下样本114例。构建含有... 目的应用实时荧光定量PCR方法检测侵袭性牙周炎(AgP)及慢性牙周炎(CP)患者龈下样本中人巨细胞病毒(HCMV)的DNA载量,探讨HCMV感染与牙周炎之间的关系。方法选择18例AgP患者、24例CP患者及15例牙周健康对照者,收集龈下样本114例。构建含有HCMV高保守片段的重组质粒,制备标准品DNA模板,建立并应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,检测样本中HCMV的DNA载量。结果 AgP病变位点、CP病变位点以及牙周健康位点中HCMV的阳性检出率分别为58.3%、41.7%和6.7%。AgP和CP病变位点中HCMV的阳性检出率显著高于牙周健康位点(P<0.01)。在AgP病变位点中,病毒载量在104以上的位点占33.3%,明显高于CP病变位点的10.4%,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HCMV感染与牙周炎的发生发展密切相关,其活动性感染可能与AgP组织破坏的迅速进展有关。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 侵袭性牙周炎 慢性牙周炎
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高三尖杉酯碱白血病多药耐药细胞系K562/HHT的诱导及米非司酮逆转耐药的研究 被引量：5
3
作者 刘永 陈春燕 +3 位作者 孔德晓 王琳琳 曹倩 贾继辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2168-2172,共5页
目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)诱导的白血病多药耐药细胞株耐药机制以及米非司酮(RU486)逆转其耐药效应。方法:采用反复短期暴露并逐渐增加HHT浓度的方法建立白血病多药耐药细胞系K562/HHT,MTT法检测K562/HHT细胞对化疗药物的敏感性及RU48... 目的:研究高三尖杉酯碱(HHT)诱导的白血病多药耐药细胞株耐药机制以及米非司酮(RU486)逆转其耐药效应。方法:采用反复短期暴露并逐渐增加HHT浓度的方法建立白血病多药耐药细胞系K562/HHT,MTT法检测K562/HHT细胞对化疗药物的敏感性及RU486对该细胞的细胞毒效应,RT-PCR法检测细胞MDR1基因、葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)基因的表达,流式细胞术检测细胞P-糖蛋白的表达和柔红霉素积累量,免疫组化法检测细胞Bcl-2、Bax、caspase-3的表达状况。结果:成功诱导出多药耐药细胞系K562/HHT,K562/HHT较其亲代细胞K562对HHT、阿霉素、长春新碱、依托泊苷的耐药性分别提高462.6、2.8、1183.4、2.6倍,K562/HHT细胞MDR1基因、GCS基因、P-糖蛋白和Bcl-2/Bax比值明显高于K562细胞(P<0.05),caspase-3表达、柔红霉素积累量明显低于K562细胞(P<0.05)。10μmol/L的RU486对K562/HHT细胞无明显杀伤(存活率94.67%±2.48%),该浓度RU486可不同程度地逆转K562/HHT细胞对上述化疗药物的耐药性,RU486作用后K562/HHT细胞caspase-3表达、柔红霉素积累量明显高于作用前(P<0.05),Bcl-2/Bax比值明显低于作用前(P<0.05)。结论:白血病细胞系K562在HHT的作用下可形成多药耐药细胞系K562/HHT,其耐药性的形成与P-糖蛋白、GCS、Bcl-2/Bax比值及caspase-3等机制有关,RU486可通过提高细胞内药物积累、调节Bcl-2/Bax比值和caspase-3的表达逆转此细胞的耐药性。 展开更多
关键词 高三尖杉酯碱 米非司酮 抗药性 多药 K562细胞
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CpG-ODN诱导白血病HL60细胞分化和凋亡的研究 被引量：4
4
作者 陈春燕 贾继辉 +4 位作者 潘祥林 张琦 周亚滨 阎世坤 赵蔚明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期407-411,共5页
目的:研究含CpG基序的寡核苷酸对白血病HL60细胞的作用。方法:设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)、不含CpG基序的寡核苷酸(nonCpG-ODN)和含甲基化CpC基序的寡核苷酸(ZpG-ODN)分别作用于白血病HL60细胞,MIT法测定HL60细胞抑制效应,... 目的:研究含CpG基序的寡核苷酸对白血病HL60细胞的作用。方法:设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)、不含CpG基序的寡核苷酸(nonCpG-ODN)和含甲基化CpC基序的寡核苷酸(ZpG-ODN)分别作用于白血病HL60细胞,MIT法测定HL60细胞抑制效应,硝基四氮唑蓝还原实验和细胞表面CD14分子表达状况分析HL60细胞诱导分化结果,流式细胞仪和透射电镜观察HL60细胞的凋亡现象,免疫组化检测HL60细胞后caspase 3、Bel-2和Bax的表达状况。结果:CpG-ODN对白血病HL60细胞有诱导分化和诱导凋亡作用,nonCPG-ODN和ZpG-ODN无此作用。结论:CpG-ODN可直接诱导白血病HL60细胞分化和凋亡,此为白血病免疫治疗提供了新的途径。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 HL60细胞 细胞凋亡
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肿瘤抑制因子RUNX3对人胃癌细胞中凋亡相关基因表达的影响 被引量：4
5
作者 张春艳 刘志方 +3 位作者 徐霞 曾季平 于晗 贾继辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1249-1253,共5页
目的:研究肿瘤抑制因子人类Runt相关转录因子3(RUNX3)对人胃癌细胞BGC823中凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(bcl-2)、bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9... 目的:研究肿瘤抑制因子人类Runt相关转录因子3(RUNX3)对人胃癌细胞BGC823中凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(bcl-2)、bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)表达的影响,以揭示RUNX3促进胃癌细胞凋亡的作用机制。方法:首先构建人Runx3的真核生物表达载体pcDNA3.1-Runx3,将pcDNA3.1-Runx3及空载体pcDNA3.1分别转染BGC823细胞48h后,提取细胞的总RNA和蛋白质,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)分别检测转染不同载体的细胞内RUNX3的表达情况,然后用RT-PCR和West-ern blotting检测凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3、caspase-8和caspase-9的表达及蛋白的表达,β-actin作为内对照。结果:我们成功构建了人Runx3的真核生物表达载体pcDNA3.1-Runx3,将其转染BGC823细胞后,RT-PCR和Western blotting结果均显示:转染pcDNA3.1-Runx3的细胞中RUNX3的表达水平明显高于转染空载体pcDNA3.1的细胞(P<0.05);转染pcDNA3.1-Runx3的细胞中bcl-2基因的表达水平明显降低,caspase-3、caspase-9基因的表达水平明显增加(P<0.05)。结论:在BGC823细胞中,RUNX3通过下调bcl-2,上调caspase-3、caspase-9的表达促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 RUNT相关转录因子3 BGC823细胞 细胞凋亡
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人唇腺和腮腺CCL28表达比较 被引量：1
6
作者 刘雪 姜淑敏 +3 位作者 唐伟 姚丽霞 王更如 姜广水 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期535-537,共3页
目的比较人小涎腺与大涎腺CCL28的表达差异,以期探讨CCL28在小涎腺IgA分泌中的作用。方法应用实时荧光定量PCR技术,分别检测13例健康成人唇腺和8例健康成人腮腺标本中CCL28mRNA表达的相对量;然后用SPSS10.0统计软件对数据进行秩和检验... 目的比较人小涎腺与大涎腺CCL28的表达差异,以期探讨CCL28在小涎腺IgA分泌中的作用。方法应用实时荧光定量PCR技术,分别检测13例健康成人唇腺和8例健康成人腮腺标本中CCL28mRNA表达的相对量;然后用SPSS10.0统计软件对数据进行秩和检验。结果CCL28mRNA在人的唇腺中有丰富的表达,并且唇腺中的CCL28mRNA的表达量高于腮腺(P<0.01)。结论唇腺中CCL28表达量显著高于腮腺,说明小涎腺分泌高浓度IgA可能与CCL28高表达有关。 展开更多
关键词 唇腺 腮腺 实时荧光定量PCR
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源于细菌CpG基序的寡核苷酸激活单核/巨噬细胞抗白血病效应的研究
7
作者 陈春燕 王红艳 +4 位作者 曹倩 肖颖 王琳琳 张荣梅 贾继辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期982-985,共4页
目的:研究源于细菌CpG基序的寡核苷酸激活单核/巨噬细胞抗白血病细胞的作用。方法:用血细胞分离机从健康人外周血分离并诱导出单核-巨噬细胞,流式细胞仪检测细胞表面CD14分子和CD16分子表达状况。设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)... 目的:研究源于细菌CpG基序的寡核苷酸激活单核/巨噬细胞抗白血病细胞的作用。方法:用血细胞分离机从健康人外周血分离并诱导出单核-巨噬细胞,流式细胞仪检测细胞表面CD14分子和CD16分子表达状况。设计合成含CpG基序的寡核苷酸(CpG-ODN)和不含CpG基序的寡核苷酸(nonCpG-ODN)分别作用于单核/巨噬细胞,MTT法检测经寡核苷酸作用后,单核/巨噬细胞抗白血病K562细胞的效应,用ELISA法检测其分泌细胞因子IL-12、TNF-α的表达。结果:从健康人外周血分离并成功诱导出单核/巨噬细胞,证实CpG-ODN作用于单核/巨噬细胞,可显著增强单核/巨噬细胞体外抗白血病细胞的作用,同时能促进单核/巨噬细胞分泌细胞因子IL-12、TNF-α。结论:源于细菌CpG-ODN可增强单核/巨噬细胞介导的抗白血病细胞作用,此为白血病免疫治疗提供了新的途径。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 单核细胞 巨噬细胞 白血病 K562细胞
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胃癌多药耐药细胞株BGC823/5-FU的建立及其耐药机制的研究 被引量：6
8
作者 杨皎娃 牛建花 +3 位作者 曾季平 刘永 贾继辉 陈春燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2167-2170,共4页
目的:建立5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的胃癌多药耐药细胞株BGC823/5-FU,探讨凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2、Bax及caspase-3与其耐药性产生的关系。方法:采用反复短期暴露并逐渐增加5-FU浓度的方法建立胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU,MTT法检测此... 目的:建立5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的胃癌多药耐药细胞株BGC823/5-FU,探讨凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2、Bax及caspase-3与其耐药性产生的关系。方法:采用反复短期暴露并逐渐增加5-FU浓度的方法建立胃癌耐药细胞株BGC823/5-FU,MTT法检测此耐药细胞株对5-FU的耐药倍数及其对临床常用化疗药物阿霉素、丝裂霉素和顺铂的交叉耐药性,流式细胞术检测细胞P-糖蛋白的表达和柔红霉素积累量;Western blotting法检测耐药胃癌细胞株BGC823/5-FU与其亲代药物敏感胃癌细胞株BGC823凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达。结果:成功诱导出胃癌多药耐药细胞株BGC823/5-FU,较其亲代细胞BGC823对5-FU、阿霉素、丝裂霉素和顺铂的耐药性分别提高10.82、2.50、22.23和2.00倍。其P-糖蛋白表达较BGC823细胞增高(P<0.01),柔红霉素积累量较BGC823细胞减低(P<0.01)。与亲代药物敏感BGC823细胞相比,耐药细胞株BGC823/5-FU细胞Survivin表达上升(P<0.05),Bcl-2表达升高(P<0.05),Bax表达下降(P<0.05),caspase-3表达减低(P<0.05)。结论:胃癌细胞株BGC823在5-FU的诱导下可形成多药耐药细胞株BGC823/5-FU,P-糖蛋白、凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2、Bax及caspase-3可能参与其耐药性的形成。 展开更多
关键词 胃肿瘤 氟尿嘧啶 抗药性 多药 细胞凋亡
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